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一種提取芳香胺的方法、檢測(cè)方法、試劑盒及用途與流程

文檔序號(hào):12590155閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種提取芳香胺的方法,包括如下步驟,

(1)用強(qiáng)酸溶液浸提樣品,分離得到初提液;所述樣品為煙草和/或煙草制品;

(2)將初提液的pH值調(diào)整至大于7,用脂肪醚進(jìn)行萃取,分離得到萃取液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取方法,其還包括如下步驟,

(3)去除萃取液中的脂肪醚,得到萃取物,將所述萃取物溶解于甲醇,得到提取液;

優(yōu)選地,步驟(3)中,通過(guò)將萃取液進(jìn)行干燥來(lái)去除脂肪醚;更優(yōu)選地,干燥方式為氮?dú)獯蹈桑?/p>

優(yōu)選地,步驟(3)中,甲醇的體積用量為萃取液體積的50%-200%,更優(yōu)選為80%-120%,進(jìn)一步優(yōu)選為100%;

優(yōu)選地,步驟(3)中,去除脂肪醚前,還包括向萃取液中加入弱酸或弱酸溶液進(jìn)行混合的步驟;

更優(yōu)選地,所述弱酸為醋酸;進(jìn)一步優(yōu)選地,所述醋酸的純度為99%-100%(W/W),更加優(yōu)選為99.5%(W/W);

更優(yōu)選地,所述弱酸溶液為醋酸水溶液;進(jìn)一步優(yōu)選地,所述醋酸水溶液的濃度不超過(guò)99%(W/W),更加優(yōu)選為40%-70%(W/W)、50%(W/W)、60%(W/W)或80%(W/W);

更優(yōu)選地,所述弱酸溶液(以弱酸計(jì))或弱酸的添加量為0.1-0.8mL/(mL萃取液),進(jìn)一步優(yōu)選為0.3-0.7mL/(mL萃取液),更加優(yōu)選為0.5mL/(mL萃取液)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的提取方法,其特征在于如下A至M中的任意一項(xiàng)或者多項(xiàng):

A.步驟(1)中,所述強(qiáng)酸溶液為強(qiáng)酸水溶液;優(yōu)選地,所述強(qiáng)酸水溶液選自鹽酸水溶液和硝酸水溶液中的一種或多種;

B.步驟(1)中,所述強(qiáng)酸溶液為稀溶液;

C.步驟(1)中,所述強(qiáng)酸溶液的濃度為1%-10%(W/W),優(yōu)選為2%-8%(W/W),更優(yōu)選為5%(W/W);

D.步驟(1)中,所述浸提的料液比為1:(20-100)(g/mL),優(yōu)選為1:(40-70)(g/mL),更優(yōu)選為1:50(g/mL);

E.步驟(1)中,浸提時(shí)間為10-150分鐘,優(yōu)選為20-100分鐘,更優(yōu)選為30分鐘;

F.步驟(1)中,所述浸提在超聲條件下進(jìn)行;

G.步驟(2)中,將所述初提液的pH值調(diào)整至大于8,優(yōu)選為大于10,更優(yōu)選為13以上;

H.步驟(2)中,通過(guò)向初提液中加入固體堿或堿溶液來(lái)調(diào)整pH值,優(yōu)選加入固體堿;更優(yōu)選地,固體堿選自氫氧化鈉和氫氧化鉀中的一種或多種;

I.步驟(2)中,萃取前,還包括將調(diào)整完pH值的初提液靜置冷卻的步驟;優(yōu)選地,靜置冷卻的時(shí)間為5分鐘;

J.步驟(2)中,所述脂肪醚為極性脂肪醚,優(yōu)選為低沸點(diǎn)的極性脂肪醚,更優(yōu)選沸點(diǎn)為40-70℃,進(jìn)一步優(yōu)選沸點(diǎn)為50-60℃;優(yōu)選地,所述脂肪醚選自乙醚和叔丁基甲醚中的一種或多種,更優(yōu)選為叔丁基甲醚;

K.步驟(2)中,所述脂肪醚的用量為5-40mL/(g樣品),優(yōu)選為10-30mL/(g樣品),更優(yōu)選為20mL/(g樣品);

L.步驟(2)中,萃取時(shí)間為5-20分鐘,優(yōu)選為10分鐘;

M.步驟(1)中,所述芳香胺選自鄰氨基偶氮甲苯、4-氨基聯(lián)苯、2-氨基-4-硝基甲苯、聯(lián)苯胺、對(duì)氯苯胺、4-氯-鄰甲基苯胺、2-甲氧基-5-甲基苯胺、2-奈胺、4,4'-二氨基二苯基甲烷、2,4-二氨基甲苯、3,3'-二氯聯(lián)苯胺、3,3'-二甲氧基聯(lián)苯胺、3,3'-甲基-4,4'-二氨基二苯甲烷、4,4'-亞甲基-二-(2-氯苯胺)、4,4'-二氨基二苯醚、鄰甲苯胺、4-氨基偶氮苯、2-氨基苯甲醚、2,4-二甲基苯胺和2,6-二甲基苯胺中的一種或多種。

4.一種檢測(cè)芳香胺的方法,包括按照權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的提取方法獲得萃取液和/或提取液的步驟;還包括用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定萃取液和/或提取液的步驟。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)方法,其中,所述測(cè)定為定量檢測(cè),優(yōu)選為內(nèi)標(biāo)法定量檢測(cè);更優(yōu)選地,內(nèi)標(biāo)物為d7-1-氨基萘。

6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的檢測(cè)方法,其中,液相色譜的操作條件包括如下a至d中的任意一項(xiàng)或者多項(xiàng):

a.色譜柱為菲羅門(mén)Agilent ZORBAX SB-C3液相色譜柱;優(yōu)選地,色譜柱的規(guī)格為150mm×2.1mm i.d.,5μm粒徑;

b.色譜柱的溫度為25-50℃,優(yōu)選為30-50℃,更優(yōu)選為40℃;

c.進(jìn)樣量為1-10μL,優(yōu)選為2-8μL,更優(yōu)選為3μL;

d.流動(dòng)相由流動(dòng)相A和流動(dòng)相B組成,流動(dòng)相A為甲醇,流動(dòng)相B為0.1%(V/V)乙酸水溶液;優(yōu)選地,流動(dòng)相的洗脫程序如下表所示,

7.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的檢測(cè)方法,其中,質(zhì)譜的操作條件或參數(shù)包括如下1)至66)中的任意一項(xiàng)或者多項(xiàng):

1)離子源為電噴霧電離源;

2)掃描方式為正離子掃描;

3)檢測(cè)方式為多反應(yīng)監(jiān)測(cè);

4)電噴霧電壓為4000-7000V,優(yōu)選為5000-6000V,更優(yōu)選為5500V;

5)離子源溫度為500-750℃,優(yōu)選為550-700℃,更優(yōu)選為650℃;

6)輔助氣Gas1和/或Gas2的壓力為40-70psi,優(yōu)選為50-60psi,更優(yōu)選為50psi或60psi;

7)鄰氨基偶氮甲苯的定量離子對(duì)為226.1/91.1;

8)鄰氨基偶氮甲苯的定性離子對(duì)為226.1/121.1;

9)鄰氨基偶氮甲苯的碰撞能為20V;

10)4-氨基聯(lián)苯的定量離子對(duì)為170.1/153.2;

11)4-氨基聯(lián)苯的定性離子對(duì)為170.1/152.1;

12)4-氨基聯(lián)苯的碰撞能為20V;

13)2-氨基-4-硝基甲苯的定量離子對(duì)為153.1/107.1;

14)2-氨基-4-硝基甲苯的定性離子對(duì)為153.1/89.9;

15)2-氨基-4-硝基甲苯的碰撞能為25V;

16)聯(lián)苯胺的定量離子對(duì)為184.1/156;

17)聯(lián)苯胺的定性離子對(duì)為184.1/166;

18)聯(lián)苯胺的碰撞能為40V;

19)對(duì)氯苯胺的定量離子對(duì)為128/93.1;

20)對(duì)氯苯胺的定性離子對(duì)為128/111.2;

21)對(duì)氯苯胺的碰撞能為20V;

22)4-氯-鄰甲基苯胺的定量離子對(duì)為142/107.2;

23)4-氯-鄰甲基苯胺的定性離子對(duì)為142/125.2;

24)4-氯-鄰甲基苯胺的碰撞能為23V;

25)2-甲氧基-5-甲基苯胺的定量離子對(duì)為138.1/123.2;

26)2-甲氧基-5-甲基苯胺的定性離子對(duì)為138.1/105.2;

27)2-甲氧基-5-甲基苯胺的碰撞能為20V;

28)2-奈胺的定量離子對(duì)為144.1/127.1;

29)2-奈胺的定性離子對(duì)為144.1/77.2;

30)2-奈胺的碰撞能為25V;

31)4,4’-二氨基二苯基甲烷的定量離子對(duì)為199.1/106.2;

32)4,4’-二氨基二苯基甲烷的定性離子對(duì)為199.1/77.2;

33)4,4’-二氨基二苯基甲烷的碰撞能為30V;

34)2,4-二氨基甲苯的定量離子對(duì)為123.1/108;

35)2,4-二氨基甲苯的定性離子對(duì)為123.1/106.1;

36)2,4-二氨基甲苯的碰撞能為23V;

37)3,3’-二氯聯(lián)苯胺的定量離子對(duì)為253.1/217.1;

38)3,3’-二氯聯(lián)苯胺的定性離子對(duì)為253.1/182.1;

39)3,3’-二氯聯(lián)苯胺的碰撞能為30V;

40)3,3’-二甲氧基聯(lián)苯胺的定量離子對(duì)為245.2/230.2;

41)3,3’-二甲氧基聯(lián)苯胺的定性離子對(duì)為245.2/213.2;

42)3,3’-二甲氧基聯(lián)苯胺的碰撞能為25V;

43)3,3’-甲基-4,4’-二氨基二苯甲烷的定量離子對(duì)為227.2/120.2;

44)3,3’-甲基-4,4’-二氨基二苯甲烷的定性離子對(duì)為227.2/178.2;

45)3,3’-甲基-4,4’-二氨基二苯甲烷的碰撞能為25V;

46)4,4’-亞甲基-二-(2-氯苯胺)的定量離子對(duì)為267.2/231.2;

47)4,4’-亞甲基-二-(2-氯苯胺)的定性離子對(duì)為267.2/140.2;

48)4,4’-亞甲基-二-(2-氯苯胺)的碰撞能為30V;

49)4,4’-二氨基二苯醚的定量離子對(duì)為201.1/108.3;

50)4,4’-二氨基二苯醚的定性離子對(duì)為201.1/184;

51)4,4’-二氨基二苯醚的碰撞能為23V;

52)鄰甲苯胺的定量離子對(duì)為108.1/91.4;

53)鄰甲苯胺的定性離子對(duì)為108.1/93.2;

54)鄰甲苯胺的碰撞能為23V;

55)4-氨基偶氮苯的定量離子對(duì)為198.2/77.2;

56)4-氨基偶氮苯的定性離子對(duì)為198.2/51.2;

57)4-氨基偶氮苯的碰撞能為23V;

58)2-氨基苯甲醚的定量離子對(duì)為124.4/109.2;

59)2-氨基苯甲醚的定性離子對(duì)為124.1/92.3;

60)2-氨基苯甲醚的碰撞能為23V;

61)2,4-二甲基苯胺的定量離子對(duì)為122.1/107.2;

62)2,4-二甲基苯胺的定性離子對(duì)為122.1/105.2;

63)2,4-二甲基苯胺的碰撞能為23V;

64)2,6-二甲基苯胺的定量離子對(duì)為122.1/105.3;

65)2,6-二甲基苯胺的定性離子對(duì)為122.1/107.2;

66)2,6-二甲基苯胺的碰撞能為23V。

8.一種試劑盒,包含,

Ⅰ.鹽酸水溶液;

II.氫氧化鈉固體和/或氫氧化鈉水溶液;和

III.乙醚和/或叔丁基甲醚;

優(yōu)選地,所述試劑盒還包含醋酸和甲醇;更優(yōu)選地,所述醋酸的純度為99%-100%(W/W),更加優(yōu)選為99.5%(W/W);

優(yōu)選地,所述試劑盒還包含液相色譜柱;更優(yōu)選地,所述液相色譜柱為菲羅門(mén)Agilent ZORBAX SB-C3液相色譜柱;

優(yōu)選地,所述試劑盒還包含0.1%(V/V)乙酸水溶液;

優(yōu)選地,所述鹽酸水溶液的濃度為1-10%(W/W),更優(yōu)選為5%(W/W)。

9.權(quán)利要求8所述試劑盒在提取和/或檢測(cè)樣品中的芳香胺中的用途;所述樣品為煙草和/或煙草制品。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的用途,其中,所述芳香胺選自鄰氨基偶氮甲苯、4-氨基聯(lián)苯、2-氨基-4-硝基甲苯、聯(lián)苯胺、對(duì)氯苯胺、4-氯-鄰甲基苯胺、2-甲氧基-5-甲基苯胺、2-奈胺、4,4'-二氨基二苯基甲烷、2,4-二氨基甲苯、3,3'-二氯聯(lián)苯胺、3,3'-二甲氧基聯(lián)苯胺、3,3'-甲基-4,4'-二氨基二苯甲烷、4,4'-亞甲基-二-(2-氯苯胺)、4,4'-二氨基二苯醚、鄰甲苯胺、4-氨基偶氮苯、2-氨基苯甲醚、2,4-二甲基苯胺和2,6-二甲基苯胺中的一種或多種。

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