本發(fā)明涉及生物技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域，尤其應(yīng)用于化學(xué)物質(zhì)對于線蟲趨利及趨避的檢測。

背景技術(shù)：

模式生物秀麗隱桿線蟲是適合研究高等動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)的最簡單模型，具有易于飼養(yǎng)、生長周期短、遺傳操作簡單、基因背景及細(xì)胞譜系清楚等優(yōu)點(diǎn)。線蟲的神經(jīng)系統(tǒng)雖然相對簡單，但卻對機(jī)械感覺、化學(xué)物質(zhì)、溫度等外界刺激具有靈敏的感知及反應(yīng)能力，其神經(jīng)系統(tǒng)含有高等動(dòng)物腦的大多數(shù)分子成分，包括多巴胺、5-羥色胺、腎上腺素等。線蟲具有靈敏的嗅覺，用測定趨避指數(shù)和趨向指數(shù)的方法發(fā)現(xiàn)，線蟲可以被一些香精香料如安息香醛所趨化。因此可以推測線蟲對煙草的反應(yīng)并不只是局限于對尼古丁，還包括對煙草中的香精香料。線蟲對香精香料的趨向/趨避指數(shù)可以用來反應(yīng)這些香精香料化學(xué)成分對線蟲嗅覺系統(tǒng)的刺激強(qiáng)度。

現(xiàn)有的測定線蟲趨利、趨避指數(shù)一般通過平板分區(qū)的方法進(jìn)行，即在平板上劃分不同區(qū)域，然后將待測物質(zhì)放置于不同區(qū)域，一定時(shí)間后觀察區(qū)域內(nèi)的線蟲數(shù)量。該方法存在一定的局限性，首先如果待測物質(zhì)是液體，則會(huì)在線蟲培養(yǎng)基上緩慢擴(kuò)散，此外由于線蟲會(huì)在平板上會(huì)進(jìn)行不規(guī)則的運(yùn)動(dòng)，這兩者都會(huì)給趨利趨避帶來不準(zhǔn)確性。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對上述技術(shù)現(xiàn)狀，本發(fā)明通過構(gòu)建一個(gè)趨利、趨避的定向檢測系統(tǒng)，線蟲只能定向運(yùn)動(dòng)，且有專門的加樣孔，從而避免待測物質(zhì)的擴(kuò)散，從而增加試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

本發(fā)明第一方面設(shè)計(jì)了一種線蟲定向趨利、趨避檢測裝置，其包括培養(yǎng)皿1，所述培養(yǎng)皿1包括：

線蟲滴加孔4，位于所述培養(yǎng)皿1的中部；

多個(gè)線蟲運(yùn)動(dòng)凹槽2，在培養(yǎng)皿1中成放射狀分布，其一端與所述線蟲滴加孔4連通；

對照樣加樣孔3，與所述多個(gè)線蟲運(yùn)動(dòng)凹槽2的其中一個(gè)的另一端連通；

待測樣品加樣孔5，與剩余的所述多個(gè)線蟲運(yùn)動(dòng)凹槽2的另一端連通。

本發(fā)明第二方面涉及線蟲定向趨利、趨避檢測方法，其使用根據(jù)上述的測定裝置來實(shí)施，并包括以下步驟：首先將線蟲培養(yǎng)基加在線蟲運(yùn)動(dòng)凹槽2上；然后將對照樣品加入對照樣加樣孔3，將待測樣品加入待測樣品加樣孔5，在線蟲滴加孔4上滴加線蟲；最后，在顯微鏡下觀察線蟲的趨利趨避狀態(tài)，計(jì)數(shù)對照樣加樣孔3和待測樣品加樣孔5的線蟲數(shù)目。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明的線蟲定向趨利、趨避檢測裝置克服了平板區(qū)域方法計(jì)數(shù)線蟲所局限的線蟲不規(guī)則運(yùn)動(dòng)狀態(tài)，且能實(shí)時(shí)觀察線蟲的遷移狀態(tài)并進(jìn)行記錄；對照和待測樣品間不會(huì)相互擴(kuò)散，增加實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性；可以同時(shí)檢測多個(gè)待測樣品，提高實(shí)驗(yàn)效率。

附圖說明

圖1為本發(fā)明的線蟲定向趨利、趨避檢測裝置。

附圖標(biāo)記為：1-培養(yǎng)皿；2-線蟲運(yùn)動(dòng)凹槽；3-對照樣加樣孔；4-線蟲滴加孔；5-待測樣品加樣孔。

具體實(shí)施方式

利用本發(fā)明的線蟲定向趨利、趨避檢測裝置，對線蟲定向趨利、趨避進(jìn)行檢測，首先將線蟲培養(yǎng)基加在線蟲運(yùn)動(dòng)凹槽2上；然后將對照樣品加入對照樣加樣孔3，將待測樣品加入待測樣品加樣孔5，在線蟲滴加孔4上滴加線蟲；最后，在顯微鏡下觀察線蟲的趨利趨避狀態(tài)，計(jì)數(shù)對照樣加樣孔3和待測樣品加樣孔5的線蟲數(shù)目。