本發(fā)明涉及一種尿微量白蛋白/尿肌酐一體化檢測二聯(lián)條，屬于臨床體外診斷技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

1、近年來，隨著我國人均壽命的增加，生活習(xí)慣以及飲食結(jié)果等改變導(dǎo)致糖尿病患病率呈現(xiàn)明顯的上升趨勢(shì)，而糖尿病腎病(DN)是糖尿病最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，也是終末期腎病的主要原因之一，因此對(duì)于糖尿病患者來說不僅要經(jīng)常檢測血糖來監(jiān)控病情，同時(shí)還需要進(jìn)行微量尿蛋白、尿肌酐等來監(jiān)控自己的腎臟情況；

2、由于糖尿病患者長時(shí)間的高血糖以及胰島素降低使得腎微血管受損，腎小球的過濾功能大大降低，導(dǎo)致尿微量白蛋白漏出，因此尿微量白蛋白(U-mALb)的檢測成為診斷糖尿病腎病的早期重要指標(biāo)。但是單獨(dú)檢測U-mAlb影響因素較多，U-mALb的水平會(huì)隨著尿液的量而變化，需要采集24小時(shí)尿標(biāo)本，留取麻煩且費(fèi)時(shí)，檢測結(jié)果重復(fù)性和準(zhǔn)確性較差；而肌酐是肌肉代謝產(chǎn)生的一種毒素，以恒定的速率經(jīng)腎臟濾過，所謂尿肌酐主要來自血液，經(jīng)腎小球過濾后隨尿液排除體外，故尿肌酐與尿液量有很好的相關(guān)性。用尿肌酐做校正可以消除取樣方式和尿量對(duì)尿白蛋白排泌量的影響，因此U-mAlb/Cr比值將對(duì)白蛋白排泄率提供更準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)，而不再受尿液量變化的干擾。所以單獨(dú)觀察某一指標(biāo)會(huì)產(chǎn)生一定片面性。我們同時(shí)檢測尿液中的mAlb、Cr以及計(jì)算其比值來反映糖尿病早期腎損害情況，對(duì)預(yù)防糖尿病腎病的發(fā)生有較大的臨床意義；

3、現(xiàn)在臨床上測定尿微量白蛋白和肌酐大多采用血肌酐和24小時(shí)尿的方法，先得出尿液中白蛋白含量，再通過得出的數(shù)據(jù)手工計(jì)算出肌酐比值，微量白蛋白和肌酐的收費(fèi)大概在30元左右。此方法對(duì)病人十分不便利，且實(shí)驗(yàn)成本也高，對(duì)于糖尿病和高血壓腎病的早期篩查國內(nèi)并沒有統(tǒng)一、簡便且成本低廉的方法。目前市場上還沒有將干式生化和干式免疫層析技術(shù)相結(jié)合的一體化檢測試劑條，這一方向市場應(yīng)用前景巨大；

4、目前市場上可檢測尿微量白蛋白(U-mALb)和尿肌酐(U-Cr)的產(chǎn)品較少，且多為進(jìn)口產(chǎn)品。如西門子Clinitest Status泰利特拜施達(dá)尿液分析儀-配合Bayer Microalbumin試紙條可半定量檢測U-mALb、U-Cr以及U-mALb/Cr比值3項(xiàng)指標(biāo)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

1、本發(fā)明的目的是利用尿肌酐做校正可以消除取樣方式和尿量對(duì)尿白蛋白排泌量的影響，因此U-mAlb/Cr比值將對(duì)白蛋白排泄率提供更準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)，而不再受尿液量變化的干擾；

2、本發(fā)明提供的技術(shù)方案，該試劑條分別以干式化學(xué)法和膠體金干式免疫層析技術(shù)為方法學(xué)基礎(chǔ)，用于實(shí)時(shí)檢測人體中尿微量白蛋白(U-mALb)、尿肌酐(U-Cr)、尿微量白蛋白/尿肌酐的比值(U-mAlb/Cr)3項(xiàng)生理指標(biāo)，3項(xiàng)指標(biāo)同時(shí)得出結(jié)果；

3、本發(fā)明研發(fā)的尿微量白蛋白/尿肌酐一體化檢測二聯(lián)條包括樣品區(qū)和反應(yīng)區(qū)。樣品區(qū)含擴(kuò)散膜和濾血膜。反應(yīng)區(qū)是事先制備的，包括兩個(gè)檢測窗口，可同時(shí)檢測尿微量白蛋白(U-mALb)和尿肌酐(U-Cr)的比率，也用于單個(gè)空樣本的檢測，只需要將被檢者的隨機(jī)尿液定量滴入樣品區(qū)，即可在3min內(nèi)實(shí)現(xiàn)同步檢測，非常適用于醫(yī)療機(jī)構(gòu)或個(gè)人；

4、本發(fā)明研發(fā)的尿微量白蛋白-尿肌酐二聯(lián)條采用的尿液標(biāo)本是隨機(jī)尿、過夜尿或者定時(shí)尿樣。檢測簡單，操作方便，迅速報(bào)告結(jié)果，成本經(jīng)濟(jì)合理；

5、本發(fā)明研發(fā)的尿微量白蛋白/尿肌酐一體化檢測二聯(lián)條在目前國內(nèi)市場上尚未有類似產(chǎn)品，具有創(chuàng)新性。本試劑條可在常溫條件下穩(wěn)定存儲(chǔ)一年。客戶在使用本產(chǎn)品時(shí)，開機(jī)檢測儀器并插入記憶芯片，插入檢測條，滴入尿液樣本，讀取結(jié)果，操作方便；

6、本發(fā)明研發(fā)的一體化二連條所配夾具有一個(gè)加樣孔，該加樣孔可以滿足至少100uL樣品量的加樣而不溢出。該夾具含有一個(gè)樣品區(qū)和兩個(gè)反應(yīng)區(qū)，其中采用干式化學(xué)法對(duì)尿肌酐進(jìn)行檢測的樣品區(qū)和反應(yīng)區(qū)在同一位置，而采用膠體金干式免疫層析技術(shù)對(duì)尿微量白蛋白進(jìn)行檢測的反應(yīng)區(qū)在距離樣品區(qū)0.5cm處。不同反應(yīng)區(qū)含有不同的試劑墊，分別與尿液中相應(yīng)成分進(jìn)行獨(dú)立反應(yīng)，從而顯示不同顏色。該夾具具有上下兩部分，加緊后可保證上下部分之間的空隙保留一致的高度，以保證反應(yīng)膜的松緊程度一致。只需要將被檢者的隨機(jī)尿液定量滴入樣品區(qū)，即可在3min內(nèi)實(shí)現(xiàn)同步檢測；

7、本發(fā)明可以同時(shí)檢測人體尿液中尿微量白蛋白(U-mALb)、尿肌酐(U-Cr)、尿微量白蛋白/尿肌酐的比值(U-mAlb/Cr)3項(xiàng)生理指標(biāo)，3項(xiàng)指標(biāo)同時(shí)得出結(jié)果。有效解決現(xiàn)有技術(shù)檢測范圍窄，操作復(fù)雜等問題；本發(fā)明制備方法簡單，便于非專業(yè)人士操作，適于大、中、小各類醫(yī)療機(jī)構(gòu)及家庭使用。

附圖說明

圖1是本發(fā)明的整體示意圖。

圖中標(biāo)號(hào)：1為擴(kuò)散膜，2和3為血液過濾膜，4為肌酐反應(yīng)膜，5為與試劑條配套的塑料夾具底部，6為加樣孔，7為塑料夾具頂部，8為檢測尿微量白蛋白的膠體金干式免疫層析試劑條，9為尿微量白蛋白檢測區(qū)域，10為尿肌酐檢測區(qū)域。

具體實(shí)施方式

1、其中擴(kuò)散膜1是同時(shí)覆蓋在血液過濾膜2及免疫層析試劑條8的樣品墊上；

2、其中尿肌酐反應(yīng)膜4上包含稀釋液和反應(yīng)試劑，其中稀釋液包含緩沖液、表面活性劑、穩(wěn)定劑、粘合劑、輔酶因子以及防腐劑；反應(yīng)試劑包含肌酐酶、肌酸酶、肌氨酸氧化酶、過氧化物酶，4-氨基安替比林和N-乙基-N(2-羥基-3-丙磺基)-3,5-二甲基苯胺。利用Trinder反應(yīng)試劑作為指示探針，當(dāng)被測物通過酶作用產(chǎn)生過氧化氫時(shí)(H2O2)，過氧化物酶能夠催化4-氨基安替比林(4-AAP)及H2O2，產(chǎn)生有色的醌化物和水；

3、其中檢測尿微量白蛋白的膠體金干式免疫層析試劑條8上分別設(shè)置白蛋白的檢測線和第一質(zhì)控線，且檢測線位于靠近加樣孔的一端；

4、其中尿肌酐檢測試劑條包括擴(kuò)散膜、血液過濾膜、和反應(yīng)膜；

5、其中采用干式化學(xué)法對(duì)尿肌酐進(jìn)行檢測的樣品區(qū)和反應(yīng)區(qū)在同一位置，而采用膠體金干式免疫層析技術(shù)對(duì)尿微量白蛋白進(jìn)行檢測的反應(yīng)區(qū)在距離樣品區(qū)0.5cm處。不同反應(yīng)區(qū)含有不同的試劑墊，分別與尿液中相應(yīng)成分進(jìn)行獨(dú)立反應(yīng)，從而顯示不同顏色；

6、尿肌酐檢測試劑條的檢測原理為：將隨機(jī)尿液滴加入加樣孔6，若樣品中含有肌酐，則肌酐會(huì)通過各種相關(guān)酶的作用產(chǎn)生過氧化氫(H2O2)，過氧化物酶能夠催化4-氨基安替比林(4-AAP)及H2O2，產(chǎn)生顯色反應(yīng)；若尿液中不含肌酐，則尿肌酐檢測區(qū)域10不會(huì)產(chǎn)生顯色反應(yīng)；

7、尿微量白蛋白試劑條的檢測原理為：將隨機(jī)尿液滴加入加樣孔6，若樣品中含有尿微量白蛋白，則會(huì)通過毛細(xì)管作用帶動(dòng)結(jié)合墊上的金標(biāo)包被抗體向前流動(dòng)，與檢測線處包被的單抗反應(yīng)，形成紅色檢測線，金膠繼續(xù)向前流至質(zhì)控線，形成紅色反應(yīng)線；若尿液中無微量白蛋白，則檢測線處不顯色。