本發(fā)明涉及一種檢測番茄紅素的方法。
背景技術(shù)：
：番茄紅素由碳、氫兩種元素構(gòu)成，它的分子式為C40H56，分子量536.85。近年來的許多研究表明，番茄紅素是良好的抗氧化劑及自由基清除劑，能預(yù)防前列腺癌、心血管疾病、骨質(zhì)疏松癥、高血壓的發(fā)生、對男性不育、老年癡呆等也有一定的防護(hù)作用，已成為目前食品和醫(yī)藥領(lǐng)域的研究熱點，在醫(yī)藥、功能食品、化妝品等行業(yè)得到了廣泛應(yīng)用。因此，產(chǎn)品中的番茄紅素含量成了番茄紅素產(chǎn)品質(zhì)量的終極標(biāo)準(zhǔn)，國內(nèi)外都將番茄紅素含量作為番茄醬質(zhì)量的分級標(biāo)準(zhǔn)，準(zhǔn)確檢測樣品中的番茄紅素顯得尤為重要。番茄紅素分子結(jié)構(gòu)中具有的發(fā)色團(tuán)使其在紫外—可見光區(qū)有著獨特的電子吸收光譜。因此，最常用的番茄紅素定性、定量方法即紫外—可見光譜法。中國發(fā)明專利申請第200510134764.0號公開了一種番茄果實中番茄紅素含量的無損傷檢測方法，它利用370-700NM紫外-可見光譜照射果實，并采集番茄果實表面的反射光譜，將采集到的紫外-可見的反射光譜,應(yīng)用化學(xué)計量學(xué)方法(PLS)建立反射光譜與番茄紅素含量的數(shù)學(xué)模型，來檢測未知樣品中番茄紅素含量的定量值。目前，番茄紅素的檢測均是使用紫外檢測器，不能同時檢測不發(fā)光物質(zhì)，然而在微生物發(fā)酵法生產(chǎn)番茄紅素時，往往不可能獲得番茄紅素純品，因此有必要對提出的副產(chǎn)物進(jìn)行分析研究，這些副產(chǎn)物主要為其他類胡蘿卜素及其前體或氧化產(chǎn)物，同時不是所有副產(chǎn)物的均有發(fā)光基團(tuán)，而它們變化的研究對番茄紅素發(fā)酵過程的控制非常重要，而且紫外檢測器不是質(zhì)量性檢測器，不能根據(jù)樣品出峰面積百分比計算樣品中的各種類胡蘿卜素的絕對含量，只能通過標(biāo)準(zhǔn)曲線來進(jìn)行定量，大大增加了檢測成本，同時這些類胡蘿卜素的組成分布差異較大，高含量的物質(zhì)會影響低含量物質(zhì)的檢測準(zhǔn)確度，簡單地進(jìn)樣分析方法難以對所有的物質(zhì)進(jìn)行比較準(zhǔn)確的定量，因此有必要開發(fā)一種通用型的方法，同時檢測番茄紅素及其他類胡蘿卜素。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種改進(jìn)了的檢測番茄紅素的方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種檢測番茄紅素的方法,包括以下步驟：（1）確定番茄紅素及類胡蘿卜素出峰時間將番茄紅素和其他類胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品配置成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在指定的液相色譜條件下進(jìn)樣，確認(rèn)各標(biāo)品的出峰時間，上述指定的液相色譜條件為：番茄紅素：色譜柱為C18柱；流速0.8-1.1ml/min；柱溫為20-30℃；進(jìn)樣體積20μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：45-55℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：55-65℃；其他類胡蘿卜素：色譜柱為C18柱；流速0.8-1.1ml/min；柱溫為20-30℃；進(jìn)樣體積200μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；在11-12min內(nèi)使用三通使該段時間樣品不進(jìn)檢測器;蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：45-55℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：55-65℃；（2）標(biāo)曲制作將番茄紅素準(zhǔn)品用有機(jī)溶劑溶解后配制成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，以相對峰面積Y對濃度X進(jìn)行回歸，計算得回歸方程。（3）樣品前處理（4）檢測使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，將步驟（3）中處理后的樣品進(jìn)液相進(jìn)行檢測；（5）含量計算根據(jù)得到的番茄紅素相對峰面積通過標(biāo)曲計算其含量，通過面積法計算其他類胡蘿卜素的含量。本發(fā)明具有如下的有益效果：使用蒸發(fā)光檢測器檢測番茄紅素及其他類胡蘿卜素，結(jié)合三通在番茄紅素出峰時間（11-12min內(nèi)）將番茄紅素峰去掉，既能保證其他組分出峰，又可消除過量番茄紅素對蒸發(fā)光檢測器的污染，從而實現(xiàn)定量檢測其他類胡蘿卜素。同時，蒸發(fā)光檢測器為質(zhì)量檢測器，且可檢測不發(fā)光物質(zhì)，在使用標(biāo)品確定樣品出峰時間后，可以根據(jù)樣品出峰面積百分比計算樣品中其他類胡蘿卜素的絕對含量，而不必全部使用標(biāo)曲制作的方式檢測含量，從而節(jié)省了大量的檢測費用。具體實施方式實施例1：發(fā)酵菌體中的番茄紅素及其他類胡蘿卜素檢測（1）將番茄紅素、β-胡蘿卜素、α-胡蘿卜素、八氫番茄紅素、γ-胡蘿卜素及蝦青素標(biāo)準(zhǔn)品配置成混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液，在指定的液相色譜條件下進(jìn)樣，確認(rèn)各標(biāo)品的出峰時間，上述指定的液相色譜條件為：番茄紅素：色譜柱為C18柱；流速0.8ml/min；柱溫為20℃；進(jìn)樣體積20μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：45℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：55℃；其他類胡蘿卜素：色譜柱為C18柱；流速0.8ml/min；柱溫為20℃；進(jìn)樣體積200μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；在11-12min內(nèi)使用三通使該段時間樣品不進(jìn)檢測器;蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：45℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：55℃；以番茄紅素計算其他類胡蘿卜素的相對出峰時間，具體如下：成分出峰時間番茄紅素1.0八氫番茄紅素1.09α-胡蘿卜素1.16γ-胡蘿卜素1.19β-胡蘿卜素1.23蝦青素1.37（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線制作稱取5.1mg番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品溶于乙酸乙酯中，定容至50mL，配制成1.02、2.01、5.1、10.2、20.4和40.8μg/mL濃度的番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，以相對峰面積Y對濃度X進(jìn)行回歸，計算得回歸方程。依據(jù)檢測的結(jié)果，計算得到番茄紅素關(guān)系曲線方程為:y=1.598x+5.204，R=0.999，線性關(guān)系良好（3）樣品前處理稱取菌體10.2mg，放入研磨器中，加入5ml的乙酸乙酯，充分研磨10min，收集多次研磨溶液并定容至100mL，定容后的溶液經(jīng)0.45微米濾膜過濾。（4）檢測使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，將步驟（3）中處理后的樣品進(jìn)液相進(jìn)行檢測。（5）含量計算根據(jù)番茄紅素相對峰面積通過標(biāo)曲計算其含量，得到菌體的番茄紅素含量為4.05%；通過面積法計算其他類胡蘿卜素的含量如下：β-胡蘿卜素含量為2.19%，α-胡蘿卜素含量為2.19%，八氫番茄紅素含量為1.53%，γ-胡蘿卜素含量為2.26%，蝦青素含量為1.06%。實施例2：發(fā)酵菌體中的番茄紅素及其他類胡蘿卜素檢測（1）將番茄紅素、β-胡蘿卜素、α-胡蘿卜素、八氫番茄紅素、γ-胡蘿卜素及蝦青素標(biāo)準(zhǔn)品配置成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在指定的液相色譜條件下進(jìn)樣，確認(rèn)各標(biāo)品的出峰時間，上述指定的液相色譜條件為：番茄紅素：色譜柱為C18柱；流速0.8ml/min；柱溫為20℃；進(jìn)樣體積20μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：55℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：65℃；其他類胡蘿卜素：色譜柱為C18柱；流速0.8ml/min；柱溫為20℃；進(jìn)樣體積200μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；在11-12min內(nèi)使用三通使該段時間樣品不進(jìn)檢測器;蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：55℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：65℃；以番茄紅素計算其他類胡蘿卜素的相對出峰時間，具體如下：成分出峰時間番茄紅素1.0八氫番茄紅素1.09α-胡蘿卜素1.16γ-胡蘿卜素1.19β-胡蘿卜素1.23蝦青素1.37（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線制作稱取5.1mg番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品溶于乙酸乙酯中，定容至50mL，配制成1.02、2.01、5.1、10.2、20.4和40.8μg/mL濃度的番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，以相對峰面積Y對濃度X進(jìn)行回歸，計算得回歸方程。依據(jù)檢測的結(jié)果，計算得到番茄紅素關(guān)系曲線方程為:y=1.598x+5.204，R=0.999，線性關(guān)系良好。（3）樣品前處理稱取菌體19.8mg，放入研磨器中，加入10ml的乙酸乙酯，充分研磨15min，收集多次研磨溶液并定容至100mL，定容后的溶液經(jīng)0.45微米濾膜過濾。（4）檢測使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，將步驟（3）中處理后的樣品進(jìn)液相進(jìn)行檢測。（5）含量計算根據(jù)番茄紅素相對峰面積通過標(biāo)曲計算含量，得到菌體的番茄紅素含量為4.55%；根據(jù)面積法算得部分類胡蘿卜素的含量如下：β-胡蘿卜素含量為2.54%，α-胡蘿卜素含量為2.24%，八氫番茄紅素含量為1.45%，γ-胡蘿卜素含量為2.32%，蝦青素含量為1.04%。實施例3：番茄紅素晶體和油懸液中番茄紅素及其他類胡蘿卜素檢測（1）將番茄紅素、β-胡蘿卜素、α-胡蘿卜素、八氫番茄紅素、γ-胡蘿卜素及蝦青素標(biāo)準(zhǔn)品配置成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在指定的液相色譜條件下進(jìn)樣，確認(rèn)各標(biāo)品的出峰時間，上述指定的液相色譜條件為：番茄紅素：色譜柱為C18柱；流速0.8ml/min；柱溫為20℃；進(jìn)樣體積20μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：45℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：55℃；其他類胡蘿卜素：色譜柱為C18柱；流速0.8ml/min；柱溫為20℃；進(jìn)樣體積200μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；在11-12min內(nèi)使用三通使該段時間樣品不進(jìn)檢測器;蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：45℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：55℃；以番茄紅素計算其他類胡蘿卜素的相對出峰時間，具體如下：成分出峰時間番茄紅素1.0八氫番茄紅素1.09α-胡蘿卜素1.16γ-胡蘿卜素1.19β-胡蘿卜素1.23蝦青素1.37（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線制作稱取5.9mg番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品溶于乙酸乙酯中，定容至50mL，配制成1.18、2.36、5.9、11.8、23.6和47.2μg/mL濃度的番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，以相對峰面積Y對濃度X進(jìn)行回歸，計算得回歸方程。依據(jù)檢測的結(jié)果，計算得到番茄紅素關(guān)系曲線方程為:y=1.605x+3.224，R2=0.999，線性關(guān)系良好。（3）樣品前處理準(zhǔn)確稱取51.3mg番茄紅素晶體至容量瓶中，使用乙酸乙酯溶解，使用功率40-60KHZ的超聲儀超聲處理10min，用乙酸乙酯定容至100mL，定容后的溶液經(jīng)0.45微米濾膜過濾，該溶液可直接檢測胡蘿卜素，番茄紅素檢測時需再稀釋100倍后后進(jìn)樣。（4）檢測使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，將步驟（3）中處理后的樣品進(jìn)液相進(jìn)行檢測。（5）含量計算根據(jù)番茄紅素相對峰面積通過標(biāo)曲計算含量，得到番茄紅素晶體的番茄紅素含量為96.21%；根據(jù)面積法算得部分類胡蘿卜素的含量如下：β-胡蘿卜素含量為0.42%，α-胡蘿卜素含量為0.39%，八氫番茄紅素含量為0.42%，γ-胡蘿卜素含量為0.28%，蝦青素含量為0.09%。實施例4：番茄紅素晶體和油懸液中番茄紅素及其他類胡蘿卜素檢測（1）將番茄紅素、β-胡蘿卜素、α-胡蘿卜素、八氫番茄紅素、γ-胡蘿卜素及蝦青素標(biāo)準(zhǔn)品配置成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在指定的液相色譜條件下進(jìn)樣，確認(rèn)各標(biāo)品的出峰時間，上述指定的液相色譜條件為：番茄紅素：色譜柱為C18柱；流速0.8ml/min；柱溫為20℃；進(jìn)樣體積20μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：55℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：65℃；其他類胡蘿卜素：色譜柱為C18柱；流速0.8ml/min；柱溫為20℃；進(jìn)樣體積200μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；在11-12min內(nèi)使用三通使該段時間樣品不進(jìn)檢測器;蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：55℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：65℃；以番茄紅素計算其他類胡蘿卜素的相對出峰時間，具體如下：成分出峰時間番茄紅素1.0八氫番茄紅素1.09α-胡蘿卜素1.16γ-胡蘿卜素1.19β-胡蘿卜素1.23蝦青素1.37（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線制作稱取5.9mg番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品溶于乙酸乙酯中，定容至50mL，配制成1.18、2.36、5.9、11.8、23.6和47.2μg/mL濃度的番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，以相對峰面積Y對濃度X進(jìn)行回歸，計算得回歸方程。依據(jù)檢測的結(jié)果，計算得到番茄紅素關(guān)系曲線方程為:y=1.605x+3.224，R2=0.999，線性關(guān)系良好。（3）樣品前處理準(zhǔn)確稱取99.1mg番茄紅素油懸液至容量瓶中，使用乙酸乙酯溶解，使用功率為40-60KHZ的超聲儀超聲處理15min，然后用乙酸乙酯定容至100mL，定容后的溶液經(jīng)0.45微米濾膜過濾，該溶液可直接檢測胡蘿卜素，番茄紅素檢測時需再稀釋50倍后后進(jìn)樣。（4）檢測使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，將步驟（3）中處理后的樣品進(jìn)液相進(jìn)行檢測。（5）含量計算根據(jù)番茄紅素相對峰面積通過標(biāo)曲計算含量，得到番茄紅素油懸液番茄紅素的含量為30.98%；根據(jù)面積法算得部分類胡蘿卜素的含量如下：β-胡蘿卜素含量為0.19%，α-胡蘿卜素含量為0.46%，八氫番茄紅素含量為0.48%，γ-胡蘿卜素含量為0.41%，蝦青素含量為0.08%。實施例5：番茄紅素微膠囊粉末中番茄紅素的檢測（1）將番茄紅素、β-胡蘿卜素、α-胡蘿卜素、八氫番茄紅素、γ-胡蘿卜素及蝦青素標(biāo)準(zhǔn)品配置成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在指定的液相色譜條件下進(jìn)樣，確認(rèn)各標(biāo)品的出峰時間，上述指定的液相色譜條件為：番茄紅素：色譜柱為C18柱；流速0.8ml/min；柱溫為20℃；進(jìn)樣體積20μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：45℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：55℃；其他類胡蘿卜素：色譜柱為C18柱；流速0.8ml/min；柱溫為20℃；進(jìn)樣體積200μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；在11-12min內(nèi)使用三通使該段時間樣品不進(jìn)檢測器;蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：45℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：55℃；以番茄紅素計算其他類胡蘿卜素的相對出峰時間，具體如下：成分出峰時間番茄紅素1.0八氫番茄紅素1.09α-胡蘿卜素1.16γ-胡蘿卜素1.19β-胡蘿卜素1.23蝦青素1.37（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線制作準(zhǔn)確稱取4.9mg番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品溶于乙酸乙酯中，定容至50mL，配制成0.98、1.96、4.9、9.8、19.6和39.2μg/mL濃度的番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，以相對峰面積Y對濃度X進(jìn)行回歸，計算得回歸方程。上依據(jù)檢測的結(jié)果，計算得到番茄紅素關(guān)系曲線方程為:y=1.718x+1.964，R2=0.999，線性關(guān)系良好。（3）樣品前處理準(zhǔn)確稱取100.9mg番茄紅素微膠囊粉末至容量瓶中，加入5ml純水，使用功率為40-60KHZ的超聲儀超聲處理10min，然后用乙酸乙酯定容至100mL，定容后的溶液經(jīng)0.45微米濾膜過濾，該溶液可直接檢測胡蘿卜素，番茄紅素檢測時需再稀釋50倍后后進(jìn)樣。（4）檢測使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，將步驟（3）中處理后的樣品進(jìn)液相進(jìn)行檢測。（5）含量計算根據(jù)番茄紅素相對峰面積通過標(biāo)曲計算含量，得到番茄紅素微膠囊的番茄紅素含量為21.3%；根據(jù)面積法算得部分類胡蘿卜素的含量如下：β-胡蘿卜素含量為0.09%，α-胡蘿卜素含量為0.41%，八氫番茄紅素含量為0.35%，γ-胡蘿卜素含量為0.19%，蝦青素含量為0.03%。實施例6：番茄紅素微膠囊粉末中番茄紅素的檢測（1）將番茄紅素、β-胡蘿卜素、α-胡蘿卜素、八氫番茄紅素、γ-胡蘿卜素及蝦青素標(biāo)準(zhǔn)品配置成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在指定的液相色譜條件下進(jìn)樣，確認(rèn)各標(biāo)品的出峰時間，上述指定的液相色譜條件為：番茄紅素：色譜柱為C18柱；流速0.8ml/min；柱溫為20℃；進(jìn)樣體積20μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：55℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：65℃；其他類胡蘿卜素：色譜柱為C18柱；流速0.8ml/min；柱溫為20℃；進(jìn)樣體積200μL；流動相為A：乙腈:水=9:1；流動相B：乙酸乙酯，原料為HPLC色譜純；線性梯度洗脫：在前15min內(nèi)，B由0增為100%，隨后，B保持100%；在11-12min內(nèi)使用三通使該段時間樣品不進(jìn)檢測器;蒸發(fā)光檢測器：霧化器溫度：55℃；載氣壓力：30psi；蒸發(fā)器溫度：65℃；以番茄紅素計算其他類胡蘿卜素的相對出峰時間，具體如下：成分出峰時間番茄紅素1.0八氫番茄紅素1.09α-胡蘿卜素1.16γ-胡蘿卜素1.19β-胡蘿卜素1.23蝦青素1.37（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線制作準(zhǔn)確稱取4.9mg番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品溶于乙酸乙酯中，定容至50mL，配制成0.98、1.96、4.9、9.8、19.6和39.2μg/mL濃度的番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，以相對峰面積Y對濃度X進(jìn)行回歸，計算得回歸方程。依據(jù)檢測的結(jié)果，計算得到番茄紅素關(guān)系曲線方程為:y=1.718x+1.964，R2=0.999，線性關(guān)系良好。（3）樣品前處理準(zhǔn)確稱取148.7mg番茄紅素微膠囊粉末至容量瓶中，加入10ml純水，使用功率為40-60KHZ的超聲儀超聲處理20min，然后用乙酸乙酯定容至100mL，定容后的溶液經(jīng)0.45微米濾膜過濾，該溶液可直接檢測胡蘿卜素，番茄紅素檢測時需再稀釋100倍后進(jìn)樣。（4）檢測使用與步驟（1）相同的液相色譜條件，將步驟（3）中處理后的樣品進(jìn)液相進(jìn)行檢測。（5）含量計算根據(jù)番茄紅素相對峰面積通過標(biāo)曲計算含量，得到番茄紅素微膠囊的番茄紅素含量為20.2%；根據(jù)面積法算得部分類胡蘿卜素的含量如下：β-胡蘿卜素含量為0.05%，α-胡蘿卜素含量為0.06%，八氫番茄紅素含量為0.09%，γ-胡蘿卜素含量為0.11%，蝦青素含量為0.05%。以上實施例中，番茄紅素的回收率范圍為95.6-105.4%，精密度范圍為：5.7-8.1%，符合分析要求，各檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。本發(fā)明不限于針對以上列出的類胡蘿卜素的檢測，使用上述相同方法還可以同時檢測葉黃素等其他類胡蘿卜素。本發(fā)明使用蒸發(fā)光檢測器檢測番茄紅素及其他類胡蘿卜素，結(jié)合三通在番茄紅素出峰時間（11-12min內(nèi)）將番茄紅素峰去掉，既能保證其他組分出峰，又可消除過量番茄紅素對蒸發(fā)光檢測器的污染，從而實現(xiàn)定量檢測其他類胡蘿卜素。同時，蒸發(fā)光檢測器為質(zhì)量檢測器，且可檢測不發(fā)光物質(zhì)，在使用標(biāo)品確定樣品出峰時間后，可以根據(jù)樣品出峰面積百分比計算樣品中其他類胡蘿卜素的絕對含量，而不必全部使用標(biāo)曲制作的方式檢測含量，從而節(jié)省了大量的檢測費用。當(dāng)前第1頁1 2 3