本發(fā)明涉及一種測(cè)定銅離子含量的試劑盒，屬于重金屬快速檢測(cè)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

銅是人類(lèi)和動(dòng)物機(jī)體必需的微量元素之一。銅參與了機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝，并且在生長(zhǎng)、免疫、繁殖等生理過(guò)程中起著極其重要的作用。自英國(guó)學(xué)者Braude首次發(fā)現(xiàn)高劑量銅對(duì)仔豬生長(zhǎng)有促進(jìn)作用后，銅作為微量元素補(bǔ)充劑廣泛添加到飼料中。添加高劑量銅已被認(rèn)為是一種高效、廉價(jià)、使用方便的促生長(zhǎng)方式，但高劑量的銅添加往往會(huì)造成動(dòng)物中毒，同時(shí)會(huì)通過(guò)動(dòng)物排泄物污染周?chē)h(huán)境，并在動(dòng)物產(chǎn)品中蓄積和殘留，影響動(dòng)物產(chǎn)品品質(zhì)，消費(fèi)這類(lèi)動(dòng)物產(chǎn)品會(huì)危害人體健康。因此，我國(guó)對(duì)飼料中銅的允許量制定了嚴(yán)格的指標(biāo)：如豬飼料中銅含量不得高于200mg/kg。同時(shí)，人體通過(guò)各種途徑攝入的銅的過(guò)量時(shí)會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的健康問(wèn)題，如急性缺血性心臟病、腎臟疾病、神經(jīng)退行性疾病、貧血和骨功能紊亂等，因此各國(guó)對(duì)環(huán)境和食品中銅的限量均作出了規(guī)定。如美國(guó)環(huán)保署規(guī)定飲用水中銅的含量不得超過(guò)1.30mg/L；歐盟食品委員會(huì)規(guī)定人體每天通過(guò)食物攝取的銅含量應(yīng)在1.2-4.2mg范圍內(nèi)。另外，銅在兒茶酚胺代謝、自由基清除、以及血紅蛋白、彈性蛋白和膠原合成中起著重要的作用，銅的濃度是一些疾病如Wilson病、小細(xì)胞低色素性貧血和骨疾病的診斷指標(biāo)。因此，建立飼料、環(huán)境、血清中銅含量的檢測(cè)方法是非常必要的。

現(xiàn)有的銅檢測(cè)方法仍以傳統(tǒng)儀器法為主，包括原子吸收分光光度法(AAS)、電感耦合等離子體-原子發(fā)射光譜法(ICP-AES)、電感耦合等離子體質(zhì)譜分析(ICP-MS)和原子熒光光譜分析(AFS)等為主。但是，此類(lèi)常規(guī)檢測(cè)方法由于需要昂貴的大型儀器，復(fù)雜的樣品前處理過(guò)程，以及專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員操作，無(wú)法在短時(shí)間內(nèi)對(duì)大量樣品進(jìn)行檢測(cè)，并在基層實(shí)驗(yàn)室中推廣。雖然目前有很多文獻(xiàn)報(bào)道了一些銅離子的新型檢測(cè)方法，如基于納米金和納米銀的的可視化檢測(cè)方法、電化學(xué)分析法以及基于抗銅螯合物抗體的免疫分析方法，但這些方法基本上只能應(yīng)用于比較簡(jiǎn)單的樣品基質(zhì)如飲用水和湖水等。對(duì)于復(fù)雜的樣品如飼料、食品和血清等，樣品中含有大量的其它金屬離子如鈣、鋅、鐵、鎂以及其它營(yíng)養(yǎng)成分如蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素及各種添加劑，這些物質(zhì)均會(huì)對(duì)測(cè)定產(chǎn)生嚴(yán)重的干擾。因此，現(xiàn)有的快速檢測(cè)手段難以對(duì)這些復(fù)雜樣品進(jìn)行準(zhǔn)確的定量分析。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種測(cè)定銅離子含量的試劑盒，本發(fā)明試劑盒提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性，能消除了樣品中其它成分對(duì)檢測(cè)的干擾。

本發(fā)明提供的測(cè)定銅離子含量的試劑盒，其包括參數(shù)采集試劑、參數(shù)采集設(shè)備和可讀性載體；

所述參數(shù)采集試劑包括采集所述可讀性載體中涉及的各項(xiàng)參數(shù)的試劑；

所述參數(shù)采集設(shè)備包括采集所述可讀性載體中涉及的各項(xiàng)參數(shù)的設(shè)備；

所述可讀性載體上記載了如下測(cè)定銅離子含量的步驟：

1)吸光度值的檢測(cè)

標(biāo)準(zhǔn)曲線組：配制至少3種不同濃度的銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液，將所述銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液分別與BCA工作液混合，測(cè)定混合后體系在354nm下的吸光度值，記為A；

樣品組：將待測(cè)樣品溶液與空白BCA工作液混合，測(cè)定混合體系在354nm下的吸光度值，記為A₁；

將待測(cè)樣品溶液與所述BCA工作液混合，測(cè)定混合體系在354nm下的吸光度值，記為A₂；

所述BCA工作液為BCA試劑與鹽酸羥胺溶液的混合液；

所述空白BCA工作液為空白BCA試劑與所述鹽酸羥胺溶液的混合液；

2)計(jì)算銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率

根據(jù)式Ⅰ對(duì)吸光度值A(chǔ)進(jìn)行校正，得到校正吸光度值，記為A_c，

式Ⅰ中，V_BCA、V_Cu分別表示步驟1)中加入的所述BCA工作液和所述銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為μL；C_BCA0表示所述BCA工作液的濃度，單位為μg/mL；β_BCA為0.00442；

以所述校正吸光度值為縱坐標(biāo)，以所述銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性擬合，得到所述銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液在354nm下的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率，記為β_Cu；根據(jù)式Ⅱ得到β_Cu-BCA，

式Ⅱ中，M_BCA、M_Cu、M_Cu-BCA分別表示BCA、銅和Cu-BCA復(fù)合物的相對(duì)分子質(zhì)量，單位為g/M；V_BCA和V_Cu分別為加入的BCA工作液和銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為mL；β_BCA為0.00442，為試劑盒提供值。

3)吸光度值A(chǔ)₂與A₁的差值記為ΔA，根據(jù)式Ⅲ得到所述待測(cè)樣品溶液中銅離子的濃度C_cu-sample，

式Ⅲ中，β_Cu-BCA為通過(guò)式Ⅱ的測(cè)定值，M_BCA、M_Cu、M_Cu-BCA分別表示BCA、銅和Cu-BCA復(fù)合物的相對(duì)分子質(zhì)量，單位為g/M；V_BCA和V_Cu分別為加入的BCA工作液和樣品溶液的體積，單位為mL，C_BCA0為BCA工作液的濃度，單位為μg/mL；β_BCA為0.00442，為試劑盒提供值。

所述的試劑盒中，所述待測(cè)樣品溶液為待測(cè)樣品的三氯乙酸溶液的提取液；

所述三氯乙酸溶液按照如下步驟制備：稱(chēng)取適量的三氯乙酸固體，溶于水中，得到質(zhì)量體積濃度為1g/100mL(1％,w/v)的所述三氯乙酸溶液，所述水具體可為純水；

所述待測(cè)樣品為飼料和/或血清和/或飲用水，所述飼料具體可為豬配合飼料、雞配合飼料、濃縮飼料和預(yù)混料中的至少一種以及寵物飼料；

當(dāng)所述待測(cè)樣品為為固體樣本時(shí)，所述待測(cè)樣品與所述三氯乙酸溶液的質(zhì)量體積比為1g：(50～100)mL；

當(dāng)所述待測(cè)樣品為液體樣本時(shí)，所述待測(cè)樣品與所述三氯乙酸溶液的體積比為1：1～10。

所述的試劑盒中，所述BCA試劑為BCA、無(wú)水碳酸鈉、酒石酸鈉、氫氧化鈉和碳酸氫鈉的水溶液，各組分的濃度依次為：0.5g/L、1g/L、0.8g/L、0.5g/L和0.475g/L；

所述BCA試劑的pH值為11.25；

所述鹽酸羥胺溶液由鹽酸羥胺固體溶于碳酸緩沖液中得到，其質(zhì)量體積濃度為1g/100mL；

所述BCA工作液中，所述BCA試劑與所述鹽酸羥胺溶液的體積比為5：3；

所述空白BCA試劑為無(wú)水碳酸鈉、酒石酸鈉、氫氧化鈉和碳酸氫鈉的水溶液，各組分的濃度依次為：1g/L、0.8g/L、0.5g/L和0.475g/L；

所述空白BCA試劑的pH值為11.25；

所述空白BCA工作液中，所述空白BCA試劑與所述鹽酸羥胺溶液的體積比為5：3；

所述銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量體積濃度為0～10μg/mL，具體可為0、0.1、0.5、1、2、5和10μg/mL。

所述的試劑盒中，所述可讀性載體為試劑盒說(shuō)明書(shū)；所述測(cè)定銅離子含量的步驟的內(nèi)容印刷在卡片上；和/或，

所述可讀性載體為計(jì)算機(jī)可讀載體。

所述參數(shù)采集設(shè)備包括酶標(biāo)板和酶標(biāo)儀。

本發(fā)明進(jìn)一步提供了測(cè)定銅離子含量的方法，包括以下步驟：

1)吸光度值的檢測(cè)

標(biāo)準(zhǔn)曲線組：配制至少3種不同濃度的銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液，將所述銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液分別與BCA工作液混合，測(cè)定混合后體系在354nm下的吸光度值，記為A；

樣品組：將待測(cè)樣品溶液與空白BCA工作液混合，測(cè)定混合體系在354nm下的吸光度值，記為A₁；

將待測(cè)樣品溶液與所述BCA工作液混合，測(cè)定混合體系在354nm下的吸光度值，記為A₂；

所述BCA工作液為BCA試劑與鹽酸羥胺溶液的混合液；

所述空白BCA工作液為空白BCA試劑與所述鹽酸羥胺溶液的混合液；

2)計(jì)算銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率

根據(jù)式Ⅰ對(duì)吸光度值A(chǔ)進(jìn)行校正，得到校正吸光度值，記為A_c，

式Ⅰ中，V_BCA、V_Cu分別表示步驟1)中加入的所述BCA工作液和所述銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為μL；C_BCA0表示所述BCA工作液的濃度，單位為μg/mL；β_BCA為0.00442，為試劑盒提供值；

以所述校正吸光度值為縱坐標(biāo)，以所述銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性擬合，得到所述銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液在354nm下的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率，記為β_Cu；根據(jù)式Ⅱ得到β_Cu-BCA，

式Ⅱ中，M_BCA、M_Cu、M_Cu-BCA分別表示BCA、銅和Cu-BCA復(fù)合物的相對(duì)分子質(zhì)量，單位為g/M；V_BCA和V_Cu分別為加入的BCA工作液和銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為mL；β_BCA為0.00442，為試劑盒提供值；

3)吸光度值A(chǔ)₂與A₁的差值記為ΔA，根據(jù)式Ⅲ得到所述待測(cè)樣品溶液中銅離子的濃度C_cu-sample，

式Ⅲ中，β_Cu-BCA為通過(guò)式Ⅱ的測(cè)定值，M_BCA、M_Cu、M_Cu-BCA分別表示BCA、銅和Cu-BCA復(fù)合物的相對(duì)分子質(zhì)量，單位為g/M；V_BCA和V_Cu分別為加入的BCA工作液和銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為mL，C_BCA0表示BCA工作液的濃度，單位為μg/mL；β_BCA為0.00442，為試劑盒提供值；

則待測(cè)樣品中銅離子含量即為所測(cè)定的待測(cè)樣品中銅離子濃度乘以稀釋倍數(shù)。

上述的方法中，步驟1)中，所述待測(cè)樣品溶液為待測(cè)樣品的三氯乙酸溶液的提取液；

所述待測(cè)樣品為飼料和/或血清和/或飲用水，所述飼料具體可為豬配合飼料、雞配合飼料、濃縮飼料和預(yù)混料中的至少一種以及寵物飼料；

當(dāng)所述待測(cè)樣品為固體樣本時(shí)，所述待測(cè)樣品與所述三氯乙酸溶液的質(zhì)量體積比為1g：(50～100)mL；

當(dāng)所述待測(cè)樣品為液體樣本時(shí)，所述待測(cè)樣品與所述三氯乙酸溶液的體積比為1：1～10。

上述的方法中，所述BCA試劑為BCA、無(wú)水碳酸鈉、酒石酸鈉、氫氧化鈉和碳酸氫鈉的水溶液，各組分的濃度依次為：0.5g/L、1g/L、0.8g/L、0.5g/L和0.475g/L；

所述BCA試劑的pH值為11.25；

所述鹽酸羥胺溶液由鹽酸羥胺固體溶于碳酸緩沖液中得到，其質(zhì)量體積濃度為1g/100mL；

所述BCA工作液中，所述BCA試劑與所述鹽酸羥胺溶液的體積比為5：3；

所述空白BCA試劑為無(wú)水碳酸鈉、酒石酸鈉、氫氧化鈉和碳酸氫鈉的水溶液，各總組分的濃度依次為：1g/L、0.8g/L、0.5g/100mL和0.475g/mL；

所述空白BCA試劑的pH值為11.25；

所述空白BCA工作液中，所述空白BCA試劑與所述鹽酸羥胺溶液的體積比為5：3；

所述銅離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量體積濃度為0～10μg/mL，具體可為0、0.1、0.5、1、2、5和10μg/mL。

本發(fā)明中，“室溫”指的是10～30℃，具體可為25℃。

本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：

1)本發(fā)明試劑盒提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性，基本消除了樣品基質(zhì)中其它成分對(duì)檢測(cè)的干擾。

2)本發(fā)明檢測(cè)方法，無(wú)需復(fù)雜的樣品前處理和貴重儀器。

3)本發(fā)明檢測(cè)方法成本低，抗干擾能力強(qiáng)，檢測(cè)限低，可以達(dá)到0.1mg/L，既可定量檢測(cè)，也可以用肉眼觀察，比較銅標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)生的顏色，對(duì)銅離子濃度進(jìn)行半定量檢測(cè)。

4)本發(fā)明采用采用酶標(biāo)板作為載體，可一次對(duì)大批量飼料樣品進(jìn)行檢測(cè)。

附圖說(shuō)明

圖1為典型的BCA標(biāo)準(zhǔn)曲線和銅測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線，其中圖1A為BCA標(biāo)準(zhǔn)曲線，圖1B為銅測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線。

圖2為其它重金屬離子對(duì)本發(fā)明試劑盒測(cè)定銅的干擾試驗(yàn)。

圖3為本發(fā)明試劑盒測(cè)定與傳統(tǒng)的原子吸收光譜法測(cè)定的對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果。

具體實(shí)施方式

下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。

下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑得到。

下述實(shí)施例中，豬和雞的配合飼料購(gòu)于北京同力興科農(nóng)業(yè)科技有限公司，產(chǎn)品目錄號(hào)為002和008；血清樣品分別商購(gòu)于美國(guó)Gibco公司，產(chǎn)品目錄號(hào)16000-044；飲用水樣本為自來(lái)水。

實(shí)施例1、

1)參數(shù)采集試劑組成

A液：三氯乙酸溶液，配制方法：三氯乙酸固體溶于純水中，濃度為1g/100mL(1％,w/v)。

B液：BCA溶液，配制方法：稱(chēng)取適量的BCA二鈉、無(wú)水碳酸鈉、酒石酸鈉、碳酸氫鈉固體，溶于純水中，終濃度分別為1g/100mL(1％,w/v)、2g/100mL(2％,w/v)、0.16g/100mL(0.16％,w/v)、0.4g/100mL(0.4％,w/v)、0.95g/100mL(0.95％,w/v)；調(diào)節(jié)溶液pH至11.25，將溶液稀釋至以BCA濃度計(jì)為500mg/L。

C液：鹽酸羥胺溶液，配制方法：取鹽酸羥胺溶于碳酸緩沖液中，濃度為1g/100mL(1％,w/v)。

D液：BCA工作溶液，將B液與C溶液以5：3(v/v)比例混合，現(xiàn)配現(xiàn)用。

E液：空白BCA工作液，配制方法：將不含BCA鈉的B液與C液以5：3(v/v)比例混合。

F液：銅標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.1，0.5，1，2，5，10μg/mL，分別為F1-F7標(biāo)準(zhǔn)液。

2)樣品前處理：

飼料樣品(配合飼料、濃縮飼料或預(yù)混料)：樣品與A液(三氯乙酸溶液)混合，比例為1g：(50～100)mL，振蕩3分鐘，定量濾紙過(guò)濾或5000rpm離心10分鐘，取上清。

血清和水：樣品與A液(三氯乙酸溶液)混合，比例為1g/100mL(1％,w/v)，振蕩3分鐘，定量濾紙過(guò)濾或5000rpm離心10分鐘，取上清。

3)檢測(cè)：

標(biāo)準(zhǔn)曲線組：酶標(biāo)板孔中每孔加入150μL不同濃度的銅標(biāo)準(zhǔn)液(F1-F7液)，隨后每孔加入100μL BCA工作液。

樣品組：每個(gè)樣品測(cè)定需兩個(gè)酶標(biāo)板孔：背景孔和樣品孔。背景孔中加入150μL樣品上清液和100μL E液(空白BCA工作液)；樣品孔中加入150μL樣品上清液和100μL D液(BCA工作液)。

所有酶標(biāo)板孔于室溫(20℃)反應(yīng)15分鐘后，置于酶標(biāo)儀讀數(shù)，檢測(cè)波長(zhǎng)為354nm。

4)濃度計(jì)算：

①標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制和β_Cu值計(jì)算：根據(jù)3)中的操作步驟，測(cè)定354nm下各濃度銅標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)生的吸光值(A)，根據(jù)下式對(duì)吸光值進(jìn)行校正，獲得校正吸光值A(chǔ)_c：

以校正吸光值A(chǔ)_c為縱坐標(biāo)，以銅標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性擬合，獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率，設(shè)為β_Cu。式中β_BCA為BCA標(biāo)準(zhǔn)溶液在354nm下測(cè)定獲得的標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率。

典型的BCA標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1A所示，其中β_BCA＝0.00442。因不同批次測(cè)定β_BCA變異小，因此β_BCA由本試劑盒提供，實(shí)際操作過(guò)程中不需重新測(cè)定β_BCA。

典型的標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1B所示，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y＝0.53766x+0.10439。其中β_Cu＝0.53766。根據(jù)β_Cu根據(jù)下列公示可計(jì)算β_Cu-BCA值：

式中，β_Cu為繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率；M_BCA、M_Cu、M_Cu-BCA分別表示BCA、銅和Cu-BCA復(fù)合物的相對(duì)分子質(zhì)量，單位為g/M；V_BCA和V_Cu分別為加入的BCA工作液和銅標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，單位為mL；β_BCA為0.00442，為試劑盒提供值。

最低檢測(cè)線(LOD)可根據(jù)公式計(jì)算：

其中s代表空白標(biāo)準(zhǔn)溶液的測(cè)定偏差，a代表標(biāo)準(zhǔn)曲線的截距值，k代表標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率。經(jīng)計(jì)算，本方法的最低檢測(cè)限為0.032μg/mL。

②記錄樣品中背景孔和樣品孔的吸光值，分別記錄為A₁和A₂，代入如下公式中，即可得到樣品溶液中銅離子濃度(C_Cu-sample)。

式Ⅲ中，β_Cu-BCA為通過(guò)式Ⅱ的測(cè)定值，M_BCA、M_Cu、M_Cu-BCA分別表示BCA、銅和Cu-BCA復(fù)合物的相對(duì)分子質(zhì)量，單位為g/M；V_BCA和V_Cu分別為加入的BCA工作液和樣品溶液的體積，單位為mL；C_BCA0為BCA工作液的濃度，單位為μg/mL；β_BCA為0.00442，為試劑盒提供值；

樣品中銅含量為樣品溶液銅離子濃度乘以稀釋倍數(shù)。

實(shí)施例2、添加回收試驗(yàn)

取豬配合飼料、雞配合飼料、牛血清、自來(lái)水，采用原子吸收法測(cè)定各樣品中銅的含量。隨后往各樣本中添加高濃度的銅標(biāo)準(zhǔn)溶液，至飼料中添加濃度為0、20、100和400mg/kg，血清和水中添加濃度0、0.5、1、2μg/mL，每個(gè)濃度4個(gè)平行。采用本試劑盒進(jìn)行測(cè)定。將測(cè)定值除以添加值計(jì)算回收率，同時(shí)計(jì)算4個(gè)平行測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果如表1所示。由表1中結(jié)果表明：在添加的濃度范圍內(nèi)，平均回收率在86.00％-110.78之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于14.23％。

表1：本試劑盒測(cè)定飼料、血清和自來(lái)水中銅含量的添加回收試驗(yàn)結(jié)果(n＝4)

實(shí)施例3、其它重金屬離子的干擾試驗(yàn)

在飼料中常量元素，微量元素及可能還有的有害元素對(duì)本試劑盒方法造成的偏差分析試驗(yàn)。首先測(cè)定4μg/mL Cu²⁺標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)生的吸收值，計(jì)為A_b，然后在4μg/mL Cu²⁺標(biāo)準(zhǔn)溶液中分別添加1-1000μg/mL的Fe²⁺,Zn²⁺,Mg²⁺,Mn²⁺，和1-10000μg/mL的Ca²⁺和F^-，每種溶液反應(yīng)產(chǎn)生的吸光值，計(jì)為A_t，以A_t和A_b值按下列公示計(jì)算干擾率(I.P.)：

結(jié)果如圖2所示，產(chǎn)生5％干擾率的離子濃度分別為25、97、88、89、8000和>10000μg/mL的Fe²⁺、Zn²⁺、Mg²⁺、Mn²⁺、Ca²⁺和F^-，說(shuō)明本試劑盒測(cè)定銅的特異性和選擇性較好。

圖2顯示在偏差百分?jǐn)?shù)為上限5％的情況下，不同干擾離子的最大添加量均如圖所示，論證了本發(fā)明在干擾離子存在情況下對(duì)飼料中銅檢測(cè)的準(zhǔn)確保證性。

實(shí)施例4、實(shí)際樣本測(cè)定(與原子吸收光譜測(cè)定法的比較)

采用本發(fā)明試劑盒方法測(cè)定采集的豬、雞配合飼料35個(gè)，測(cè)定結(jié)果與傳統(tǒng)的原子吸收光譜法比較并進(jìn)行線性回歸分析。結(jié)果如圖3所示。結(jié)果表明：本發(fā)明試劑盒測(cè)定結(jié)果與原子吸收法測(cè)定結(jié)果基本一致，相關(guān)性大于0.99。說(shuō)明本發(fā)明試劑盒可用于實(shí)際樣品的檢測(cè)。