本發(fā)明涉及桑蠶生絲檢測領(lǐng)域，具體為利用氣相色譜(GC)或者氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)技術(shù)鑒別鮮繭生絲及干繭生絲的方法。

背景技術(shù)：

繅制鮮繭生絲不需要經(jīng)過烘繭、煮繭等工序，還可以回收利用蠶蛹，因此，生產(chǎn)鮮繭生絲所需的成本低于繅制干繭生絲。由于鮮繭生絲沒有明確標(biāo)注，市場售價(jià)又基本等同于同質(zhì)干繭生絲的價(jià)格，顯著的經(jīng)濟(jì)利益凸顯了鮮繭繅絲的極大優(yōu)勢。最近幾年，鮮蠶蛹經(jīng)濟(jì)價(jià)值的提升，極大地調(diào)動了繅絲企業(yè)的生產(chǎn)積極性，促進(jìn)了鮮繭繅絲的規(guī)?；l(fā)展進(jìn)程。這直接導(dǎo)致目前生絲市場上充斥著大量的鮮繭生絲。研究報(bào)告表明，鮮繭生絲的含膠率偏高，抱合力較低，條干均勻度較差、糙線多，其品級不如干繭生絲。越來越多的絲綢生產(chǎn)企業(yè)反映，鮮繭生絲的織造性能不如干繭生絲，其在織造過程中會出現(xiàn)多種問題，影響產(chǎn)品的質(zhì)量。因此，對生絲進(jìn)行檢測，區(qū)分鮮繭和干繭生絲對商業(yè)交易及規(guī)范生絲市場十分重要。

目前，研究者提出了多種方法鑒別鮮繭生絲和干繭生絲，如專利CN 201410379015.3、CN 201310017273.2、CN 201310017296.3等，這些方法都是基于鮮繭絲和干繭絲的物理性能的差異，如白度、強(qiáng)力等，具有一定的科學(xué)性。但是，這些方法均存在十分顯著的缺陷，即：這些方法所基于的規(guī)律是建立在一般性、統(tǒng)計(jì)學(xué)差異上。鮮、干繭絲的這些物理性能的差異不是絕對的，不是兩者本質(zhì)的差別，不可能定出某一指標(biāo)作為兩者的鑒別標(biāo)準(zhǔn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種基于GC或者GC-MS技術(shù)的鮮繭生絲和干繭生絲鑒別方法，該方法基于揮發(fā)性化學(xué)成分信息對生絲樣品進(jìn)行識別，準(zhǔn)確度高。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種基于GC或GC-MS技術(shù)鑒別鮮繭/干繭生絲的方法，以鮮繭生絲、干繭生絲作為待測樣品；包括如下步驟：

1)、將待測樣品剪碎或粉碎，加入有機(jī)溶劑后進(jìn)行提取(較佳為超聲波輔助提取)，所得的提取液濃縮后(濃縮至干)，得提取物；

2)、加入有機(jī)溶劑將提取物重新溶解，過濾，所得濾液為供試液(即，供試品溶液)；

3)、選用以下任意一種鑒別方式：

方式一、GC-MS鑒別法：

用GC-MS聯(lián)用儀分析供試液，從而獲得待測樣品的GC及MS譜圖；

判定繭絲是鮮繭生絲還是干繭生絲的標(biāo)準(zhǔn)是：當(dāng)待測樣品的GC圖中峰面積最大的色譜峰所對應(yīng)的化學(xué)成分為1-乙酸二十六烷基酯時(shí)(由質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫給出的結(jié)論為1-乙酸二十六烷基酯時(shí))；判定該待測樣品為干繭生絲；否則，判定該待測樣品為鮮繭生絲；

備注說明：上述化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)信息由聯(lián)機(jī)NIST數(shù)據(jù)庫給出；

方式二、GC鑒別法：

用GC儀分別分析供試液和1-乙酸二十六烷基酯(C₂₈H₅₆O₂，CAS#822-32-2)標(biāo)準(zhǔn)品溶液；

判定繭絲是鮮繭生絲還是干繭生絲的標(biāo)準(zhǔn)是：當(dāng)待測樣品的GC譜圖中峰面積最大的色譜峰所對應(yīng)的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間的差距絕對值≤1min時(shí)，判定該待測樣品為干繭生絲；否則，判定樣品為鮮繭生絲。

作為本發(fā)明的基于GC或GC-MS技術(shù)鑒別鮮繭/干繭生絲的方法的改進(jìn)：

所述步驟1)和步驟2)中的有機(jī)溶劑均為乙醇、乙酸乙酯、正己烷或石油醚。

備注說明：該步驟1)提取的目標(biāo)是獲得生絲樣品中的揮發(fā)性化學(xué)成分。

作為本發(fā)明的基于GC或GC-MS技術(shù)鑒別鮮繭/干繭生絲的方法的進(jìn)一步改進(jìn)：

所述步驟1)中，待測樣品與有機(jī)溶劑的料液比為1g/5～200mL。

作為本發(fā)明的基于GC或GC-MS技術(shù)鑒別鮮繭/干繭生絲的方法的進(jìn)一步改進(jìn)：

所述步驟1)中，提取方式為超聲波輔助提取，提取時(shí)間為2分鐘～10小時(shí)。

作為本發(fā)明的基于GC或GC-MS技術(shù)鑒別鮮繭/干繭生絲的方法的進(jìn)一步改進(jìn)：

所述步驟2)中，過濾的孔徑為0.22μm～0.45μm。

備注說明：一般選用孔徑為0.22μm或0.45μm的針式過濾器。

作為本發(fā)明的基于GC或GC-MS技術(shù)鑒別鮮繭/干繭生絲的方法的進(jìn)一步改進(jìn)：所述步驟3)中，

方式一和方式二中的GC條件均為：從初始溫度(20～60℃)升溫至200～350℃；載氣為氦氣、氫氣或者氮?dú)?，載氣流速1ml/min；進(jìn)樣量：1μL；

備注說明：上述升溫速度一般為5～10℃/min，例如為6℃/min；

方式二中MS分析條件為：質(zhì)譜的離子源為EI源；質(zhì)譜掃描范圍(m/z)為35～600amu。

作為本發(fā)明的基于GC或GC-MS技術(shù)鑒別鮮繭/干繭生絲的方法的進(jìn)一步改進(jìn)：

步驟3)的方式一中，是以GC譜圖中峰面積最大的化學(xué)成分的保留時(shí)間以及NIST譜庫檢索結(jié)果為依據(jù)；判定為干繭生絲的必要條件為：樣品的GC譜圖中峰面積最大的成分經(jīng)NIST譜庫檢索，匹配度最高的結(jié)果為1-乙酸二十六烷基酯(C₂₈H₅₆O₂)；否則，判定待測樣品為鮮繭生絲。

作為本發(fā)明的基于GC或GC-MS技術(shù)鑒別鮮繭/干繭生絲的方法的進(jìn)一步改進(jìn)：

步驟3)的方式二中，判定為干繭生絲的必要條件為：待測樣品的GC譜圖中峰面積最大的色譜峰所對應(yīng)的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間相近(保留時(shí)間的差距絕對值≤1min)，判定該待測樣品為干繭生絲；否則，判定樣品為鮮繭生絲。

在本發(fā)明的過程中，首先采用本發(fā)明所述方法建立鮮繭生絲和干繭生絲的標(biāo)準(zhǔn)圖譜；取不同莊口的鮮繭生絲和干繭生絲用于標(biāo)準(zhǔn)圖譜的建立。

步驟1)和步驟2)的有機(jī)溶劑可為同一物，也可不為同一物。

步驟3)的GC分析條件優(yōu)選為：色譜柱規(guī)格為30m×0.25mm×0.25μm石英毛細(xì)管柱；載氣為氦氣；流速為1.0mL/min；進(jìn)樣口溫度為200～300℃；程序升溫：以6℃/min從初始溫度20～60℃升溫到200～350℃；進(jìn)樣量為1μL；

MS質(zhì)譜條件優(yōu)選為：離子源為EI源；電子能量為70eV；質(zhì)量掃描范圍為35～600amμ；采集方式為scan模式。

本發(fā)明具體是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

(1)建立鮮繭生絲和干繭生絲的標(biāo)準(zhǔn)圖譜

a、取不同莊口的鮮繭生絲和干繭生絲，將生絲剪碎或粉碎，加入溶劑進(jìn)行提取(超聲波輔助提取)。將得到的提取液濃縮至干，得到提取物。

b、加入溶劑將提取物重新溶解、過濾，濾液作為供試品溶液。

c、用GC-MS聯(lián)用儀分析供試液，獲得樣品的氣相色譜圖及質(zhì)譜圖。

d、將標(biāo)準(zhǔn)品1-乙酸二十六烷基酯(C₂₈H₅₆O2，CAS#822-32-2)用溶劑配成0.1μg/mL～1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

e、用GC儀分析1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，獲得1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的GC譜圖。

上述的技術(shù)方案中，步驟a所述的提取溶劑為有機(jī)溶劑(石油醚、正己烷、乙酸乙酯、乙醇等等)。

上述的技術(shù)方案中，步驟b和d所述的溶劑與步驟a所述的溶劑可為同一物，也可不為同一物。

所述步驟c的GC-MS分析:色譜柱規(guī)格為30m×0.25mm×0.25μm石英毛細(xì)管柱；載氣為氦氣；流速為1.0mL/min；進(jìn)樣口溫度為200～300℃；程序升溫：以6℃/min從初始溫度20℃升溫到200～350℃；進(jìn)樣量為1μL；質(zhì)譜條件為：離子源為EI源；電子能量為70eV；質(zhì)量掃描范圍為35-600amμ；采集方式為scan模式。

(2)當(dāng)使用GC-MS聯(lián)用儀(GC-MS法)分析樣品時(shí)，以步驟c相同的方法獲得待測生絲樣品的GC-MS圖譜。將待測樣品的GC-MS圖譜與鮮繭生絲和干繭生絲的標(biāo)準(zhǔn)圖譜對比，判斷待測樣品為鮮繭生絲還是為干繭生絲。

判斷方法為：當(dāng)待測樣品的氣相色譜圖中峰面積最大的色譜峰所對應(yīng)的化學(xué)成分由聯(lián)機(jī)NIST數(shù)據(jù)庫給出的結(jié)構(gòu)信息為1-乙酸二十六烷基酯時(shí)，判定該待測樣品為干繭生絲。否則，樣品為鮮繭生絲。

(3)當(dāng)使用GC儀(GC法)分析樣品時(shí)，以步驟c中的GC條件分析待測樣品，獲得待測樣品的GC譜圖。將待測樣品的GC圖譜與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的GC圖譜進(jìn)行對比，判斷待測樣品為鮮繭生絲還是為干繭生絲。

判斷方法為：當(dāng)待測樣品的GC譜圖中峰面積最大的色譜峰所對應(yīng)的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間相近時(shí)(相差1min以內(nèi))，判定該待測樣品為干繭生絲。否則，判定樣品為鮮繭生絲。

本發(fā)明具有如下技術(shù)優(yōu)勢：

1、本發(fā)明首次采用GC或者GC-MS技術(shù)對鮮繭生絲及干繭生絲進(jìn)行鑒定。采用的提取溶劑選擇性廣，提取方法簡潔、方便；

2、本發(fā)明是基于繭絲揮發(fā)性化學(xué)成分的檢測方法，方法可靠，識別率高。

本發(fā)明是以繭絲中的揮發(fā)性小分子化學(xué)成分為檢測對象，依據(jù)鮮繭生絲和干繭生絲中這些小分子組分的差異來鑒別樣品為鮮繭或是干繭生絲。

綜上所述，本發(fā)明選擇GC或者GC-MS技術(shù)對生絲中揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行分析，解決了對鮮繭生絲和干繭生絲鑒別難的問題；本發(fā)明的方法操作簡便、迅速，實(shí)驗(yàn)結(jié)果直觀可靠，準(zhǔn)確率高，能用于生絲產(chǎn)品的質(zhì)量控制和評價(jià)。

附圖說明

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)說明。

圖1是使用乙醇作為提取溶劑時(shí)鮮繭生絲和干繭生絲的GC標(biāo)準(zhǔn)圖譜。

圖2是使用乙酸乙酯為提取溶劑時(shí)鮮繭生絲和干繭生絲的GC標(biāo)準(zhǔn)圖譜。

圖3是使用正己烷作為提取溶劑時(shí)鮮繭生絲和干繭生絲的GC標(biāo)準(zhǔn)圖譜。

圖4是使用石油醚作為提取溶劑時(shí)鮮繭生絲和干繭生絲的GC標(biāo)準(zhǔn)圖譜。

圖5是干繭生絲GC譜圖中峰面積最大的組分(保留時(shí)間為30min左右，1-乙酸二十六烷基酯)的MS圖。

圖6是1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的GC譜圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此。

實(shí)施例1：浙江湖州地區(qū)產(chǎn)的兩個(gè)生絲樣品(1#和2#樣)的盲檢鑒定：

將上述兩個(gè)生絲樣品分別進(jìn)行如下操作：

將樣品分別剪碎至1cm以下，取5g左右的樣品置于250mL燒杯中，加入80mL乙醇，超聲波(頻率23KHz、功率100W)輔助提取90min。將得到的提取液于50℃下濃縮至干，得到乙醇提取物。

用1mL乙醇將提取物重新溶解，用0.22μm孔徑的針式過濾器將溶液過濾。

然后分別進(jìn)行以下2種方式：

方式一、GC-MS法：用GC-MS聯(lián)用儀分析濾液，分析條件為Agilent 7890B-5977A氣相色譜-質(zhì)譜儀；色譜柱規(guī)格為30m×0.25mm×0.25μm石英毛細(xì)管柱；載氣為氦氣；流速為1.0mL/min；進(jìn)樣口溫度為220℃；程序升溫：以6℃/min的升溫速度從初始溫度20℃升溫到250℃；進(jìn)樣量為1μL；質(zhì)譜條件為：離子源為EI源；電子能量為70eV；質(zhì)量掃描范圍為35～600amμ；采集方式為scan模式。

分析結(jié)果：GC譜圖中樣品各組分的保留時(shí)間和積分面積由Agilent GC-MS化學(xué)工作站自動完成，相對含量通過面積歸一化法得到，化學(xué)成分信息利用NIST譜庫檢索確定，結(jié)果如表1和表2所示。

1#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為29.887min，經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定為1-乙酸二十六烷基酯(CAS號:822-32-2)，符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為干繭絲生絲。2#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為21.001min，經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定為鄰苯二甲酸酯，不符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為鮮繭生絲。以上判定結(jié)果經(jīng)樣品提供方(浙江出入境檢驗(yàn)檢疫局絲類檢測中心)確認(rèn)，完全正確。

表1、1#樣品主要成分的GC-MS數(shù)據(jù)

表2、2#樣品主要成分的GC-MS數(shù)據(jù)

方式二、GC法：使用GC儀分析濾液，GC分析條件與GC-MS法中的GC條件一致。分析結(jié)果：GC譜圖中樣品各組分的保留時(shí)間和積分面積由Agilent GC-MS化學(xué)工作站自動完成，相對含量通過面積歸一化法得到。

1#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為29.869min，2#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為21.015min。1#樣品的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間(29.764min)相差0.105min，差距在1min以內(nèi)。1#樣品符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為干繭絲生絲。2#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間相差8.749min，不符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為鮮繭生絲。以上判定結(jié)果經(jīng)樣品提供方(浙江出入境檢驗(yàn)檢疫局絲類檢測中心)確認(rèn)，完全正確。

驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)1、將實(shí)現(xiàn)已知的產(chǎn)地不同的10個(gè)鮮繭生絲樣品和10干繭生絲樣品，如同實(shí)施例1所述方法進(jìn)行檢測；

每個(gè)干繭生絲樣品的檢測結(jié)果均滿足以下條件：采用GC-MS法檢測時(shí)，GC譜圖中峰面積最大的組分經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定為1-乙酸二十六烷基酯。采用GC法檢測時(shí)，樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間差距在1min以內(nèi)。

而10個(gè)鮮繭生絲樣品均不能滿足上述條件；即，其GC譜圖中峰面積最大的組分經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定均是1-乙酸二十六烷基酯以外的物質(zhì)。用GC法檢測時(shí)，GC圖中峰面積最大的組分的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間差距在1min以上。

實(shí)施例2：廣西宜州地區(qū)產(chǎn)的兩個(gè)生絲樣品(3#和4#樣)的盲檢鑒定：

將上述兩個(gè)生絲樣品分別進(jìn)行如下操作：

將樣品剪碎至1cm以下，取6.7g置于250mL燒杯中，加入120mL乙酸乙酯，超聲波輔助提取2min。將得到的提取液于35℃下濃縮至干，得到提取物。

用1mL正己烷將提取物重新溶解，并用0.45μm孔徑的針式過濾器過濾。

然后分別進(jìn)行以下2種方式：

方式一、GC-MS法：用GC-MS聯(lián)用儀分析濾液，分析條件為:Agilent 7890B-5977A氣相色譜-質(zhì)譜儀；色譜柱規(guī)格為30m×0.25mm×0.25μm石英毛細(xì)管柱；載氣為氦氣；流速為1.0mL/min；進(jìn)樣口溫度為200℃；程序升溫：以6℃/min的升溫速度從初始溫度60℃升溫到330℃；進(jìn)樣量為1μL；質(zhì)譜條件為：離子源為EI源；電子能量為70eV；質(zhì)量掃描范圍為35～600amμ；采集方式為scan模式。

分析結(jié)果：GC譜圖中樣品各組分的保留時(shí)間和積分面積由工作站自動完成，相對含量通過面積歸一化法得到，化學(xué)成分信息利用NIST譜庫檢索確定，結(jié)果如表3和表4所示。

3#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為30.096min，經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定為1-乙酸二十六烷基酯，符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為干繭生絲。4#樣GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為21.001min，經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定為鄰苯二甲酸酯，判定結(jié)果經(jīng)樣品提供方(浙江出入境檢驗(yàn)檢疫局絲類檢測中心)確認(rèn)，完全正確。

表3、3#樣品主要成分的GC-MS數(shù)據(jù)

表4、4#樣品主要成分的GC-MS數(shù)據(jù)

方式二、GC法：使用GC儀分析濾液，GC分析條件與GC-MS法中的GC條件一致。分析結(jié)果：GC譜圖中樣品各組分的保留時(shí)間和積分面積由Agilent GC-MS化學(xué)工作站自動完成，相對含量通過面積歸一化法得到。

3#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為30.201min，4#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為21.315min。1#樣品的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間(29.764min)相差0.437min，差距在1min以內(nèi)。3#樣品符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為干繭絲生絲。4#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間相差8.449min，不符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為鮮繭生絲。以上判定結(jié)果經(jīng)樣品提供方(浙江出入境檢驗(yàn)檢疫局絲類檢測中心)確認(rèn)，完全正確。

驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)2、將實(shí)現(xiàn)已知的產(chǎn)地不同的10個(gè)鮮繭生絲樣品和10干繭生絲樣品，如同實(shí)施例2所述方法進(jìn)行檢測；

每個(gè)干繭生絲樣品的檢測結(jié)果均滿足以下條件：采用GC-MS法檢測時(shí)，GC譜圖中峰面積最大的組分經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定為1-乙酸二十六烷基酯。采用GC法檢測時(shí)，樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間差距在1min以內(nèi)。

而10個(gè)鮮繭生絲樣品均不能滿足上述條件；即，其GC譜圖中峰面積最大的組分經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定均是1-乙酸二十六烷基酯以外的物質(zhì)。用GC法檢測時(shí)，GC圖中峰面積最大的組分的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間差距在1min以上。

實(shí)施例3：江蘇東臺地區(qū)產(chǎn)的生絲樣品(5#和6#樣)的盲檢鑒定：

將上述兩個(gè)生絲樣品分別進(jìn)行如下操作：

將樣品剪碎至1cm以下，取1.06g置于250mL燒杯中，加入200mL正己烷，超聲波輔助提取4hours。將得到的提取液于30℃下濃縮至干，得到提取物。

用1mL乙酸乙酯將提取物重新溶解，并用0.22μm孔徑的針式過濾器過濾。

然后分別進(jìn)行以下2種方式：

方式一、GC-MS法：用GC-MS聯(lián)用儀分析濾液，分析條件為:Agilent 7890B-5977A氣相色譜-質(zhì)譜儀；色譜柱規(guī)格為30m×0.25mm×0.25μm石英毛細(xì)管柱；載氣為氮?dú)?；流速?.0mL/min；進(jìn)樣口溫度為300℃；程序升溫：以6℃/min的升溫速度從初始溫度30℃升溫到350℃；進(jìn)樣量為1μL；質(zhì)譜條件為：離子源為EI源；電子能量為70eV；質(zhì)量掃描范圍為35～600amμ；采集方式為scan模式。

分析結(jié)果：GC譜圖中該樣品各組分的保留時(shí)間和積分面積由工作站自動完成，相對含量通過面積歸一化法得到，化學(xué)成分信息利用NIST譜庫檢索確定，結(jié)果如表5和表6所示。

5#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為18.031min，經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定為雪松醇，不符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為鮮繭生絲。6#樣GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為29.935min，經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定為1-乙酸二十六烷基酯，因此判定該樣品為干繭生絲。判定結(jié)果經(jīng)樣品提供方(浙江出入境檢驗(yàn)檢疫局絲類檢測中心)確認(rèn)，完全正確。

表5、5#樣品主要成分的GC-MS數(shù)據(jù)

表6、6#樣品主要成分的GC-MS數(shù)據(jù)

方式二、GC法：使用GC儀分析濾液，GC分析條件與GC-MS法中的GC條件一致。分析結(jié)果：GC譜圖中樣品各組分的保留時(shí)間和積分面積由Agilent GC-MS化學(xué)工作站自動完成，相對含量通過面積歸一化法得到。

5#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為18.089min，6#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為29.885min。5#樣品的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間(29.764min)相差11.675min，差距在1min以上。5#樣品不符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為鮮繭絲生絲。6#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間相差0.121min，符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為干繭生絲。以上判定結(jié)果經(jīng)樣品提供方(浙江出入境檢驗(yàn)檢疫局絲類檢測中心)確認(rèn)，完全正確。

驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)3、將實(shí)現(xiàn)已知的產(chǎn)地不同的10個(gè)鮮繭生絲樣品和10干繭生絲樣品，如同實(shí)施例3所述方法進(jìn)行檢測；

每個(gè)干繭生絲樣品的檢測結(jié)果均滿足以下條件：采用GC-MS法檢測時(shí)，GC譜圖中峰面積最大的組分經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定為1-乙酸二十六烷基酯。采用GC法檢測時(shí)，樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間差距在1min以內(nèi)。

而10個(gè)鮮繭生絲樣品均不能滿足上述條件；即，其GC譜圖中峰面積最大的組分經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定均是1-乙酸二十六烷基酯以外的物質(zhì)。用GC法檢測時(shí)，GC圖中峰面積最大的組分的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間差距在1min以上。

實(shí)施例4：廣東佛山地區(qū)產(chǎn)的生絲樣品(7#和8#樣)的盲檢鑒定：

將上述兩個(gè)生絲樣品分別進(jìn)行如下操作：

將樣品剪碎至1cm以下，取2.3g置于250mL燒杯中，加入200mL石油醚，超聲波輔助提取10hours。將得到的提取液于30℃下濃縮至干，得到提取物。

用1mL石油醚將提取物重新溶解，并用0.22μm孔徑的針式過濾器過濾。

然后分別進(jìn)行以下2種方式：

方式一、GC-MS：用GC-MS聯(lián)用儀分析濾液，分析條件為:Agilent 7890B-5977A氣相色譜-質(zhì)譜儀；色譜柱規(guī)格為30m×0.25mm×0.25μm石英毛細(xì)管柱；載氣為氫氣；流速為1.0mL/min；進(jìn)樣口溫度為250℃；程序升溫：以6℃/min的升溫速度從初始溫度20℃升溫到200℃；進(jìn)樣量為1μL；質(zhì)譜條件為：離子源為EI源；電子能量為60eV；質(zhì)量掃描范圍為35～600amμ；采集方式為scan模式。

分析結(jié)果：GC譜圖中該樣品各組分的保留時(shí)間和積分面積由工作站自動完成，相對含量通過面積歸一化法得到，化學(xué)成分信息利用NIST譜庫檢索確定，結(jié)果如表7和表8所示。

7#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為24.677min，經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定為棕櫚酸乙酯，不符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為鮮繭生絲。8#樣GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為28.991min，經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定為1-乙酸二十六烷基酯，因此判定該樣品為干繭生絲。判定結(jié)果經(jīng)樣品提供方(浙江出入境檢驗(yàn)檢疫局絲類檢測中心)確認(rèn)，完全正確。

表7、7#樣品主要成分的GC-MS數(shù)據(jù)

表8、8#樣品主要成分的GC-MS數(shù)據(jù)

方式二、GC法:使用GC儀分析濾液，GC分析條件與方法一中的GC條件一致。分析結(jié)果：GC譜圖中樣品各組分的保留時(shí)間和積分面積由Agilent GC-MS化學(xué)工作站自動完成，相對含量通過面積歸一化法得到。

7#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為24.491min，8#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間為28.801min。7#樣品的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間(29.764min)相差5.273min，差距在1min以上。7#樣品不符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為鮮繭絲生絲。8#樣品GC譜圖中峰面積最大的組分與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間相差0.963min，符合干繭生絲判定的必要條件，因此判定為干繭生絲。以上判定結(jié)果經(jīng)樣品提供方(浙江出入境檢驗(yàn)檢疫局絲類檢測中心)確認(rèn)，完全正確。

驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)4、將實(shí)現(xiàn)已知的產(chǎn)地不同的10個(gè)鮮繭生絲樣品和10干繭生絲樣品，如同實(shí)施例4所述方法進(jìn)行檢測；

每個(gè)干繭生絲樣品的檢測結(jié)果均滿足以下條件：采用GC-MS法檢測時(shí)，GC譜圖中峰面積最大的組分經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定為1-乙酸二十六烷基酯。采用GC法檢測時(shí)，樣品GC譜圖中峰面積最大的組分保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間差距在1min以內(nèi)。

而10個(gè)鮮繭生絲樣品均不能滿足上述條件；即，其GC譜圖中峰面積最大的組分經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定均是1-乙酸二十六烷基酯以外的物質(zhì)。用GC法檢測時(shí)，GC圖中峰面積最大的組分的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間差距在1min以上。

對比例1-1、將實(shí)施例1中的GC-MS分析條件中的“升溫到250℃”改成“升溫至400℃”，其余等同于實(shí)施例1。

分別用GC-MS法和GC方法對驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)1中的10個(gè)鮮繭生絲樣品和10干繭生絲樣品進(jìn)行檢測；所得結(jié)果為：使用GC-MS法檢測時(shí)，干繭生絲樣品GC譜圖中峰面積最大的組分經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定，不屬于1-乙酸二十六烷基酯，因此無法判定樣品是干繭生絲還是鮮繭生絲。使用GC法檢測時(shí)，GC圖中峰面積最大的組分的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間差距均在1min以上，誤檢可能性很高。

對比例1-2、將實(shí)施例1中的GC-MS分析條件中的“升溫到250℃”改成“升溫至150℃”，其余等同于實(shí)施例1。

按照此方法對驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)1中的10個(gè)鮮繭生絲樣品和10干繭生絲樣品進(jìn)行檢測；所得結(jié)果為：使用GC-MS法檢測時(shí)，干繭生絲樣品GC譜圖中峰面積最大的組分經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定，不屬于1-乙酸二十六烷基酯，無法判定樣品是干繭生絲還是鮮繭生絲。使用GC法檢測時(shí)，GC圖中峰面積最大的組分的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間差距均在1min以上，誤檢可能性很高。

對比例1-3、將實(shí)施例1中的有機(jī)溶劑由乙醇改成二氯甲烷或者丙酮；其余等同于實(shí)施例1。

按照此方法對驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)1中的10個(gè)鮮繭生絲樣品和10干繭生絲樣品進(jìn)行檢測；所得結(jié)果均為：使用GC-MS法檢測時(shí)，干繭生絲樣品GC譜圖中峰面積最大的組分經(jīng)NIST譜庫檢索鑒定，均不屬于1-乙酸二十六烷基酯，無法判定樣品是干繭生絲還是鮮繭生絲。使用GC法檢測時(shí)，GC圖中峰面積最大的組分的保留時(shí)間與1-乙酸二十六烷基酯標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間差距均在1min以上，誤檢可能性很高。

最后，還需要注意的是，雖然，以上列舉的僅是本發(fā)明的若干個(gè)具體實(shí)施例，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，還可以對之作一些修改或改進(jìn)，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，由本發(fā)明公開的內(nèi)容直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。