本發(fā)明屬于皮革檢測領(lǐng)域，涉及氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)，具體是指一種氣相色譜-質(zhì)譜法測定皮革中氯苯類有機(jī)污染物的方法，尤其適用于皮革。

背景技術(shù)：

隨著人們生活水平的提高和環(huán)保意識的增強(qiáng)，綠色消費(fèi)已經(jīng)成為一種潮流。載體染色工藝是皮革品行業(yè)中常用的染色工藝。載體染色有利于分散染料在常壓沸染條件下對皮革品進(jìn)行染色。一些廉價的含氯芳香族化合物，如二氯苯、三氯苯、四氯苯是高效的染色載體。這些氯苯載體用在皮革品染色過程中，有助于纖維結(jié)構(gòu)膨化和染料的滲透。然而國內(nèi)外的研究標(biāo)明，氯苯化合物化學(xué)性質(zhì)十分穩(wěn)定，在自然條件下不容易分解，長期接觸會引起皮膚過敏，影響人的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，繼而對人的身體有潛在的致畸和致癌性。

然而國內(nèi)外的研究標(biāo)明，氯苯化合物化學(xué)性質(zhì)十分穩(wěn)定，在自然條件下不容易分解，長期接觸會引起皮膚過敏，影響人的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，繼而對人的身體有潛在的致畸和致癌性。我國國內(nèi)制鞋企業(yè)關(guān)于鞋類標(biāo)準(zhǔn)普遍參考輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，主要對成鞋外觀以及物理機(jī)械性能有較為詳細(xì)的要求，而在有毒有害物質(zhì)限量方面則沒有嚴(yán)格要求，與歐盟標(biāo)準(zhǔn)相差甚遠(yuǎn)，如我國國家強(qiáng)制標(biāo)準(zhǔn)GB20400-2006《皮革和毛皮 有害物質(zhì)限量》也只規(guī)定了游離甲醛和禁用偶氮染料這兩大類的有毒有害物質(zhì)限量，這直接導(dǎo)致我國鞋類產(chǎn)品因國外技術(shù)壁壘的損失每年高達(dá)200億人民幣以上。

因此，建立準(zhǔn)確、可靠地測定皮革品中1,3-二氯苯、1,4-二氯苯、1,2-二氯苯、1,3,5-三氯苯、1,2,4-三氯苯、1,2,3-三氯苯、1,2,3,5-四氯苯、1,2,4,5-四氯苯、1,2,3,4-四氯苯、五氯苯、六氯苯等11種氯苯類有機(jī)污染物的含量非常重要。

目前，常規(guī)的分析方法可分為定性分析、定量分析和定性定量分析技術(shù)。定量分析一般采用色譜技術(shù)和色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，色譜技術(shù)有氣相色譜和液相色譜等方法，色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)有液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等方法；定性定量分析則要兼具兩種技術(shù)為一體，檢測結(jié)果要同時提供目標(biāo)物的結(jié)構(gòu)信息和數(shù)量信息。

因此，有必要對皮革品中1,3-二氯苯、1,4-二氯苯、1,2-二氯苯、1,3,5-三氯苯、1,2,4-三氯苯、1,2,3-三氯苯、1,2,3,5-四氯苯、1,2,4,5-四氯苯、1,2,3,4-四氯苯、五氯苯、六氯苯等11種氯苯類有機(jī)污染物的檢測方法進(jìn)行研究，從而對皮革品中氯苯類化合物進(jìn)行監(jiān)測，同時為國內(nèi)皮革品等輕工產(chǎn)品企業(yè)出口到歐盟等地區(qū)時，能出具符合中國和歐盟等國標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定的檢測數(shù)據(jù)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種氣相色譜-質(zhì)譜法測定皮革中氯苯類有機(jī)污染物的方法，該方法結(jié)合超聲萃取-氣相色譜-質(zhì)譜法，能夠?qū)ζじ镏新缺筋愑袡C(jī)污染物同時進(jìn)行測定，該方法具有準(zhǔn)確、快速、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)，為皮革的快速檢測提供了可靠的檢測方法支持。

本發(fā)明提供一種氣相色譜-質(zhì)譜法測定皮革中氯苯類有機(jī)污染物的方法，包括以下步驟：

步驟一、待測樣品的準(zhǔn)備，取適量皮革樣品，將樣品剪碎，樣品尺寸范圍小于20mm×20mm，并將剪碎后的樣品混合均勻；

步驟二、樣品提取，稱取0.70-1.30g試樣，置于反應(yīng)瓶中，加入30mL二氯甲烷液體，在室溫條件下進(jìn)行超聲波提取25~35min獲得超聲波提取液，過濾超聲波提取液并濃縮獲得1~2mL濃縮液，將濃縮液轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)管中，并氮吹至1mL，加入0.01mL 100 μg/mL的2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚溶液，所述2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚溶液為內(nèi)標(biāo)溶液，均勻混勻后得到待測樣品溶液；

步驟三、標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配置，配制階梯濃度分別為0.1μg/mL，0.5μg/mL，2.0μg/mL的氯苯標(biāo)準(zhǔn)液，并在氯苯標(biāo)準(zhǔn)液中加入2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚作為內(nèi)標(biāo)物混合形成標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，所述內(nèi)標(biāo)物2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚在標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中的溶度為1.0μg/mL；

步驟四、待測樣品溶液的檢測，將步驟二中的待測樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液在氣相色譜-質(zhì)譜儀上分別進(jìn)樣，獲得以標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中氯苯類有機(jī)污染物和內(nèi)標(biāo)物2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚的濃度比為橫坐標(biāo)，再以標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中氯苯類有機(jī)污染物和內(nèi)標(biāo)物2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚的峰面積比為縱坐標(biāo)的工作曲線，并獲得各標(biāo)準(zhǔn)工作液中氯苯類有機(jī)污染物和內(nèi)標(biāo)物2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚的峰面積比與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中氯苯類有機(jī)污染物和內(nèi)標(biāo)物2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚的濃度比的線性關(guān)系式，由待測樣品溶液的色譜圖測出待測樣品溶液的峰面積比，將峰面積比代入線性關(guān)系式得出待測樣品溶液中氯苯的濃度，并以2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚為內(nèi)標(biāo)物采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行計算，獲得待測樣品溶液中氯苯類有機(jī)污染物濃度，其中定量計算公式為：X=cv/m

式中X表示待測樣品溶液中氯苯的含量，單位為毫克每千克(mg/kg)；

c表示待測樣品溶液中氯苯的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)；

v表示待測樣品溶液總體積，單位為毫升(mL)；

m表示試樣質(zhì)量，單位為克(g)。

這樣設(shè)置的有益效果是：采用上述方案，采用上述方案，本發(fā)明通過加入二氯甲烷對皮革樣品進(jìn)行超聲萃取，前處理過程簡單、方便、快捷。

其次，本發(fā)明對于皮革中氯苯類有機(jī)污染物成分的定性定量檢測分析是通過氣相色譜-質(zhì)譜儀(GC-MS)分析。先配置一組階梯形的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，然后將標(biāo)準(zhǔn)工作液和待檢液在氣相色譜-質(zhì)譜儀上分別進(jìn)樣。待檢液中出現(xiàn)的色譜峰保留時間與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液一致，允許偏差小于±2.5 %，該色譜峰所對應(yīng)的質(zhì)譜定性離子的相對豐度與濃度相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)工作溶液的相對豐度一致，而且相對豐度偏差不超過規(guī)定，則可確定該待檢液中含有氯苯類化合物。

最后，本方法采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量計算，式中v即待測樣品溶液氮吹后的體積即為1ml；m即式樣稱取的質(zhì)量；c由工作曲線中的得出的線性關(guān)系計算得出，線性關(guān)系中內(nèi)標(biāo)物2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚的濃度為1.0μg/mL，其比值對數(shù)值的無影響，只影響單位，具體計算方式，先由色譜圖中讀出待測樣品溶液中的峰面積，再帶入線性關(guān)系式得出c的數(shù)值；再通過上述公式進(jìn)行計算，得出檢測結(jié)果，使得檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確，更加具有說服力。

本發(fā)明進(jìn)一步設(shè)置為所述步驟二中的提取方式為超聲萃取，提取溶劑為二氯甲烷。

這樣設(shè)置的有益效果是：采用上述方案，二氯甲烷對氯苯類有機(jī)物有著極佳的溶解性，便于對式樣中氯苯類有機(jī)物進(jìn)行集中，便于后續(xù)的檢測。

本發(fā)明進(jìn)一步設(shè)置為所述步驟二中對超聲波提取液的濃縮采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，設(shè)置濃縮溫度為40±5℃。

這樣設(shè)置的有益效果是：采用上述方案，溫度合理不會時氯苯類有機(jī)物發(fā)生分解，確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，同時采用這種旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮速度快，提高實(shí)驗(yàn)工作效率。

本發(fā)明進(jìn)一步設(shè)置為所述步驟二中還包括使用二氯甲烷液體對承載超聲波提取液的試劑瓶的洗滌并獲得洗滌液，將洗滌液與濃縮液混合并同時進(jìn)行氮吹。

這樣設(shè)置的有益效果是：采用上述方案，使用二氯甲烷對轉(zhuǎn)載過超聲波提取液的試樣瓶進(jìn)行一次洗滌，并與超聲波提取液進(jìn)行合并，有效對殘余在試樣瓶中的超聲波提取液進(jìn)行了收集，并且一同進(jìn)行下一步驟的操作和檢測，有效提高了檢驗(yàn)的精度，保證測試結(jié)果的準(zhǔn)確性。

本發(fā)明進(jìn)一步設(shè)置為所述氯苯標(biāo)準(zhǔn)液包括1,3-二氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,4-二氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,2-二氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,3,5-三氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,2,4-三氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,2,3-三氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,2,3,5-四氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,2,4,5-四氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,2,3,4-四氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、五氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、六氯苯標(biāo)準(zhǔn)液。

本發(fā)明步驟四中氣相色譜-質(zhì)譜儀的檢測參數(shù)為：

色譜條件：HP-35 MS (30 m×0.25 mm×0.25 μm )毛細(xì)管柱；采用程序升溫，初始溫度為100°C，保持1min，然后以15°C /min升溫至240°C，保持3 min；進(jìn)樣口溫度260°C，載氣為高純氦，流量1.0 mL/min, 脈沖不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量為2.0 μL。

質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源(EI)，離子源溫度為230°C，四級桿溫度為150°C，接口溫度為300°C，溶劑延遲時間為7 min，數(shù)據(jù)采集模式SIM。

下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述。

附圖說明

圖1為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,3-二氯苯化學(xué)結(jié)構(gòu)式；

圖2為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,4-二氯苯化學(xué)結(jié)構(gòu)式；

圖3為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,2-二氯苯化學(xué)結(jié)構(gòu)式；

圖4為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,3,5-三氯苯化學(xué)結(jié)構(gòu)式；

圖5為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,2,4-三氯苯化學(xué)結(jié)構(gòu)式；

圖6為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,2,3-三氯苯化學(xué)結(jié)構(gòu)式；

圖7為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,2,3,5-四氯苯化學(xué)結(jié)構(gòu)式；

圖8為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,2,4,5-四氯苯化學(xué)結(jié)構(gòu)式；

圖9為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,2,3,4-四氯苯化學(xué)結(jié)構(gòu)式；

圖10為本發(fā)明具體實(shí)施例中的五氯苯化學(xué)結(jié)構(gòu)式；

圖11為本發(fā)明具體實(shí)施例中的六氯苯化學(xué)結(jié)構(gòu)式；

圖12為本發(fā)明具體實(shí)施例中11種氯苯類化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液(2.0 μg/mL) MRM色譜圖；

圖13為本發(fā)明具體實(shí)施例中空白皮革樣品圖A

圖14為本發(fā)明具體實(shí)施例中空白皮革樣品加標(biāo)圖B；

圖15為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,3-二氯苯、1,4-二氯苯標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；

圖16為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,2-二氯苯標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；

圖17為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,3,5-三氯苯標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；

圖18為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,2,4-三氯苯標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；

圖19為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,2,3-三氯苯標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；

圖20為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,2,3,5-四氯苯、1,2,4,5-四氯苯標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；

圖21為本發(fā)明具體實(shí)施例中的1,2,3,4-四氯苯標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；

圖22為本發(fā)明具體實(shí)施例中的五氯苯標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；

圖23為本發(fā)明具體實(shí)施例中的六氯苯標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明的具體實(shí)施例如圖1-23所示是氣相色譜-質(zhì)譜法測定皮革中氯苯類有機(jī)污染物的方法，其包括以下步驟：

步驟一、待測樣品的準(zhǔn)備，取適量皮革樣品，將樣品剪碎，樣品尺寸范圍小于20mm×20mm，并將剪碎后的樣品均勻混合；

步驟二、樣品提取，稱取1.00g試樣，置于40 mL反應(yīng)瓶中，加入30 mL二氯甲烷，在室溫條件下超聲波提取30 min獲得超聲波提取液。將超聲波提取液過濾至100 mL的平底燒瓶中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀在溫度40℃條件下濃縮獲得1-2mL濃縮液，將濃縮液轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)管中，并用少量二氯甲烷清洗平底燒瓶，合并轉(zhuǎn)入蒸發(fā)管，氮吹至1 mL。加0.01 mL，100 μg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液，混勻后得到待測樣品溶液；

步驟三、標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配置，配制階梯濃度分別為0.1μg/mL，0.5μg/mL，2.0μg/mL的氯苯標(biāo)準(zhǔn)液，氯苯標(biāo)準(zhǔn)液包括1,3-二氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,4-二氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,2-二氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,3,5-三氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,2,4-三氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,2,3-三氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,2,3,5-四氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,2,4,5-四氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、1,2,3,4-四氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、五氯苯標(biāo)準(zhǔn)液、六氯苯標(biāo)準(zhǔn)液，并在氯苯標(biāo)準(zhǔn)液中加入2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚作為內(nèi)標(biāo)物混合形成標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，所述內(nèi)標(biāo)物2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚在標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中的溶度為1.0μg/mL；

步驟四、待測樣品溶液的檢測，將步驟二中的待測樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液在氣相色譜-質(zhì)譜儀上分別進(jìn)樣，色譜條件和質(zhì)譜條件分別為，

色譜條件：HP-35 MS (30 m×0.25 mm×0.25 μm )毛細(xì)管柱；采用程序升溫，初始溫度為100°C，保持1min，然后以15°C /min升溫至240°C，保留時間如表1所示；進(jìn)樣口溫度260°C，載氣為高純氦，流量1.0 mL/min, 脈沖不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量為2.0 μL；

表1 - 11種氯苯GC-MS檢測條件

質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源(EI)，離子源溫度為230°C，四級桿溫度為150°C，接口溫度為300°C，溶劑延遲時間為7 min，數(shù)據(jù)采集模式SIM。

獲得以標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中氯苯污染物和內(nèi)標(biāo)物2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚的濃度比為橫坐標(biāo)，再以標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中氯苯類有機(jī)污染物和內(nèi)標(biāo)物2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚的峰面積比為縱坐標(biāo)的工作曲線，并獲得如表2所示的11種標(biāo)準(zhǔn)工作液中氯苯類有機(jī)污染物和內(nèi)標(biāo)物2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚的峰面積比與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中氯苯類有機(jī)污染物和內(nèi)標(biāo)物2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚的濃度比的線性關(guān)系式，

表2 - 11種氯苯的線性方程、相關(guān)系數(shù)、定量限

由待測樣品溶液的色譜圖測出待測樣品溶液的峰面積比，將峰面積比代入線性關(guān)系式得出待測樣品溶液中氯苯的濃度，并以2，4，5，6-四氯間二甲基苯酚為內(nèi)標(biāo)物采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行計算，獲得待測樣品溶液中氯苯類有機(jī)污染物濃度，其中定量計算公式為：X=cv/m

式中X表示待測樣品溶液中氯苯的含量，單位為毫克每千克(mg/kg)；

c表示待測樣品溶液中氯苯的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL)；

v表示待測樣品溶液總體積，單位為毫升(mL)；

m表示試樣質(zhì)量，單位為克(g)。

表3 - 11種氯苯添加回收率、精密度 (n=6)

本發(fā)明不局限于上述具體實(shí)施方式，本領(lǐng)域一般技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明公開的內(nèi)容，可以采用其他多種具體實(shí)施方式實(shí)施本發(fā)明的，或者凡是采用本發(fā)明的設(shè)計結(jié)構(gòu)和思路，做簡單變化或更改的，都落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。