本發(fā)明涉及收率的測(cè)定方法，特別是涉及一種通過(guò)高效液相色譜分析法測(cè)定利用鄰硝基苯酚制備鄰氨基苯酚收率的方法。
背景技術(shù)：
：鄰氨基苯酚是一種重要的化工中間體，廣泛應(yīng)用于染料、醫(yī)藥、印刷業(yè)以及生物領(lǐng)域。它可用于制備硫化染料、偶氮染料和熒光增白劑，以及塑料固化劑和醫(yī)藥產(chǎn)品。近年來(lái)人們又發(fā)現(xiàn)鄰氨基苯酚可作為脂肪酸的化學(xué)修飾試劑用于分析脂肪酸，由鄰氨基苯酚與羰基化合物制成的Schiff堿及其某些金屬配合物在催化行為、磁學(xué)性質(zhì)和酶模擬等方面也有著重要作用。鄰氨基苯酚的制備主要由鄰硝基苯酚還原得到，其方法主要有鐵粉還原法、硫化鈉還原法、電解合成法以及加氫還原法。電解合成法與傳統(tǒng)的化學(xué)法相比，具有產(chǎn)物純，產(chǎn)率高，污染小等優(yōu)點(diǎn)而得到研究者的關(guān)注。其電解合成路線為：是通過(guò)電還原鄰硝基苯酚制備得到鄰氨基苯酚。由于電解完畢后的溶液中包含鄰氨基苯酚和鄰硝基苯酚兩種組分需要測(cè)定（制備過(guò)程中鄰硝基苯酚是過(guò)量的），而目前公開(kāi)的文獻(xiàn)報(bào)道僅見(jiàn)有單獨(dú)測(cè)定鄰氨基苯酚或鄰硝基苯酚的色譜法。例如，《色譜》，2012，（9）：P870-875上報(bào)道的“高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定染發(fā)劑中的11種氨基苯酚”；《化學(xué)通報(bào)》，2011,（12）：P1140-1144上報(bào)道的“微波輔助-頂空液相微萃取高效液相色譜分析水樣中的鄰硝基苯酚”等，尚未發(fā)現(xiàn)能夠同時(shí)測(cè)定這兩種化合物的分析方法。因此，建立一種可同時(shí)測(cè)定鄰氨基苯酚和鄰硝基苯酚雙組份的方法，解決以鄰硝基苯酚為原料合成鄰氨基苯酚過(guò)程中，及時(shí)進(jìn)行反應(yīng)條件的調(diào)整和優(yōu)化，提高反應(yīng)效率問(wèn)題是十分必要的。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是：如何針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提出一種簡(jiǎn)單可靠測(cè)定鄰氨基苯酚收率的方法以及時(shí)進(jìn)行反應(yīng)條件的調(diào)整和優(yōu)化。本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種通過(guò)高效液相色譜分析法測(cè)定利用鄰硝基苯酚制備鄰氨基苯酚收率的方法，按照如下的步驟進(jìn)行步驟一、通過(guò)高效液相色譜分析法分別獲得以峰面積為縱坐標(biāo)濃度為橫坐標(biāo)的鄰硝基苯酚和鄰氨基苯酚的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；步驟二、通過(guò)高效液相色譜分析法獲得利用鄰硝基苯酚制備鄰氨基苯酚的最終樣品溶液的高效液相色譜圖；步驟三、從步驟二中的高效液相色譜圖分別獲得鄰硝基苯酚和鄰氨基苯酚的峰面積，將它們分別代入步驟一中以峰面積為縱坐標(biāo)濃度為橫坐標(biāo)的鄰硝基苯酚和鄰氨基苯酚的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，分別獲得鄰硝基苯酚和鄰氨基苯酚的濃度，收率=（鄰氨基苯酚的實(shí)測(cè)質(zhì)量濃度/鄰氨基苯酚的理論質(zhì)量濃度)*100%。作為一種優(yōu)選方式：高效液相色譜分析法中，色譜柱為Shim-packVP-ODS，檢測(cè)波長(zhǎng)在270~300nm之間，流動(dòng)相為甲醇：水=60~100%的溶液，流動(dòng)相流速為0.4~1.4ml/min，色譜柱柱溫范圍25~40℃，進(jìn)樣量為20uL。作為一種優(yōu)選方式：高效液相色譜分析法中，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm，流動(dòng)相為100%甲醇，流動(dòng)相流速為0.80ml/min，色譜柱柱溫為35℃。本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明對(duì)鄰氨基苯酚和鄰硝基苯酚共存溶液中兩種化合物的同時(shí)測(cè)定，可以快速、準(zhǔn)確獲得鄰氨基苯酚的收率。附圖說(shuō)明圖1：鄰氨基苯酚和鄰硝基苯酚混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的高效液相色譜圖。圖2：供試品溶液的高效液相色譜圖。圖3：鄰氨基苯酚的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。圖4：鄰硝基苯酚的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。具體實(shí)施方式以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的描述：本實(shí)施例所用儀器與試劑日本島津公司LC-10A型高效液相色譜儀，配有SHIMADZUSPD-10Avp檢測(cè)器，N-2000色譜數(shù)據(jù)工作站，CTO-10ASvp柱箱，SCL-10Avp系統(tǒng)控制器；SK250HP型超聲波清洗器（上海科導(dǎo)超聲儀器）；BS-1105型精密電子天平（北京賽多利斯）；FB-01T型溶劑過(guò)濾器（天津恒奧）。甲醇為色譜純（天津四友），鄰硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)品（99%）和鄰氨基苯酚標(biāo)準(zhǔn)品（98%）（薩恩化學(xué)技術(shù)（上海）），水為超純水，所有試劑均用0.22um的濾膜過(guò)濾并超聲脫氣后使用。通過(guò)高效液相色譜分析法獲得鄰硝基苯酚以峰面積為縱坐標(biāo)濃度為橫坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，通過(guò)高效液相色譜分析法獲得鄰氨基苯酚以峰面積為縱坐標(biāo)濃度為橫坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：準(zhǔn)確稱取0.10g鄰硝基苯酚用甲醇稀釋并定容于一個(gè)100mL容量瓶中，準(zhǔn)確稱取0.10g鄰氨基苯酚用甲醇稀釋并定容于一個(gè)100mL容量瓶中，作為鄰硝基苯酚和鄰氨基苯酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；再分別準(zhǔn)確稱取0.10g鄰硝基苯酚和鄰氨基苯酚標(biāo)準(zhǔn)品于一個(gè)100mL容量瓶中，用甲醇稀釋并定容，作為鄰硝基苯酚和鄰氨基苯酚混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。供試品溶液的配制：準(zhǔn)確移取經(jīng)前處理調(diào)至中性的電解合成鄰氨基苯酚的樣品溶液0.5mL，用流動(dòng)相稀釋定容至10mL容量瓶中，作為檢測(cè)鄰氨基苯酚和鄰硝基苯酚的供試品溶液。分別精密量取鄰氨基苯酚和鄰硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，均以流動(dòng)相稀釋配成每1mL中含1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、30.0、35.0、40.0ug的鄰氨基苯酚或鄰硝基苯酚；通過(guò)色譜儀定量環(huán)準(zhǔn)確注入20uL測(cè)試液于高效液相色譜儀進(jìn)行分析，獲得色譜圖。分別以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，得到鄰硝基苯酚、鄰氨基苯酚的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖（如圖3、4所示），其線性相關(guān)系數(shù)R分別為0.9995和0.9998。溶液的穩(wěn)定性試驗(yàn)表1溶液的穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果化合物時(shí)間峰面積平均值RSD1359565.6882352199.063鄰氨基苯酚3353556.250355743.7941.054352705.7195360692.2501512666.7812502117.906鄰硝基苯酚3510128.344505830.2561.054503617.3135500620.938準(zhǔn)確移取鄰氨基苯酚、鄰硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液各0.20mL分別置于10mL容量瓶中，均用流動(dòng)相稀釋至刻度。每隔1h進(jìn)樣測(cè)定一次，連續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)定其峰面積，RSD均為1.05%，表明樣品溶液在5h內(nèi)基本穩(wěn)定，具體結(jié)果見(jiàn)表1。方法的精密度試驗(yàn)表2方法的精密度化合物加入量峰面積平均值RSD359565.688353947.500353034.656356157.344鄰氨基苯酚20350338.781352464.7921.04352199.063348441.125349877.563348621.406512666.781502117.906510128.344508140.844鄰硝基苯酚20504485.156507231.6560.68507891.438503617.313510029.438506007.688分別準(zhǔn)確移取0.20mL鄰氨基苯酚、鄰硝基苯酚置于兩個(gè)10mL容量瓶中，用流動(dòng)相定容，各平行測(cè)定9次，測(cè)定其峰面積，RSD分別為1.04%和0.68%，表明該方法具有良好的重復(fù)性，測(cè)定結(jié)果詳見(jiàn)表2。樣品分析及加標(biāo)回收率測(cè)定表3樣品含量測(cè)定和加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確移取3個(gè)批次的供試品溶液各兩份，分別置于10mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋并定容，其中一份定量加入鄰氨基苯酚和鄰硝基苯酚的混合標(biāo)準(zhǔn)樣，按照優(yōu)化后的色譜條件進(jìn)行鄰氨基苯酚和鄰硝基苯酚的同時(shí)分析，并進(jìn)行加標(biāo)回收率測(cè)定。結(jié)果表明，兩種化合物的回收率分別在93.0%~105.6%和90.6%~106.2%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別≤3.75%和≤1.44%，該方法可用于樣品溶液中鄰硝基苯酚和鄰氨基苯酚的同時(shí)測(cè)定，具體結(jié)果見(jiàn)表3。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3