本發(fā)明涉及藥品檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種低糖型強(qiáng)力枇杷露的指紋圖譜檢測(cè)方法。

背景技術(shù)：

低糖型強(qiáng)力枇杷露為枇杷葉、罌粟殼、百部、白前、桑白皮、桔梗、薄荷腦等藥材經(jīng)一定工藝加工而成。具有養(yǎng)陰斂肺，鎮(zhèn)咳祛痰的功效。用于久咳勞嗽，支氣管炎等。

眾所周知，中成藥的藥效不是來自任何單一的活性成分，而是多種有效部位群共同作用的結(jié)果，目前，低糖型強(qiáng)力枇杷露質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中僅有生物堿類成分的化學(xué)反應(yīng)鑒別，但這無法表征低糖型強(qiáng)力枇杷露的質(zhì)量，存在很大風(fēng)險(xiǎn)。而指紋圖譜能比較全面的表征低糖型強(qiáng)力枇杷露成分，更加嚴(yán)格的控制低糖型強(qiáng)力枇杷露的質(zhì)量。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種低糖型強(qiáng)力枇杷露的指紋圖譜檢測(cè)方法，以解決上述技術(shù)問題。

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：

一種低糖型強(qiáng)力枇杷露的指紋圖譜檢測(cè)方法，其特征在于，包括如下步驟：

第一步，建立低糖型強(qiáng)力枇杷露中成分標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜，方法如下：

(1)供試品溶液的制備：精密移取本品5ml，置25ml量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；

(2)參照物溶液的制備：取嗎啡對(duì)照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇制成每1ml含20μg的溶液，作為參照物溶液；

(3)色譜條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.01mol/L庚烷磺酸鈉溶液與0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液的等量混合液為流動(dòng)相，并用10％磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至2.8；檢測(cè)波長(zhǎng)300nm，理論板數(shù)按嗎啡計(jì)算不低于2000；

(4)測(cè)定：分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，用液相色譜法測(cè)定，制定低糖型強(qiáng)力枇杷露特征圖譜；

所述低糖型強(qiáng)力枇杷露特征圖譜中，確定為6個(gè)特征峰，以參照物嗎啡的色譜峰(S)的相對(duì)保留時(shí)間為1，先確定其特征色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間，上述6個(gè)特征峰分別是：1號(hào)峰的平均相對(duì)保留時(shí)間RRT為1.24，2號(hào)峰的平均相對(duì)保留時(shí)間RRT為1.60，3號(hào)峰平均相對(duì)保留時(shí)間RRT為1.77，4號(hào)峰平均相對(duì)保留時(shí)間RRT為1.95，5號(hào)峰平均相對(duì)保留時(shí)間RRT為2.14，6號(hào)峰平均相對(duì)保留時(shí)間RRT為2.50，所述1號(hào)峰、2號(hào)峰、3號(hào)峰、4號(hào)峰、5號(hào)峰、6號(hào)峰的相對(duì)保留時(shí)間的差值均小于10％；

以5號(hào)峰峰面積為1，確定6個(gè)特征色譜峰的相對(duì)峰面積：1號(hào)峰的平均相對(duì)峰面積0.34，2號(hào)峰的平均相對(duì)峰面積為0.19，3號(hào)峰平均相對(duì)峰面積為0.22，4號(hào)峰平均相對(duì)峰面積為0.72，5號(hào)峰平均相對(duì)峰面積為1，6號(hào)峰平均相對(duì)峰面積為0.30，所述1號(hào)峰、2號(hào)峰、3號(hào)峰、4號(hào)峰、5號(hào)峰、6號(hào)峰的相對(duì)峰面積的差值均小于10％；

第二步，以上述相同的方法測(cè)定待測(cè)低糖型強(qiáng)力枇杷露樣品特征圖譜；

第三步，將待測(cè)低糖型強(qiáng)力枇杷露樣品特征圖譜與標(biāo)準(zhǔn)的低糖型強(qiáng)力枇杷露特征圖譜比對(duì)，判斷待測(cè)低糖型強(qiáng)力枇杷露的質(zhì)量及真?zhèn)巍?/p>

本發(fā)明是結(jié)合試驗(yàn)研究工作，建立了低糖型強(qiáng)力枇杷露的標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜，能較好地保證低糖型強(qiáng)力枇杷露中藥材投料的準(zhǔn)確性與正確性。到目前為止，尚無關(guān)于上述低糖型強(qiáng)力枇杷露指紋圖譜控制方法的公開報(bào)道。

本發(fā)明的有益效果是：

1、整體性、宏觀性和模糊性，本發(fā)明克服了單一成分含量測(cè)定難以反映產(chǎn)品真實(shí)投料情況。本發(fā)明為完整、準(zhǔn)確評(píng)價(jià)低糖型強(qiáng)力枇杷露的質(zhì)量提供了新的方法和手段。

2、用視覺直觀辨識(shí)圖譜的異同；用半定量指標(biāo)量化樣品的真?zhèn)?、?yōu)劣。

附圖說明

圖1為低糖型強(qiáng)力枇杷露標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明實(shí)現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明，但下述實(shí)施例僅僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，并非全部?；趯?shí)施方式中的實(shí)施例，本領(lǐng)域技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下所獲得其它實(shí)施例，都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

實(shí)施例1：低糖型強(qiáng)力枇杷露特征圖譜的建立

1、儀器與試藥

1.1儀器

島津高效液相色譜儀及Shimadzu LCsolution工作站。

1.2試藥

嗎啡對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；乙腈為色譜純，庚烷磺酸鈉、磷酸二氫鉀為分析純；低糖型強(qiáng)力枇杷露由合肥今越制藥有限公司提供，批號(hào)為150301、150302、150303、151201、151202、151203、151204、160101、160102、160103。

2、方法與結(jié)果

2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.01mol/L庚烷磺酸鈉溶液與0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液的等量混合液(用10％磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至2.8)(13∶87)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)300nm，理論板數(shù)按嗎啡計(jì)算不低于2000。

3、特征圖譜特征峰的測(cè)定

3.1低糖型強(qiáng)力枇杷露特征圖譜特征峰的建立

(1)供試品溶液的制備：精密移取本品5ml，置25ml量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

(2)參照物溶液的制備：取嗎啡對(duì)照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇制成每1ml含20μg的溶液，作為參照物溶液。

分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，照液相色譜法測(cè)定，即得。以參照物的色譜峰保留時(shí)間1，計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間，5號(hào)色譜峰的峰面積，計(jì)算其他峰峰面積比值，即得低糖型強(qiáng)力枇杷露標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜。

3.2特征峰確定

通過10批低糖型強(qiáng)力枇杷露特征圖譜的測(cè)定，比較其圖譜，確定特征峰為6個(gè)，以參照物的色譜峰保留時(shí)間1，計(jì)算相對(duì)保留時(shí)間，5號(hào)色譜峰的峰面積，計(jì)算其他峰峰面積比值，統(tǒng)計(jì)10批樣品共有峰相對(duì)保留時(shí)間以及相對(duì)峰面積。結(jié)果見下表1、表2。

表1：10批樣品保留時(shí)間統(tǒng)計(jì)結(jié)果

表2：10批樣品峰面積比值統(tǒng)計(jì)結(jié)果

3.3特征峰的描述

(1)特征峰共有6個(gè)，其中5號(hào)峰峰面積最大。

(2)1、2、3、4、5、6號(hào)峰的相對(duì)保留時(shí)間的平均值分別為：1.24、1.60、1.77、1.95、2.14、2.50。

(3)1、2、3、4、5、6號(hào)峰的峰面積比值的平均值分別為：0.34、0.19、0.22、0.72、1、0.30。

3.4特征特征圖譜精密度試驗(yàn)

按照特征圖譜精密度規(guī)定方法操作，以批號(hào)為150301的低糖型強(qiáng)力枇杷露為供試品，依法制備，連續(xù)進(jìn)樣6次，分別對(duì)共有特征峰時(shí)間以及峰面積比值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，共有峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD分別為：0.44％、0.57％、0.44％、0.79％、0.89％、0.91％，峰面積比值的RSD分別為：0.71％、0.80％、0.99％、0.73％、/、0.85％。

3.5特征圖譜穩(wěn)定性試驗(yàn)

按照特征圖譜穩(wěn)定性測(cè)定方法操作，以批號(hào)150301的低糖型強(qiáng)力枇杷露為供試品，依法制備，于不同時(shí)間(0、2、4、8、16、24h)檢測(cè)，分別對(duì)特征峰時(shí)間以及峰面積比值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，特征峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD分別為：0.52％、0.45％、0.61％、0.70％、0.53％、0.42％，峰面積比值的RSD分別為：0.65％、0.49％、0.52％、0.52％、/、0.42％。

3.6特征特征圖譜重復(fù)性試驗(yàn)

按照特征圖譜重復(fù)性規(guī)定方法操作，以批號(hào)為150301的低糖型強(qiáng)力枇杷露為供試品，依法制備6份樣品，進(jìn)樣檢測(cè)，分別對(duì)共有特征峰時(shí)間以及峰面積比值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，共有峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD分別為：0.87％、0.56％、0.78％、0.52％、0.75％、0.87％，峰面積比值的RSD分別為：0.59％、0.49％、0.62％、0.72％、/、0.79％。

以上試驗(yàn)結(jié)果表明，應(yīng)用此方法對(duì)低糖型強(qiáng)力枇杷露標(biāo)準(zhǔn)特征圖譜進(jìn)行測(cè)定方法可靠，能比較全面的反映本品中的化學(xué)信息，確保產(chǎn)品投料的準(zhǔn)確性與正確性。

以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的僅為本發(fā)明的優(yōu)選例，并不用來限制本發(fā)明，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。