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一種金黃色葡萄球菌的電化學(xué)檢測方法與流程

文檔序號:12118897閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種金黃色葡萄球菌的電化學(xué)檢測方法,包括步驟如下:

(1)制備羧基功能化的介孔碳材料O-CMK-3:300mg CMK-3浸入到15mL1.75mol/L過硫酸銨溶液和15mL 2mol/L硫酸溶液中,40℃下水浴攪拌24h,利用濕氧化法得到羧基功能化有序介孔碳材料CMK-3;

(2)制備固定化分選酶介孔碳納米復(fù)合材料O-CMK-3-M:5mg EDC和6mg NHS加入30mL Tris-HCL緩沖液中,取30mg羧基功能化的介孔碳材料O-CMK-3加入溶液中,室溫下超聲分散30min,取1mL 11.486mg/mL分選酶加入Tri s-HCL緩沖液中,37℃條件下150rpm震蕩培養(yǎng)8h,離心取沉淀,制得固定化分選酶介孔碳納米復(fù)合材料;

(3)取0.015g固定化分選酶介孔碳納米復(fù)合材料,0.065g石墨,與24uL的液體石蠟研磨均勻,制成碳糊電極,沒入金黃色葡萄球菌菌液中檢測。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金黃色葡萄球菌的電化學(xué)檢測方法,其特征是將分選酶固載化,利用分選酶與金葡菌表面蛋白特異性結(jié)合檢測金葡菌。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金黃色葡萄球菌檢測方法,其特征在于,步驟(2)中所采用的固定方法為共價結(jié)合法。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金黃色葡萄球菌檢測方法,其特征在于,步驟(2)中所采用的離心方法為冷凍離心,13000rpm,4℃,20min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的金黃色葡萄球菌檢測方法,其特征在于,步驟(3)中檢測方法為差分脈沖伏安法(DPV),條件為:起始點位0.2V,最高點位1.3V,電位增幅0.004V,脈沖寬度為0.06s,脈沖周期為0.02s,靜止時間0.5s,靈敏度1.0e-003A/V。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的金黃色葡萄球菌檢測方法,其特征在于,差分脈沖伏安法(DPV)檢測時間間隔為20min。

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