本發(fā)明涉及一種檢測試紙，具體是一種氧氟沙星檢測試紙及其檢測方法。

背景技術(shù)：

食品安全檢測作為保障食品安全的重要手段，發(fā)揮著越來越重要的作用，食品安 全檢測技術(shù)的發(fā)展方向呈現(xiàn)兩個趨勢 ：一是向設備日趨完善、痕量分析方向發(fā)展 ；另一個 是向儀器便攜化和現(xiàn)場檢測方向發(fā)展。食品安全檢測中備受關(guān)注的檢測物包括農(nóng)獸藥殘留 等項目，研發(fā)高通量、快速、靈敏的農(nóng)獸藥檢測試劑可謂當務之急。

農(nóng)獸藥殘留的檢測手段主要有 ：理化分析法、微生物法、免疫法。其中免疫學檢測 是農(nóng)獸藥殘留檢測的發(fā)展方向，它可以做到快速和特異性。酶聯(lián)免疫吸附方法 (ELISA 法 ) 已經(jīng)逐步成為食品中農(nóng)獸藥殘留檢測的一種重要方法。國家獸藥安全評價中心的初步調(diào) 查，國內(nèi)使用 ELISA 檢測試紙作為獸藥殘留篩選的檢測樣本數(shù)量遠遠超過微生物方法和理化 分析方法。

免疫分析技術(shù)以其抗原抗體反應的高度專一性、測定方法的簡單、快速及高靈敏 度、低費用和適于現(xiàn)場大批量樣品篩選等優(yōu)點，在農(nóng)獸藥殘留分析中展示了廣泛的應用前 景。隨著農(nóng)藥殘留免疫學檢測技術(shù)不斷被完善和商品化，免疫學檢測技術(shù)會成為食品農(nóng)獸藥殘留和食品安全質(zhì)量控制的有效快速檢測手段?；谀壳矮F藥殘留診斷試劑的研究現(xiàn) 狀，及時開發(fā)出優(yōu)于目前的、快速靈敏的檢測試劑可謂是當務之急。免疫學技術(shù)進行分析是 特異性很好、檢測時間較短的方法。

目前，對氧氟沙星的檢測主要在食品領域以及環(huán)境領域，用于抗生素檢測的方法主 要有高效液相色譜技術(shù)、微生物法、免疫分析法，這些方法需要昂貴的檢測儀器或?qū)I(yè)的檢 測人員，不適合家庭使用。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種氧氟沙星檢測試紙及其檢測方法，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種氧氟沙星檢測試紙，包括底板、樣品吸收墊、樣品結(jié)合墊、反應膜和樣品吸水墊，所述底板上從左到右依次設有樣品吸收墊、樣品結(jié)合墊、反應膜和樣品吸水墊。

作為本發(fā)明進一步的方案：所述的樣品結(jié)合墊包被有β-內(nèi)酰 胺特異性抗體-膠體金標記物、氧氟沙星特異性抗體-膠體金標記物、喹諾酮特異性抗體-膠體金標記物、大環(huán)內(nèi)脂特異性抗體-膠體金標記物、磺胺特異性抗體-膠體金標記物和頭孢特異性抗體-膠體金標記物。

作為本發(fā)明進一步的方案：所述的反應膜為硝酸纖維素膜，其上面依此包被有大環(huán)內(nèi)脂類抗生素檢測線、β-內(nèi)酰胺類抗生素檢測線、氧氟沙星類抗生素檢測線、喹諾酮類抗生素檢測線、磺胺類抗生素檢測線、頭孢類抗生素檢測線和羊抗鼠質(zhì)控線。

作為本發(fā)明再進一步的方案：所述的大環(huán)內(nèi)脂類抗生素檢測線與所述的β-內(nèi)酰胺抗生素檢測線并排、所述的氧氟沙星類抗生素檢測線與所述的喹諾酮類抗 生素檢測線并排、所述的磺胺類抗生素檢測線與所述的頭孢類抗生素檢測線并排。

作為本發(fā)明再進一步的方案：所述的大環(huán)內(nèi)脂類抗生素檢測線為大環(huán)內(nèi)脂類抗生素-載體蛋白，所述的β-內(nèi)酰胺類抗生素檢測線為β-內(nèi)酰胺類抗生素-載 體蛋白，所述的氧氟沙星類抗生素檢測線為氧氟沙星類抗生素-載體蛋白，所述的喹諾烷酮類抗生素檢測線為喹諾烷酮類抗生素-載體蛋白，所述的磺胺類抗生素檢測線為磺胺類抗生素- 載體蛋白，所述的頭孢類抗生素檢測線為頭孢類抗生素檢測線。

作為本發(fā)明再進一步的方案：所述的載體蛋白為牛血清白蛋白。

作為本發(fā)明再進一步的方案：所述的樣品吸水墊為濾紙塊。

一種氧氟沙星檢測試紙的制備方法，A配 制 指 示 劑 ：將上述樣品吸收墊、樣品結(jié)合墊、反應膜和樣品吸水墊所需的包被物按照1.30比例溶于蒸餾水中，B浸漬 ：將配制好的指示劑倒入浸漬機，卷筒試紙原紙先后經(jīng)過退紙架和導紙輥進,C入浸漬機，調(diào)整退紙架導輥和導紙輥，使原紙?zhí)幱诶o和平整的狀態(tài)，原紙以 3.6-4.2m/s 的速度通過浸漬機上的浸漬槽，指示劑即均勻涂布在原紙上，然后經(jīng)橡膠導輥擠壓，進入烘干裝置；D烘干：常壓下用熱蒸汽烘干，蒸汽溫度為98-102℃，時間為大于3分鐘。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明通過在測試紙中加入不同的標記物，使得本測試紙能夠快速準確的測試氧氟沙星物質(zhì)的同時，還能對喹諾烷酮類抗生素、磺胺類抗生素、β-內(nèi)酰胺類抗生素等一系列抗生素均作出準確的檢測，且不同的抗生素設有不同的檢測線，不會產(chǎn)生混淆的情況，達到使用方便、快速，不需要專業(yè)操作，適合家庭使用的目的。

附圖說明

圖1是本發(fā)明的整體結(jié)構(gòu)圖。

圖中：1-采樣區(qū)、2-檢測區(qū)、3-質(zhì)檢區(qū)、4-吸水墊、5-保護膜、6-塑料底板。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施方式對本專利的技術(shù)方案作進一步詳細地說明。

請參閱圖1，一種氧氟沙星檢測試紙，包括底板、樣品吸收墊、樣品結(jié)合墊、反應膜和樣品吸水墊，所述底板上從左到右依次設有樣品吸收墊、樣品結(jié)合墊、反應膜和樣品吸水墊。

所述的樣品結(jié)合墊包被有β-內(nèi)酰 胺特異性抗體-膠體金標記物、氧氟沙星特異性抗體-膠體金標記物、喹諾酮特異性抗體-膠體金標記物、大環(huán)內(nèi)脂特異性抗體-膠體金標記物、磺胺特異性抗體-膠體金標記物和頭孢特異性抗體-膠體金標記物。

所述的反應膜為硝酸纖維素膜，其上面依此包被有大環(huán)內(nèi)脂類抗生素檢測線、β-內(nèi)酰胺類抗生素檢測線、氧氟沙星類抗生素 檢測線、喹諾酮類抗生素檢測線、磺胺類抗生素檢測線、頭孢類抗生素檢測線和羊抗鼠質(zhì)控線。

所述的大環(huán)內(nèi)脂類抗生素檢測線與所述的β-內(nèi)酰胺抗生素檢測線并排、所述的氧氟沙星類抗生素檢測線與所述的喹諾酮類抗 生素檢測線并排、所述的磺胺類抗生素檢測線與所述的頭孢類抗生素檢測線并排。

所述的大環(huán)內(nèi)脂類抗生素檢測線為大環(huán)內(nèi)脂類抗生素-載體蛋白，所述的β-內(nèi)酰胺類抗生素檢測線為β-內(nèi)酰胺類抗生素-載 體蛋白，所述的氧氟沙星類抗生素檢測線為氧氟沙星類抗生素-載體蛋白，所述的喹諾烷酮類抗 生素檢測線為喹諾烷酮類抗生素-載體蛋白，所述的磺胺類抗生素檢測線為磺胺類抗生素- 載體蛋白，所述的頭孢類抗生素檢測線為頭孢類抗生素檢測線。所述的載體蛋白為牛血清白蛋白。所述的樣品吸水墊為濾紙塊。

A配 制 指 示 劑 ：將上述樣品吸收墊、樣品結(jié)合墊、反應膜和樣品吸水墊所需的包被物按照1.30比例溶于蒸餾水中，B浸漬 ：將配制好的指示劑倒入浸漬機，卷筒試紙原紙先后經(jīng)過退紙架和導紙輥進,C入浸漬機，調(diào)整退紙架導輥和導紙輥，使原紙?zhí)幱诶o和平整的狀態(tài)，原紙以 3.6-4.2m/s 的速度通過浸漬機上的浸漬槽，指示劑即均勻涂布在原紙上，然后經(jīng)橡膠導輥擠壓，進入烘干裝置；D烘干：常壓下用熱蒸汽烘干，蒸汽溫度為98-102℃，時間為大于3分鐘。

本發(fā)明的工作原理是：膠體金的制備方法，用雙蒸去離子水將質(zhì)量分數(shù)5％氯金酸稀釋成質(zhì)量分數(shù)至0 .01％，置磁力加熱棒 攪拌器上攪拌煮沸，煮沸后每100ml氯金酸加入5ml質(zhì)量分數(shù)3％檸檬酸三鈉，溶液的顏色會 由淺黃變蘭色，然后變深蘭，最后變?yōu)榧t色，當溶液的顏色完全變?yōu)橥该鞯募t色時，繼續(xù)回 流，10min后停止加熱，冷卻至室溫后用雙蒸去離子水補充至原體積并于4℃避光保存。β-內(nèi)酰胺類抗生素特異性抗體-膠體金標記物制備方法，以目測法確定膠體金與待標記抗體用量比例，用0 .1mol/L的碳酸鉀調(diào)節(jié)膠體金溶液至7 .2，將抗體用pH為7 .6，0 .1mol/L的磷酸鹽緩沖液逐級稀釋為5～40μg/ml，各取 0 .1ml按順序加入一系列裝有1ml膠體金的試管中，5min后在上述試管內(nèi)分別加入0 .1ml質(zhì) 量分數(shù)1％氯化鈉，混勻，靜置2h后觀察結(jié)果。從加入抗體濃度為10μg/ml的試管開始，膠體 金溶液的顏色基本一致，因此穩(wěn)定1ml膠體金最適抗體量是10μg/ml。在磁力攪拌下，在10ml膠體金中加入β-內(nèi)酰胺類抗生素特異性隆抗體10ml，繼 續(xù)攪拌混勻10min，加入0 .2ml10％BSA，靜置30min。4℃離心30min，棄上清液，沉淀物用含質(zhì) 量分數(shù)0 .1％的牛血清白蛋白、0 .5％的表面活性劑，pH為7 .2的0 .2mol/L磷酸鹽緩沖液洗滌 兩次，即可得到已純化的金標抗體溶液，置4℃?zhèn)溆?。按同樣的方法制備其他金標抗體溶液，氧氟沙星檢測試紙條的靈敏度試驗，大環(huán)內(nèi)脂類抗生素、β-內(nèi)酞胺類抗生素、氧氟沙星類抗生素、喹諾烷酮類抗生素、頭 孢類抗生素和磺胺類抗生素分別用pH為7的0 .2mol/L的磷酸鹽緩沖液稀釋成不同濃度，然后用本發(fā)明的試紙條進行檢測，將不同濃度的抗生素滴加到試紙條的樣品墊。結(jié)果表明，本 試紙條的檢測靈敏度分別為:紅霉素10μg/L、螺旋霉素8μg/L、青霉素G 4μg/L，阿莫西林4μ g/L、金霉素15μg/L、土霉素30μg/L、諾氟沙星60μg/L、氧氟沙星100μg/L、磺胺多辛100μg/L、 磺胺嚓咤100μg/L、頭抱哇諾20μg/L、頭抱洛寧20μg/L。

對于本領域技術(shù)人員而言，顯然本發(fā)明不限于上述示范性實施例的細節(jié)，而且在不背離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下，能夠以其他的具體形式實現(xiàn)本發(fā)明。因此，無論從哪一點來看，均應將實施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權(quán)利要求的等同要件的含義和范圍內(nèi)的所有變化囊括在本發(fā)明內(nèi)。不應將權(quán)利要求中的任何附圖標記視為限制所涉及的權(quán)利要求。

此外，應當理解，雖然本說明書按照實施方式加以描述，但并非每個實施方式僅包含一個獨立的技術(shù)方案，說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見，本領域技術(shù)人員應當將說明書作為一個整體，各實施例中的技術(shù)方案也可以經(jīng)適當組合，形成本領域技術(shù)人員可以理解的其他實施方式。