本發(fā)明涉及食品安全檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域,具體為一種雞肉萊克多巴胺檢測(cè)方法及試劑盒。
背景技術(shù):
萊克多巴胺是一種β促效劑藥物,是瘦肉精的一種,可以被用來(lái)作為動(dòng)物飼料添加物,用以助長(zhǎng)豬、牛、火雞生出肌肉,減少體脂肪,在大量食用含有萊克多巴胺殘留的肉類或內(nèi)臟時(shí),可能引發(fā)中毒癥狀,對(duì)此藥物在養(yǎng)殖業(yè)的適用范圍和安全性世界各國(guó)的規(guī)定不盡相同。
萊克多巴胺使用在商品雞中時(shí),商品雞能夠高效率地生產(chǎn)出瘦肉率高質(zhì)量好的雞肉,瘦肉胴體的定價(jià)系統(tǒng)導(dǎo)致了對(duì)瘦肉生長(zhǎng)速度、胴體瘦肉率和飼料報(bào)酬的進(jìn)一步選擇,健康、營(yíng)養(yǎng)和設(shè)備管理策略的推行都是為了盡可能地提高瘦肉生長(zhǎng)效率,但是萊克多巴胺在全世界養(yǎng)雞業(yè)中的使用都是違法的。
然而現(xiàn)有的雞肉萊克多巴胺的檢測(cè)不夠準(zhǔn)確和直觀,導(dǎo)致人們不能夠?qū)ι唐冯u進(jìn)一步的分析和研究,這樣嚴(yán)重影響了人們的工作,降低了工作人員的工作質(zhì)量。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
(一)解決的技術(shù)問(wèn)題
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足,本發(fā)明提供了一種雞肉萊克多巴胺檢測(cè)方法及試劑盒,解決了雞肉萊克多巴胺的檢測(cè)不夠準(zhǔn)確和直觀的問(wèn)題。
(二)技術(shù)方案
為實(shí)現(xiàn)以上目的,本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn):
一種雞肉萊克多巴胺檢測(cè)方法,其特征在于,包括以下步驟:
S1:通過(guò)雞肉、乙酸乙酯和碳酸鉀溶液配置5-6ml的測(cè)試溶液;
S2:將制成后的萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品0.025~0.5mg/L的甲醇溶液數(shù)點(diǎn),分別注入GC-MS中進(jìn)行色譜;
S3:通過(guò)峰高法或面積法繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
優(yōu)選的,所述S1中測(cè)試溶液的制配方法如下步驟:
A1:先用切割刀具取出10-20克的雞肉,然后對(duì)雞肉進(jìn)行去脂和清洗,然后把雞肉放置在攪碎機(jī)內(nèi),加入50-100ml的蒸餾水,對(duì)雞肉進(jìn)行攪碎,攪碎時(shí)間為3-5分鐘,產(chǎn)生混合液;
A2:然后提取5-10ml的混合液,放入離心機(jī)內(nèi),再加入10-20乙酸乙酯和1-2mL碳酸鉀溶液,碳酸鉀溶液的濃度為均質(zhì)后4mol/L,離心分離10-20分鐘;
A3:然后收集乙酸乙酯層,離心管內(nèi)殘留物中加入20-30mL乙酸乙酯,振蕩5-10分鐘后,按上述同樣條件離心分離,合并所得的乙酸乙酯層,在20-30攝氏度的條件下進(jìn)行濃縮,除去乙酸乙酯;
A4:殘留物中加入30-40mL乙腈溶解,移入分液漏斗中,加入30-40mL乙腈飽和正己烷,振蕩,棄去正己烷層,重復(fù)操作2-3次;
A5:乙腈層在20-30攝氏度條件下濃縮,除去乙腈,殘留物中加入1-2mL甲醇溶解,制成5-6ml中含有萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品0.025~0.5mg/L的甲醇溶液。
優(yōu)選的,所述A1雞肉的去脂和清洗流程如下:
B1:先把切割好的雞肉塊放置在過(guò)濾網(wǎng)上,然后通過(guò)膠頭滴管吸取濃度為70%-90%的酒精,酒精容量為20-30ml,然后緩慢的清洗雞肉的表面,直至酒精清洗完,去除雞肉上的脂肪;
B2:然后把清洗完成的雞肉放置在晾干板上,晾干5-10分鐘;
B3:然后把晾干的雞肉防止在過(guò)濾板上,然后通過(guò)膠體滴管吸取20-30ml的蒸餾水,對(duì)晾干的雞肉進(jìn)行清洗,清洗時(shí)間為2-3分鐘;
B4:把清洗的后的雞肉放置在吸水紙上,進(jìn)行晾干處理,晾干時(shí)間為10-20分鐘。
優(yōu)選的,所述A2中離心處理,需要使用到轉(zhuǎn)速為3000轉(zhuǎn)每分鐘轉(zhuǎn)速的離心機(jī)。
一種雞肉萊克多巴胺試劑盒,包括試劑盒本體,所述試劑盒本體的頂部通過(guò)轉(zhuǎn)軸活動(dòng)連接有蓋體,所述試劑盒本體的內(nèi)部固定安裝有試管架,所述蓋體靠近試劑盒本體的一側(cè)固定安裝有繪圖板,所述試劑盒本體的正表面固定安裝有卡座,所述蓋體的前端固定安裝有卡扣。
(三)有益效果
本發(fā)明提供了一種雞肉萊克多巴胺檢測(cè)方法及試劑盒。具備以下有益效果:
(1)、該雞肉萊克多巴胺檢測(cè)方法及試劑盒,通過(guò)對(duì)測(cè)試溶液的制配和GC-MS的使用,使檢測(cè)出來(lái)的結(jié)果能夠繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,這樣不僅方便了人們的觀察,而且能夠更加方便的對(duì)雞肉做進(jìn)一步的對(duì)比和參照,而且這樣的曲線圖能夠有效的減少誤差,方便人們的使用。
(2)、該雞肉萊克多巴胺檢測(cè)方法及試劑盒,通過(guò)對(duì)去脂和清洗過(guò)程的設(shè)置,能夠有效的去除雞肉中的脂肪,這樣提高對(duì)雞肉內(nèi)萊克多巴胺檢測(cè)的準(zhǔn)確性,提高了實(shí)驗(yàn)的效果。
附圖說(shuō)明
圖1為本發(fā)明雞肉萊克多巴胺試劑盒的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖中:1試劑盒本體、2蓋體、3試管架、4繪圖板、5卡座、6卡扣。
具體實(shí)施方式
下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖,對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述,顯然,所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例,而不是全部的實(shí)施例?;诒景l(fā)明中的實(shí)施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例,都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
實(shí)施例一
一種雞肉萊克多巴胺檢測(cè)方法,包括以下步驟:
S1:通過(guò)雞肉、乙酸乙酯和碳酸鉀溶液配置5ml的測(cè)試溶液;
S1中測(cè)試溶液的制配方法如下步驟:
A1:先用切割刀具取出10克的雞肉,然后對(duì)雞肉進(jìn)行去脂和清洗,先把切割好的雞肉塊放置在過(guò)濾網(wǎng)上,然后通過(guò)膠頭滴管吸取濃度為70%的酒精,酒精容量為20ml,然后緩慢的清洗雞肉的表面,直至酒精清洗完,去除雞肉上的脂肪,然后把清洗完成的雞肉放置在晾干板上,晾干5分鐘,然后把晾干的雞肉防止在過(guò)濾板上,然后通過(guò)膠體滴管吸取20ml的蒸餾水,對(duì)晾干的雞肉進(jìn)行清洗,清洗時(shí)間為2分鐘,把清洗的后的雞肉放置在吸水紙上,進(jìn)行晾干處理,晾干時(shí)間為10分鐘,然后把雞肉放置在攪碎機(jī)內(nèi),加入50ml的蒸餾水,對(duì)雞肉進(jìn)行攪碎,攪碎時(shí)間為3-5分鐘,產(chǎn)生混合液;
A2:然后提取5ml的混合液,放入離心機(jī)內(nèi),離心處理,需要使用到轉(zhuǎn)速為3000轉(zhuǎn)每分鐘轉(zhuǎn)速的離心機(jī),再加入10乙酸乙酯和1mL碳酸鉀溶液,碳酸鉀溶液的濃度為均質(zhì)后4mol/L,離心分離10分鐘;
A3:然后收集乙酸乙酯層,離心管內(nèi)殘留物中加入20mL乙酸乙酯,振蕩5分鐘后,按上述同樣條件離心分離,合并所得的乙酸乙酯層,在20攝氏度的條件下進(jìn)行濃縮,除去乙酸乙酯;
A4:殘留物中加入30mL乙腈溶解,移入分液漏斗中,加入30mL乙腈飽和正己烷,振蕩,棄去正己烷層,重復(fù)操作2次;
A5:乙腈層在20攝氏度條件下濃縮,除去乙腈,殘留物中加入1mL甲醇溶解,制成5ml中含有萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品0.025mg/L的甲醇溶液;
S2:將制成后的萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品0.025mg/L的甲醇溶液數(shù)點(diǎn),分別注入GC-MS中進(jìn)行色譜;
S3:通過(guò)峰高法或面積法繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
實(shí)施例二
一種雞肉萊克多巴胺檢測(cè)方法,包括以下步驟:
S1:通過(guò)雞肉、乙酸乙酯和碳酸鉀溶液配置5.5ml的測(cè)試溶液;
S1中測(cè)試溶液的制配方法如下步驟:
A1:先用切割刀具取出15克的雞肉,然后對(duì)雞肉進(jìn)行去脂和清洗,先把切割好的雞肉塊放置在過(guò)濾網(wǎng)上,然后通過(guò)膠頭滴管吸取濃度為80%的酒精,酒精容量為25ml,然后緩慢的清洗雞肉的表面,直至酒精清洗完,去除雞肉上的脂肪,然后把清洗完成的雞肉放置在晾干板上,晾干7.5分鐘,然后把晾干的雞肉防止在過(guò)濾板上,然后通過(guò)膠體滴管吸取25ml的蒸餾水,對(duì)晾干的雞肉進(jìn)行清洗,清洗時(shí)間為2.5分鐘,把清洗的后的雞肉放置在吸水紙上,進(jìn)行晾干處理,晾干時(shí)間為15分鐘,然后把雞肉放置在攪碎機(jī)內(nèi),加入75ml的蒸餾水,對(duì)雞肉進(jìn)行攪碎,攪碎時(shí)間為4分鐘,產(chǎn)生混合液;
A2:然后提取7.5ml的混合液,放入離心機(jī)內(nèi),離心處理,需要使用到轉(zhuǎn)速為3000轉(zhuǎn)每分鐘轉(zhuǎn)速的離心機(jī),再加入15乙酸乙酯和1.5mL碳酸鉀溶液,碳酸鉀溶液的濃度為均質(zhì)后4mol/L,離心分離15分鐘;
A3:然后收集乙酸乙酯層,離心管內(nèi)殘留物中加入25mL乙酸乙酯,振蕩7.5分鐘后,按上述同樣條件離心分離,合并所得的乙酸乙酯層,在25攝氏度的條件下進(jìn)行濃縮,除去乙酸乙酯;
A4:殘留物中加入35mL乙腈溶解,移入分液漏斗中,加入35mL乙腈飽和正己烷,振蕩,棄去正己烷層,重復(fù)操作2次;
A5:乙腈層在25攝氏度條件下濃縮,除去乙腈,殘留物中加入1.5mL甲醇溶解,制成5.5ml中含有萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品0.263mg/L的甲醇溶液;
S2:將制成后的萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品0.263mg/L的甲醇溶液數(shù)點(diǎn),分別注入GC-MS中進(jìn)行色譜;
S3:通過(guò)峰高法或面積法繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
實(shí)施例三
一種雞肉萊克多巴胺檢測(cè)方法,包括以下步驟:
S1:通過(guò)雞肉、乙酸乙酯和碳酸鉀溶液配置6ml的測(cè)試溶液;
S1中測(cè)試溶液的制配方法如下步驟:
A1:先用切割刀具取出20克的雞肉,然后對(duì)雞肉進(jìn)行去脂和清洗,先把切割好的雞肉塊放置在過(guò)濾網(wǎng)上,然后通過(guò)膠頭滴管吸取濃度為90%的酒精,酒精容量為30ml,然后緩慢的清洗雞肉的表面,直至酒精清洗完,去除雞肉上的脂肪,然后把清洗完成的雞肉放置在晾干板上,晾干10分鐘,然后把晾干的雞肉防止在過(guò)濾板上,然后通過(guò)膠體滴管吸取30ml的蒸餾水,對(duì)晾干的雞肉進(jìn)行清洗,清洗時(shí)間為3分鐘,把清洗的后的雞肉放置在吸水紙上,進(jìn)行晾干處理,晾干時(shí)間為20分鐘,然后把雞肉放置在攪碎機(jī)內(nèi),加入100ml的蒸餾水,對(duì)雞肉進(jìn)行攪碎,攪碎時(shí)間為5分鐘,產(chǎn)生混合液;
A2:然后提取10ml的混合液,放入離心機(jī)內(nèi),離心處理,需要使用到轉(zhuǎn)速為3000轉(zhuǎn)每分鐘轉(zhuǎn)速的離心機(jī),再加入20乙酸乙酯和2mL碳酸鉀溶液,碳酸鉀溶液的濃度為均質(zhì)后4mol/L,離心分離20分鐘;
A3:然后收集乙酸乙酯層,離心管內(nèi)殘留物中加入30mL乙酸乙酯,振蕩10分鐘后,按上述同樣條件離心分離,合并所得的乙酸乙酯層,在30攝氏度的條件下進(jìn)行濃縮,除去乙酸乙酯;
A4:殘留物中加入40mL乙腈溶解,移入分液漏斗中,加入40mL乙腈飽和正己烷,振蕩,棄去正己烷層,重復(fù)操作3次;
A5:乙腈層在30攝氏度條件下濃縮,除去乙腈,殘留物中加入2mL甲醇溶解,制成6ml中含有萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品0.5mg/L的甲醇溶液;
S2:將制成后的萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品0.5mg/L的甲醇溶液數(shù)點(diǎn),分別注入GC-MS中進(jìn)行色譜;
S3:通過(guò)峰高法或面積法繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
實(shí)施例一、實(shí)施例二和實(shí)施例三中乙酸乙酯層通過(guò)分液進(jìn)行去除,這樣不僅徹底而且還更加方便,其中A4中的分液漏斗放置在震蕩機(jī)內(nèi),進(jìn)行震蕩除去正己烷層,該方法中使用GC-MS是高效液相色譜-質(zhì)譜儀。
請(qǐng)參閱圖1,本發(fā)明提供一種雞肉萊克多巴胺試劑盒,包括試劑盒本體1,試劑盒本體1的頂部通過(guò)轉(zhuǎn)軸活動(dòng)連接有蓋體2,試劑盒本體1的內(nèi)部固定安裝有試管架3,蓋體2靠近試劑盒本體1的一側(cè)固定安裝有繪圖板4,試劑盒本體1的正表面固定安裝有卡座5,蓋體2的前端固定安裝有卡扣6。
卡扣6能夠有效的固定在卡座5上,方便了人們的使用,試管架3內(nèi)安裝有乙酸乙酯試劑、酒精試劑、蒸餾水、碳酸鉀溶液、乙腈飽和正己烷溶液和甲醇溶液,繪圖板4能夠使人們快速方便的繪出圖形。
需要說(shuō)明的是,在本文中,術(shù)語(yǔ)“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含,從而使得包括一系列要素的過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備不僅包括那些要素,而且還包括沒(méi)有明確列出的其他要素,或者是還包括為這種過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備所固有的要素。在沒(méi)有更多限制的情況下。由語(yǔ)句“包括一個(gè)......限定的要素,并不排除在包括所述要素的過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備中還存在另外的相同要素”。
盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例,對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言,可以理解在不脫離本發(fā)明的原理和精神的情況下可以對(duì)這些實(shí)施例進(jìn)行多種變化、修改、替換和變型,本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求及其等同物限定。