1.一種測(cè)定盾葉薯蕷中偽原薯蕷皂苷含量的方法,其特征在于采用高效液相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿(大氣壓離子化) 質(zhì)譜法(HPLC-QqQ-MS)(API),快速測(cè)定盾葉薯蕷中偽原薯蕷皂苷的含量,按如下步驟進(jìn)行:
1)對(duì)照品、內(nèi)標(biāo)溶液制備:稱取偽原薯蕷皂苷對(duì)照品及甘草次酸對(duì)照品各5.0mg分別置于5mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,配制成濃度為1mg/mL的儲(chǔ)備液,4℃保存?zhèn)溆茫?/p>
2)供試品溶液制備:取盾葉薯蕷干燥根莖粉末1g精密稱定,加入甲醇25mL, 42kHz超聲波處理30min,5000r·min-1離心5min后,上清液過(guò)0.45μm微孔濾膜, 濾液即HPLC-QqQ-MS法測(cè)定用的供試溶液;
3)測(cè)定:分別精密吸取步驟1)得到的對(duì)照品溶液和步驟2)提取的供試品溶液各10μL,注入HPLC-MS/MS聯(lián)用儀,測(cè)定,多級(jí)反應(yīng)檢測(cè)模式進(jìn)行掃描,用外標(biāo)法計(jì)算偽原薯蕷皂苷含量;
4)色譜及質(zhì)譜條件 色譜柱:SHIMADZU GL Inertsil ODS-3 C18柱,流動(dòng)相:乙腈:水(70:30),等度洗脫:8min,進(jìn)樣量:10μL,柱溫:40℃,流速0.5mL/min,掃描方式為多級(jí)反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式,離子源ESI(Turbo Spray)負(fù)離子化方式檢測(cè),離子源電壓為5.5kV,加熱毛細(xì)管溫度為400℃,CAD為5,簾氣為10,Gas1為45,Gas2為45,去簇電壓為-114V。
2.如權(quán)利要求1所述,其特征在于,所述液相色譜條件,色譜柱:SHIMADZU GL Inertsil ODS-3 C18柱,流動(dòng)相:乙腈:水(70:30),等度洗脫:8min,進(jìn)樣量:10μL,柱溫:40℃,流速0.5mL/min。
3.如權(quán)利要求1所述,其特征在于質(zhì)譜條件為離子源ESI(Turbo Spray)源,負(fù)離子化方式檢測(cè),離子源電壓為5.5kV,加熱毛細(xì)管溫度為400℃,CAD為5,簾氣為10,Gas1為45,Gas2為45,去簇電壓為-114V。
4.如權(quán)利要求1所述,其特征在于甘草次酸為外標(biāo)測(cè)定偽原薯蕷皂苷含量。
5.如權(quán)利要求1所述,其特征在于多級(jí)反應(yīng)檢測(cè)模式(MRM)及其參數(shù)設(shè)立偽原薯蕷皂苷碰撞能量-60eV,離子反應(yīng)選擇1029.3→883.1m/z;甘草次酸碰撞能量-60eV,離子反應(yīng)選擇469.3→425.3 m/z。