1.一種9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪及其雜質(zhì)的分離測定方法,其特征在于,包括以下步驟:
稱取待測9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪原料藥適量,加入體積比為40~90:10~60的醋酸銨緩沖液-甲醇進(jìn)行溶解,制成濃度為0.5~1.5mg/mL的溶液,作為供試品溶液;
照高效液相色譜法,以反相色譜柱為色譜柱,以體積比為40~90:10~60的醋酸銨緩沖液-甲醇為流動相,流速為0.5~1.5mL/min,檢測波長為270~290nm,柱溫為20~35℃;
取所述供試品溶液5~15μL,注入高效液相色譜儀,測定。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪及其雜質(zhì)的分離測定方法,其特征在于,以體積比為50~75:25~50的醋酸銨緩沖液-甲醇為流動相。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪及其雜質(zhì)的分離測定方法,其特征在于,
以體積比為70:30的醋酸銨緩沖液-甲醇為流動相;或者
以體積比為50:50的醋酸銨緩沖液-甲醇為流動相;或者
以體積比為75:25的醋酸銨緩沖液-甲醇為流動相。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪及其雜質(zhì)的分離測定方法,其特征在于,所述醋酸銨緩沖液的濃度為40~60mM、pH值為4~5;優(yōu)選地,所述醋酸銨緩沖液的濃度為50mM、pH值為4.5。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4所述的9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪及其雜質(zhì)的分離測定方法,其特征在于,所述反相色譜柱的填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠;優(yōu)選地,所述反相色譜柱的填充劑為粒徑5μm的十八烷基硅烷鍵合硅膠。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪及其雜質(zhì)的分離測定方法,其特征在于,所述反相色譜柱為5μm、4.6×150mm的Sunfire C18反相色譜柱。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項所述的9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪及其雜質(zhì)的分離測定方法,其特征在于,包括以下步驟:
稱取待測9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪原料藥適量,加入體積比為70:30的醋酸銨緩沖液-甲醇進(jìn)行溶解,制成濃度為1mg/mL的溶液,作為供試品溶液;
照高效液相色譜法,以5μm、4.6×150mm的Sunfire C18反相色譜柱為色譜柱,以體積比為70:30的醋酸銨緩沖液-甲醇為流動相,流速為1mL/min,檢測波長為280nm,柱溫為25℃;所述醋酸銨緩沖液的濃度為50mM、pH值為4.5;
取所述供試品溶液10μL,注入高效液相色譜儀,測定;或者
稱取待測9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪原料藥適量,加入體積比為50:50的醋酸銨緩沖液-甲醇進(jìn)行溶解,制成濃度為1.0mg/mL的溶液,作為供試品溶液;
照高效液相色譜法,以5μm、4.6×150mm的Sunfire C18反相色譜柱為色譜柱,以體積比為50:50的醋酸銨緩沖液-甲醇為流動相,流速為1mL/min,檢測波長為280nm,柱溫為25℃;所述醋酸銨緩沖液的濃度為50mM、pH值為4.5;
取所述供試品溶液10μL,注入高效液相色譜儀,測定;或者
稱取待測9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪原料藥適量,加入體積比為75:25的醋酸銨緩沖液-甲醇進(jìn)行溶解,制成濃度為1mg/mL的溶液,作為供試品溶液;
照高效液相色譜法,以5μm、4.6×150mm的Sunfire C18反相色譜柱為色譜柱,以體積比為75:25的醋酸銨緩沖液-甲醇為流動相,流速為1mL/min,檢測波長為280nm,柱溫為25℃;所述醋酸銨緩沖液的濃度為50mM、pH值為4.5;
取所述供試品溶液10μL,注入高效液相色譜儀,測定。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項所述的9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪及其雜質(zhì)的分離測定方法,其特征在于,還包括如下9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪對照品溶液、α-二氫丁苯那嗪對照品溶液、N-甲基苯胺對照品溶液的制備和測定的步驟:
取9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪的對照品適量,制成濃度為0.5~1.5mg/mL的溶液,作為9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪對照品溶液;
取α-二氫丁苯那嗪的對照品適量,制成濃度為0.5~1.5mg/mL的溶液,作為α-二氫丁苯那嗪對照品溶液;
取N-甲基苯胺的對照品適量,制成濃度為0.5~1.5mg/mL的溶液,作為N-甲基苯胺對照品溶液;
分別取所述9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪對照品溶液、所述α-二氫丁苯那嗪對照品溶液和所述N-甲基苯胺對照品溶液各5~15μL,注入高效液相色譜儀,測定。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪及其雜質(zhì)的分離測定方法,其特征在于,還包括如下9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪對照品溶液、α-二氫丁苯那嗪對照品溶液、N-甲基苯胺對照品溶液的制備和測定的步驟:
取9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪的對照品適量,制成濃度為1mg/mL的溶液,作為9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪對照品溶液;
取α-二氫丁苯那嗪的對照品適量,制成濃度為1mg/mL的溶液,作為α-二氫丁苯那嗪對照品溶液;
取N-甲基苯胺的對照品適量,制成濃度為1mg/mL的溶液,作為N-甲基苯胺對照品溶液;
分別取所述9-去甲基-α-二氫丁苯那嗪對照品溶液、所述α-二氫丁苯那嗪對照品溶液和所述N-甲基苯胺對照品溶液各10μL,注入高效液相色譜儀,測定。