1.一種快速診斷神經(jīng)元特異性烯醇化酶試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒包含神經(jīng)元特異性烯醇化酶標(biāo)準(zhǔn)品、反應(yīng)緩沖液、清洗液、脂質(zhì)體復(fù)合物、磁性分離試劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的神經(jīng)元特異性烯醇化酶試劑盒，其特征在于，所述的脂質(zhì)體復(fù)合物為內(nèi)部包裹有聯(lián)吡啶釕Ru(bpy)32+和納米金粒子復(fù)合物，表面包被有抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體，所述的納米金粒子為粒徑在2～50nm的類球形納米金。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的神經(jīng)元特異性烯醇化酶試劑盒，其特征在于，所述的磁性分離試劑由生物素化合的抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體和鏈霉親和素包被的磁性微粒制備而成。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的神經(jīng)元特異性烯醇化酶試劑盒，其特征在于，所述的脂質(zhì)體復(fù)合物的制備包括以下步驟：
(1)按質(zhì)量比為(4～10):1的比例分別取Ru(bpy)32+和納米金粒子，利用靜電吸附作用，將帶正電荷的Ru(bpy)32+吸附于帶負(fù)電荷的納米金粒子上，制得Ru(bpy)32+和納米金粒子復(fù)合物；
(2)將Ru(bpy)32+和納米金粒子復(fù)合物溶于Tris緩沖溶液中，制成質(zhì)量濃度為2％的溶液，所述的Tris-HCl緩沖溶液含有10mM三羥甲基氨基甲烷和15mM氯化鈉，pH為7.2；
(3)取二硬脂酰磷脂酰膽堿、膽固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺，混合，溶于5mL的氯仿中，超聲處理5min，然后在28℃，0.1MPa的條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，除去氯仿，靜置30min，然后加入1mL Ru(bpy)32+和納米金粒子復(fù)合物溶液，在60℃水浴中振蕩反應(yīng)約1h，得脂質(zhì)體懸浮液，將脂質(zhì)體懸浮液超聲處理3min，然后使用注射器式濾器調(diào)整脂質(zhì)體的粒徑至90～100nm，得到內(nèi)部包裹有Ru(bpy)32+和納米金粒子復(fù)合物的脂質(zhì)體；
(4)取1mL內(nèi)部包裹有Ru(bpy)32+和納米金粒子復(fù)合物的脂質(zhì)體與1mL質(zhì)量濃度為2％的1,5-戊二醛溶液混合，室溫下反應(yīng)2h，然后用10mM pH 7.2的PBS溶液進(jìn)行透析12～24h，以除去多余的1,5-戊二醛，然后在4℃下，加入抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體，所述抗體在體系中的終濃度為10μg/mL，孵育12h，加入2％(w/v)BSA，繼續(xù)孵育12h，以阻斷脂質(zhì)體表面上的非特異性位點(diǎn)，將得到的脂質(zhì)體復(fù)合物置于4℃保存，即得；
其中，所述步驟(3)中二硬脂酰磷脂酰膽堿、膽固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺的摩爾比為20:10:4。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的神經(jīng)元特異性烯醇化酶試劑盒，其特征在于，所述的生物素化合的抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體的制備包括以下步驟：取抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體溶于pH為7.2的PBS緩沖液中，制成濃度為1.0～2.0mg/mL的溶液；另取EZ-Link Sulfo-NHS-LC-biotin溶于pH為7.2的PBS緩沖液中，制成濃度為10～50mM的溶液；然后取1mL濃度為1.0～2.0mg/mL的抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體溶液與25μL的濃度為10～50mM的EZ-Link Sulfo-NHS-LC-biotin溶液混合，置于室溫中反應(yīng)1～2h，再使用PD-10的凝膠過濾器進(jìn)行過濾，即得生物素化合的抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的神經(jīng)元特異性烯醇化酶試劑盒，其特征在于，所述的鏈霉親和素包被的磁性微粒的制備包括以下步驟：取0.5mg金磁微粒，磁性分離棄上清，加入150～200μg鏈霉親和素，加入0.1mol/L pH為7.4的Tris-HCl緩沖液0.5mL，置振蕩器中室溫條件下反應(yīng)1～2h，去上清，用含1mmol/L EDTA且濃度為0.1mol/L、pH為7.4的Tris-HCl清洗液反復(fù)清洗，制得鏈霉親和素包被的磁性微粒。
7.根據(jù)權(quán)利要求3、5、6任一所述的神經(jīng)元特異性烯醇化酶試劑盒，其特征在于，所述的磁性分離試劑的制備包括以下步驟：
取1mL生物素化合的抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體與200μg的鏈霉親和素包被的磁性微?；旌?，在室溫條件下，100r/min反應(yīng)1～2h，反應(yīng)結(jié)束后，磁性分離，去上清，加入pH為7.4的Tris-HCl緩沖液反復(fù)洗滌多次，然后加入1mL濃度為0.2～0.4mM的D-生物素水溶液，室溫下反應(yīng)30min，以充分阻斷未與生物素化合的抗神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗體結(jié)合的鏈霉親和素位點(diǎn)，反應(yīng)結(jié)束后，磁性分離，去上清，用pH為7.4的Tris-HCl緩沖液反復(fù)洗滌多次以除去多余的D-生物素，加入含2％(w/v)BSA、0.1％(v/v)吐溫-20、pH為7.2的PBS溶液復(fù)溶，即得磁性分離試劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的神經(jīng)元特異性烯醇化酶試劑盒，其特征在于，所述的反應(yīng)緩沖液的組成為：0.1mol/L三丙胺、0.1mol/L磷酸二氫鉀、0.1mol/L氯化鈉、0.1％(v/v)吐溫-20、1％(v/v)Triton X-100，pH為7.0～7.2；
所述的清洗液為含0.1％(v/v)吐溫-20、0.1mol/L氯化鈉，且濃度為0.05mol/L、pH為7.2的磷酸鹽緩沖溶液。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的神經(jīng)元特異性烯醇化酶試劑盒，其特征在于，所述的神經(jīng)元特異性烯醇化酶標(biāo)準(zhǔn)品的制備包括以下步驟：使用含0.1mol/L磷酸二氫鉀、0.1mol/L氯化鈉、2％(w/v)BSA、0.1％(v/v)吐溫-20的溶液將神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗原配制成濃度分別為5，25，75，150，300，600ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)液，即得。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一所述的神經(jīng)元特異性烯醇化酶試劑盒的使用方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)使用含2％(w/v)BSA的PBS緩沖液將脂質(zhì)體復(fù)合物按1:5的比例進(jìn)行稀釋；
(2)取25μL稀釋后的脂質(zhì)體復(fù)合物、25μL磁性分離試劑、50μL待測樣本或神經(jīng)元特異性烯醇化酶標(biāo)準(zhǔn)品，混合，在室溫條件下渦旋1h，充分反應(yīng)，形成磁性微粒-抗原-脂質(zhì)體復(fù)合物，將反應(yīng)液吸入電化學(xué)反應(yīng)池中，所述的磁性微粒-抗原-脂質(zhì)體復(fù)合物通過磁性吸附于電極表面，加入100μL清洗液輕輕潤洗電極表面3次，去清洗液，然后加入500μL反應(yīng)緩沖液，使脂質(zhì)體內(nèi)聯(lián)吡啶釕Ru(bpy)32+和納米金粒子復(fù)合物溶出，溶出的聯(lián)吡啶釕Ru(bpy)32+和納米金粒子復(fù)合物通過磁性再次吸附于電極表面，電化學(xué)工作站通電，啟動ECL反應(yīng)，通過光電倍增管收集電化學(xué)發(fā)光信號；
(3)測定梯度濃度的神經(jīng)元特異性烯醇化酶標(biāo)準(zhǔn)液的發(fā)光強(qiáng)度變化值，根據(jù)發(fā)光強(qiáng)度變化值對數(shù)與相應(yīng)的濃度對數(shù)繪制反應(yīng)曲線，計算待測標(biāo)本中神經(jīng)元特異性烯醇化酶的濃度。