1.一種HPLC檢測醋酸去氨加壓素有關(guān)物質(zhì)的方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)取醋酸去氨加壓素標(biāo)準(zhǔn)品采用水制備醋酸去氨加壓素標(biāo)準(zhǔn)溶液,取醋酸去氨加壓素各已知雜質(zhì)對(duì)照品采用水制備醋酸去氨加壓素雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液;
(2)取待測樣品采用水制備待測樣品溶液;
(3)系統(tǒng)適用性試驗(yàn):取醋酸去氨加壓素適量,精密稱定,加水溶解并稀釋制成每1mL中含醋酸去氨加壓素0.5mg的溶液作為供試品溶液;精密量取供試品溶液1.0mL置100mL量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,配制成系統(tǒng)適用性溶液,取系統(tǒng)適用性溶液進(jìn)樣20μL,醋酸去氨加壓素峰與各雜質(zhì)峰分離度R>1.5;
(4)檢測限試驗(yàn):取醋酸去氨加壓素已知雜質(zhì),精密稱定,加水溶解并稀釋制成0.1~0.15 ng/μL的稀溶液,依次改變進(jìn)樣量,當(dāng)信噪比(S/N)約為3∶1時(shí)樣品的量為檢測限;
(5)取步驟(2)配制的待測樣品溶液10~20μL注入液相色譜儀,流動(dòng)相流速為0.6~1.0mL/min,檢測波長為:210nm;檢測器:DAD;柱溫:33~37℃;
所述流動(dòng)相包括A相和B相,A相為乙酸-水;B相:乙酸-乙腈;所述的A相中乙酸與水的體積比為0.1:100;B相中的乙酸與乙腈的體積比為0.1:100;A相與B相的體積比為78:22;
采用步驟(5)檢測條件測定步驟(1)配置的標(biāo)準(zhǔn)溶液或混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,能都達(dá)到有效分離;
所述的醋酸去氨加壓素結(jié)構(gòu)式為:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC檢測醋酸去氨加壓素有關(guān)物質(zhì)的方法,其特征在于:步驟(1)所述醋酸去氨加壓素標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為0.5~1.0 mg/mL;混合標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度為0.004~0.01mg/mL。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC檢測醋酸去氨加壓素有關(guān)物質(zhì)的方法,其特征在于:步驟(1)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法為,分別取醋酸去氨加壓素及其雜質(zhì)對(duì)照品適量,配制成0.5mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,分別取上述各標(biāo)準(zhǔn)品溶液100μL置于10mL容量瓶中,用水稀釋定容,得到濃度為5μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC檢測醋酸去氨加壓素有關(guān)物質(zhì)的方法,其特征在于:步驟(2)所述待測樣品溶液的質(zhì)量濃度為0.3~0.8mg/mL。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC檢測醋酸去氨加壓素有關(guān)物質(zhì)的方法,其特征在于:步驟(1)和步驟(2)所述標(biāo)準(zhǔn)溶液、混合溶液和待測樣品溶液注入液相色譜儀之前通過孔僅為0.2~0.4μm的過濾膜過濾。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC檢測醋酸去氨加壓素有關(guān)物質(zhì)的方法,其特征在于:步驟(5)中所使用的色譜柱型號(hào)為Diamonsil,柱長250mm,直徑4.6mm,孔徑5μm,填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠,粒徑100A。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的HPLC檢測醋酸去氨加壓素有關(guān)物質(zhì)的方法,其特征在于:步驟(1)所述的醋酸去氨加壓素雜質(zhì)包括已知雜質(zhì)和未知雜質(zhì),未知雜質(zhì)即合成過程中產(chǎn)生的副產(chǎn)物、中間體和降解產(chǎn)物,已知雜質(zhì)見下表: