本實(shí)用新型涉及生物實(shí)驗(yàn)設(shè)備技術(shù)領(lǐng)域,尤其是一種變性梯度凝膠電泳洗膠槽。
背景技術(shù):
變性梯度凝膠電泳(DGGE)技術(shù)是目前研究微生物群落結(jié)構(gòu)的主要分子生物學(xué)方法之一,對(duì)其膠的染色主要采用溴化乙錠(EB)或SYBR Green I核酸染料,而由于EB具有高致癌性,所以采用SYBR Green I核酸染料安全性較高。當(dāng)采用SYBR Green I核酸染料電泳檢測(cè)DNA時(shí)可進(jìn)行預(yù)染(預(yù)染方法主要為點(diǎn)染法或膠染法),也可電泳后再進(jìn)行染色。而預(yù)染電泳時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng),電泳時(shí)間不能超過(guò)2 h,否則SYBR Green I會(huì)從DNA上分離出來(lái),產(chǎn)生彌散狀條帶;且預(yù)染的兩種方法使用SYBR Green I核酸染料過(guò)多,不易大批量試驗(yàn)。所以膠跑完電泳后再進(jìn)行染色是最為經(jīng)濟(jì)的方法,而當(dāng)前變性梯度凝膠電泳儀器未配套相關(guān)的洗膠槽,或僅是配套簡(jiǎn)易的玻璃、塑料盒子當(dāng)洗膠槽。這些洗膠槽存在諸多問(wèn)題,如:
(1)洗膠槽較為簡(jiǎn)易,如圖1所示,其材料往往為玻璃或非聚丙烯材料,這些材料和SYBR Green I具有親和力,在洗膠時(shí)易造成SYBR Green I活性的下降,從而降低膠中DNA的染色效果。
(2)目前洗膠槽往往為透明材料,在洗膠時(shí)易造成膠中DNA和SYBR Green I活性的降解。
(3)由于DGGE膠為透明色且厚度很薄一般小于0.3 mm,染色結(jié)束后將膠槽中的染色劑倒出回收較為困難,且洗脫膠時(shí)也容易將膠倒出,從而造成膠破裂,影響成像和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本實(shí)用新型針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足,提出一種變性梯度凝膠電泳洗膠槽,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,使用效果好。
為了實(shí)現(xiàn)上述實(shí)用新型目的,本實(shí)用新型提供以下技術(shù)方案:一種變性梯度凝膠電泳洗膠槽,包括密封蓋、密封圈、半透明聚丙烯盒和不透明聚丙烯盒,密封蓋經(jīng)密封圈與不透明聚丙烯盒密封扣合,半透明聚丙烯盒為梯形結(jié)構(gòu),大端朝上敞開,小端為設(shè)有小孔的盒底;半透明聚丙烯盒上端架設(shè)在不透明聚丙烯盒上。
進(jìn)一步地,不透明聚丙烯盒側(cè)壁上設(shè)有排液孔。
進(jìn)一步地,小孔處設(shè)有配套的密封塞。
進(jìn)一步地,不透明聚丙烯盒由外層與內(nèi)層緊密接合構(gòu)成,外層含有黑色的聚丙烯,內(nèi)層為半透明聚丙烯層。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本實(shí)用新型具有以下優(yōu)點(diǎn):比傳統(tǒng)DGGE洗膠槽更為高效,在膠染色和脫色時(shí)確保完全隔光,且不會(huì)造成染色劑的失活,并且洗膠和染色劑的回收更為方便。
附圖說(shuō)明
圖1為現(xiàn)有技術(shù)中洗膠槽的結(jié)構(gòu)示意圖;
圖2為本實(shí)用新型洗膠槽的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行詳細(xì)描述,本部分的描述僅是示范性和解釋性,不應(yīng)對(duì)本實(shí)用新型的保護(hù)范圍有任何的限制作用。
如圖2所示,一種變性梯度凝膠電泳洗膠槽(簡(jiǎn)稱為DGGE洗膠槽),包括密封蓋A、密封圈、一個(gè)半透明的聚丙烯盒B、一個(gè)黑色不透明的聚丙烯盒C、軟管一根E、圓形塞子D一個(gè)。其中半透明的聚丙烯盒B為梯形,為倒置設(shè)置,大端敞口朝上,尺寸為40*30 cm,小端為封底,尺寸為25*35 cm,高為8 cm,封底上有一個(gè)直徑1 cm的小孔,小孔上可以塞圓形橡膠塞子D,確保液體不會(huì)流出。
黑色不透明的聚丙烯盒C為40*30*15的長(zhǎng)方體盒子,為了確保染料不被污染,黑色不透明的聚丙烯盒C為兩層,外層加入黑色的聚丙烯,內(nèi)層為半透明聚丙烯,兩層緊密接合;并在側(cè)面距離底邊和一個(gè)側(cè)邊均1cm處連接1個(gè)直徑1cm,壁厚0.3 cm,長(zhǎng)3 cm的聚丙烯硬管,硬管與盒子C為無(wú)縫連接。硬管上有螺紋,以確保軟管E套在硬管上不漏水。軟管E具體長(zhǎng)度為20 cm為宜。
密封蓋A內(nèi)帶有密封圈,其材料和內(nèi)外夾層同黑色不透明的聚丙烯盒C,確??梢詣偤每ㄔ谔菪蔚暮凶由?,梯形的盒子B上端剛好可以卡在正方體的盒子C上。
先將軟管E套在聚丙烯盒C的硬管處然后用夾子夾住以防漏水,再將塞子D塞在聚丙烯盒B的小孔處。全部完成后將去離子水倒入聚丙烯盒B晃動(dòng)30 s,檢查是否漏水,如不漏水,將塞子D拔下,水流入聚丙烯盒C,此時(shí)檢查軟管E和聚丙烯盒C的硬管連接處是否漏水,全部檢查完畢確定不漏水后將軟管上夾子打開,傾斜盒體放出去離子水。膠染色時(shí)將加過(guò)SYBR Green I染料的去離子水倒入已塞好塞子D的聚丙烯盒B,加250ml左右,余下的250 ml沖洗膠至聚丙烯盒B中,然后將聚丙烯盒B套入聚丙烯盒C中,蓋好帶密封圈的密封蓋A,搖床染色20 min左右,取下洗膠槽,打開密封蓋A,戴一次性手套伸入聚丙烯盒B底部拔下塞子,待染色液全部流入聚丙烯盒C,此時(shí)如需要回收可將軟管E上的夾子打開回收染色液至棕瓶中,如不需要回收染色液,將染色液流入廢液缸,流凈后用夾子夾住軟管E,蓋好塞子D,將去離子水倒入聚丙烯盒B,搖床脫色20 min左右,按照染色后的操作步驟脫色3次。
以上所述僅是本實(shí)用新型的優(yōu)選實(shí)施方式,應(yīng)當(dāng)指出,對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō),在不脫離本實(shí)用新型原理的前提下,還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾,這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本實(shí)用新型的保護(hù)范圍。