本實用新型涉及醫(yī)療
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別是涉及一種快速檢測抗原抗體反應(yīng)的試紙條。
背景技術(shù)：
：目前，免疫學(xué)檢驗技術(shù)主要包括酶免疫技術(shù)，熒光免疫技術(shù)，放射免疫技術(shù)，化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)，免疫濁度技術(shù)，膠體金技術(shù)等。但是，傳統(tǒng)的檢測技術(shù)一般都需要比較長的時間才會出結(jié)果，例如酶聯(lián)免疫吸附試驗，從包被、封閉、一抗反應(yīng)、二抗反應(yīng)、顯色到出結(jié)果最快也需要3個小時，導(dǎo)致病人等待結(jié)果時間長，耽誤病人及時就醫(yī)，影響疾病診治情況。免疫層析法是近幾年興起的一種快速診斷技術(shù)，其原理是將特異的抗體先固定于硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜的某一區(qū)帶，當(dāng)干燥的纖維素一端浸入樣品后，由于毛細管作用，樣品沿著該膜向前移動，當(dāng)移動至固定有抗體的區(qū)域時，樣品中相應(yīng)的抗原即與該抗體發(fā)生特異性結(jié)合，形成肉眼可見的檢測帶，根據(jù)該原理制成的免疫層析試紙條也越來越被廣泛應(yīng)用到醫(yī)療檢測領(lǐng)域，如膠體金試條。盡管現(xiàn)有的膠體金試紙條相比傳統(tǒng)的免疫學(xué)檢驗技術(shù)，檢測時間短，并且能夠同時對大批量的檢測樣本進行檢測，明顯縮短檢測時間。但現(xiàn)有的膠體金試紙條測試物種比較單一，只能用于檢測某一特定物種的抗原-抗體反應(yīng)，不能廣泛應(yīng)地用到不同的物種中。因此，在面對不同物種的抗原-抗體反應(yīng)的檢測時，需要重新制備相應(yīng)的膠體金試紙條，而從膠體金顆粒制備、劃膜、標(biāo)記、樣品墊制備到樣本的測試最快也需要一天的時間，這樣一來，嚴重影響了試驗的進度，拖慢了試驗的進程。技術(shù)實現(xiàn)要素：鑒于此，本實用新型目的在于提供一種快速檢測抗原-抗體反應(yīng)的試紙條，該試紙條能夠用于檢測不同物種的抗原-抗體反應(yīng)，并且操作簡便、檢測時間短、特異性強。本實用新型提供了一種快速檢測抗原-抗體反應(yīng)的試紙條，包括底板，所述底板上依次設(shè)置有樣品墊，金標(biāo)墊，層析膜，吸水紙；所述金標(biāo)墊擔(dān)載有膠體金標(biāo)記的免疫蛋白；所述免疫蛋白為G蛋白或A蛋白。優(yōu)選地，所述層析膜上還設(shè)置有控制帶C線；所述控制帶C線劃有鼠IgG抗體或鼠IgA抗體。優(yōu)選地，底板為半硬質(zhì)塑料、硬質(zhì)塑料或硬紙片中的一種。更優(yōu)選地，半硬質(zhì)塑料為PVC。優(yōu)選地，樣品墊為玻璃纖維膜或聚酯膜。更優(yōu)選地，樣品墊為玻璃纖維膜。優(yōu)選地，金標(biāo)墊的材質(zhì)為玻璃纖維。優(yōu)選地，層析膜的材質(zhì)為硝酸纖維素。本實用新型提供的快速檢測抗原抗體反應(yīng)的試紙條的寬度為3～4mm，優(yōu)選地，檢測試條的寬度為4mm。本實用新型提供一種快速檢測抗原-抗體反應(yīng)的試紙條，包括底板，所述底板上依次設(shè)置有樣品墊，金標(biāo)墊，層析膜，吸水紙；所述金標(biāo)墊擔(dān)載有膠體金標(biāo)記的免疫蛋白；所述免疫蛋白為G蛋白或A蛋白。本實用新型提供的快速檢測抗原抗體反應(yīng)的試紙條能夠用于檢測不同物種的抗原抗體反應(yīng)，并且操作簡便、檢測時間短、特異性強。附圖說明為了更清楚地說明本實用新型實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本實用新型的實施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)提供的附圖獲得其他的附圖。圖1為本實用新型實施例提供的快速檢測抗原-抗體反應(yīng)的試紙條的結(jié)構(gòu)示意圖；其中，1示底板，2示樣品墊，3示金標(biāo)墊，4示層析膜，5示吸水紙，6示檢測帶C線；圖2為小鼠陽性CRP雜交瘤細胞培養(yǎng)液上清的檢測結(jié)果；其中，圖2A為實施例1試條的檢測結(jié)果，圖2B為實施例2試條的檢測結(jié)果，圖2C為對比例1試條的檢測結(jié)果；圖3為小鼠陽性CYS-C雜交瘤細胞培養(yǎng)液上清的檢測結(jié)果；其中，圖3A為實施例1試條的檢測結(jié)果，圖3B為實施例2試條的檢測結(jié)果，圖3C為對比例1試條的檢測結(jié)果；圖4為小鼠陽性β2-MG雜交瘤細胞培養(yǎng)液上清的檢測結(jié)果；其中，圖4A為實施例1試條的檢測結(jié)果，圖4B為實施例2試條的檢測結(jié)果，圖4C為對比例1試條的檢測結(jié)果；圖5為不同物種乙肝重組抗原-抗體反應(yīng)的檢測結(jié)果；其中，圖5A為實施例1試條的檢測結(jié)果，圖5B為實施例2試條的檢測結(jié)果，圖5C為對比例1試條的檢測結(jié)果。具體實施方式為了使本領(lǐng)域技術(shù)人員更好地理解本實用新型的技術(shù)方案，下面結(jié)合附圖和具體實施方式對本實用新型進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本實用新型一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本實用新型中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本實用新型保護的范圍。本實用新型提供的快速檢測抗原-抗體反應(yīng)的試紙條的制備過程中采用的儀器、試劑皆為普通市售品，皆可于市場購得。下面結(jié)合實施例和附圖，進一步闡述本實用新型：參見圖1，本實用新型實施例1～2提供的胰島素檢測試條，包括底板1，所述底板1上依次設(shè)置有樣品墊2，金標(biāo)墊3，層析膜4，吸水紙5；所述金標(biāo)墊5擔(dān)載有膠體金標(biāo)記的免疫蛋白；所述免疫蛋白為G蛋白或A蛋白。其中，層析膜4上還設(shè)置有C線；所述C線劃有鼠IgG抗體或鼠IgA抗體。實施例1金標(biāo)墊的制備和標(biāo)記：洗凈1L的錐形瓶，放入可以加熱的磁力攪拌器上，精確量取0.5L超純水，加熱至剛好沸騰，加入1％氯金酸溶液5ml，混勻1min，加入1％檸檬酸三鈉9ml，反應(yīng)10min.冷卻至室溫，定容到0.5L待使用。取2ml金溶液加入0.1M碳酸鉀溶液20ul，充分混合均勻，取蛋白G用量20ug，混合均勻，靜止反應(yīng)5min，加入10％BSA的20ul，混合均勻，10000rpm，4℃，離心10min，去掉上清，加入1ml金懸浮液(PH值8.5的0.02MTRIS+0.75％Tween-20+3％蔗糖+0.75％PEG20000+1.2％酪蛋白)，鋪至0.8cmX30cm的玻璃纖維上，37℃烘干2h。層析膜的制備：取鼠IgG抗體(購自杭州隆基生物)，用0.01mol/L的PB+3％海藻糖將鼠IgG抗體稀釋成0.5mg/mL，使用量為35μL/30cm，用劃膜儀劃膜至硝酸纖維素膜(HFNC135膜Milipore)上，42℃反應(yīng)2h，得到檢測帶C線。樣品墊的處理：配制樣品墊處理液(0.02MPB+0.05％酪蛋白+3％蔗糖+0.5％Tween-20，pH7.4)5ml,鋪至2.8cmX30cm玻璃纖維上，以每5ml鋪3cmX30cm的量鋪，靜止反應(yīng)10min,瀝干，37℃烘干過夜，在濕度30％以下包裝，封口，備用。試紙條的組裝：將樣品墊，金標(biāo)墊，劃好的層析膜，以及吸水紙依次貼到PVC底板上，均勻切成4.0mm寬的膜條。實施例2金標(biāo)墊的制備和標(biāo)記：洗凈1L的錐形瓶，放入可以加熱的磁力攪拌器上，精確量取0.5L超純水，加熱至剛好沸騰，加入1％氯金酸溶液5ml，混勻1min，加入1％檸檬酸三鈉9ml，反應(yīng)10min.冷卻至室溫，定容到0.5L待使用。取2ml金溶液加入0.1M碳酸鉀溶液20ul，充分混合均勻，取蛋白A用量20ug，混合均勻，靜止反應(yīng)5min，加入10％BSA的20ul，混合均勻，10000rpm，4℃，離心10min，去掉上清，加入1ml金懸浮液(PH值8.5的0.02MTRIS+0.75％Tween-20+3％蔗糖+0.75％PEG20000+1.2％酪蛋白)，鋪至0.8cmX30cm的玻璃纖維上，37℃烘干2h。層析膜的制備：取鼠IgG抗體(購自杭州隆基生物)，用0.01mol/L的PB+3％海藻糖將鼠IgA抗體稀釋成0.5mg/mL，使用量為35μL/30cm，用劃膜儀劃膜至硝酸纖維素膜(HFNC135膜Milipore)上，42℃反應(yīng)2h，作為C線。樣品墊的處理：配制樣品墊處理液(0.02MPB+0.05％酪蛋白+3％蔗糖+0.5％Tween-20，pH7.4)5ml,鋪至2.8cmX30cm玻璃纖維上，以每5ml鋪3cmX30cm的量鋪，靜止反應(yīng)10min,瀝干，37℃烘干過夜，在濕度30％以下包裝，封口，備用。試紙條的組裝：將樣品墊，金標(biāo)墊，劃好的層析膜，以及吸水紙依次貼到PVC底板上，均勻切成4.0mm寬的膜條。對比例1金標(biāo)墊的制備和標(biāo)記：洗凈1L的錐形瓶，放入可以加熱的磁力攪拌器上，精確量取0.5L超純水，加熱至剛好沸騰，加入1％氯金酸溶液5ml，混勻1min，加入1％檸檬酸三鈉9ml，反應(yīng)10min.冷卻至室溫，定容到0.5L待使用。取2ml金溶液加入0.1M碳酸鉀溶液20ul，充分混合均勻，取羊抗鼠IgG(購自長沙博優(yōu))，混合均勻，靜止反應(yīng)5min，加入10％BSA的20ul，混合均勻，10000rpm，4℃，離心10min，去掉上清，加入1ml金懸浮液(PH值8.5的0.02MTRIS+0.75％Tween-20+3％蔗糖+0.75％PEG20000+1.2％酪蛋白)，鋪至0.8cmX30cm的玻璃纖維上，37℃烘干2h。層析膜的制備：取鼠IgG抗體(購自杭州隆基生物)，用0.01mol/L的PB+3％海藻糖將鼠IgG抗體稀釋成0.5mg/mL，使用量為35μL/30cm，用劃膜儀劃膜至硝酸纖維素膜(HFNC135膜Milipore)上，42℃反應(yīng)2h，作為C線。樣品墊的處理：配制樣品墊處理液(0.02MPB+0.05％酪蛋白+3％蔗糖+0.5％Tween-20，pH7.4)5ml,鋪至2.8cmX30cm玻璃纖維上，以每5ml鋪3cmX30cm的量鋪，靜止反應(yīng)10min,瀝干，37℃烘干過夜，在濕度30％以下包裝，封口，備用。試紙條的組裝：將樣品墊，金標(biāo)墊，劃好的層析膜，以及吸水紙依次貼到PVC底板上，均勻切成4.0mm寬的膜條。實施例3試紙條的性能檢測試驗(一)將CRP抗原(桂林英美特)0.5mg/ml(TRIS8.0+2％蔗糖)混合均勻，將實施例1～2和對比例1的試條分別取4只為一組每只試條上點0.2ulCRP抗原，放入37℃烘箱中烘烤10min備用。將陽性CRP雜交瘤細胞培養(yǎng)液上清依次稀釋梯度為1：1、1:10、1:50、1:100，分別用實施例1～2和對比例1的試條進行檢測，5分鐘后獲得檢測結(jié)果，結(jié)果見表1和圖2A～2C。其中，圖2A為實施例1試條的檢測結(jié)果，圖2B為實施例2試條的檢測結(jié)果，圖2C為對比例1試條的檢測結(jié)果。表1CRP抗原抗體反應(yīng)的檢測(二)將CYS-C抗原(hytest)0.5mg/ml(TRIS8.0+2％蔗糖)混合均勻，將實施例1～2和對比例1的試條分別取4只為一組每只試條上點0.2ulCYS-C抗原，放入37℃烘箱中烘烤10min備用。將陽性CYS-C雜交瘤細胞培養(yǎng)液上清依次稀釋梯度為1、1:10、1:50、1:100，分別用實施例1～2和對比例1的試條進行檢測，5分鐘后獲得檢測結(jié)果，結(jié)果見表2和圖3A～3C。其中，圖3A為實施例1試條的檢測結(jié)果，圖3B為實施例2試條的檢測結(jié)果，圖3C為對比例1試條的檢測結(jié)果。表2CYS-C抗原抗體反應(yīng)的檢測(三)將β2-MG抗原(桂林英美特)0.5mg/ml(TRIS8.0+2％蔗糖)混合均勻，將實施例1～2和對比例1的試條分別取4只為一組每只試條上點0.2ulβ2-MG抗原，放入37℃烘箱中烘烤10min備用。將陽性β2-MG雜交瘤細胞培養(yǎng)液上清依次稀釋梯度為1、1:10、1:50、1:100，分別用實施例1～2和對比例1的試條進行檢測，5分鐘后獲得檢測結(jié)果，結(jié)果見表3和圖4A～4C。其中，圖4A為實施例1試條的檢測結(jié)果，圖4B為實施例2試條的檢測結(jié)果，圖4C為對比例1試條的檢測結(jié)果。表3β2-MG抗原抗體反應(yīng)的檢測由表1～表3和圖2～圖4的試驗結(jié)果可知，本實用新型提供的試紙條和對比例1提供的試紙條均可用于小鼠細胞培養(yǎng)液上清中CRP、CYS-C、β2-MG的抗原抗體反應(yīng)的檢測，采用上述試紙條進行檢測時，操作簡便且檢測時間短。實施例4試紙條物種活性檢測將乙肝重組抗原(購自北京博生福)0.5mg/ml(TRIS8.0+2％蔗糖)混合均勻。將實施例1～2和對比例1的試條分別取出4只為一組，每兩只分別點上乙肝重組抗原0.2ul，放入37℃烘箱中烘烤10min備用。將其反應(yīng)相對應(yīng)的樣本：HBsAg陽性人血清稀釋1000倍、兔多抗1mg/ml稀釋1000倍、山羊多抗1mg/ml稀釋1000倍測試、鼠單抗1mg/ml稀釋1000倍進行測試。檢測結(jié)果如表4和圖5A～5C所示：表4物種人血清兔多抗山羊多抗鼠單抗實施例1++++++++實施例2++++++對比例1---++由表4和圖5的實驗結(jié)果可知，對比例提供的試紙條只能用于檢測單一物種中抗原-抗體的反應(yīng)，而本實用新型提供的快速檢測抗原-抗體反應(yīng)的試紙條能夠應(yīng)用于檢測不同物種(如人、兔、山羊、鼠)的乙肝重組抗原-抗體反應(yīng)，并且操作簡便、檢測時間短、特異性強。對所公開的實施例的上述說明，使本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)或使用本實用新型。對這些實施例的多種修改對本領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員來說將是顯而易見的，本文中所定義的一般原理可以在不脫離本實用新型的精神或范圍的情況下，在其它實施例中實現(xiàn)。因此，本實用新型將不會被限制于本文所示的這些實施例，而是要符合與本文所公開的原理和新穎特點相一致的最寬的范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3