本發(fā)明涉及生物檢測
技術領域：
，尤其涉及一種農(nóng)產(chǎn)品藥物殘留膠體金檢測試劑盒。
背景技術：
：農(nóng)藥殘留(pesticideresidues)是指農(nóng)藥使用后一個時期內沒有被完全分解而殘留在生物體、收獲物、農(nóng)藥殘留土壤、水體、大氣中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質的總稱。農(nóng)藥殘留問題隨著農(nóng)藥的大量生產(chǎn)和廣泛使用而產(chǎn)生，到目前為止，世界上化學農(nóng)藥年產(chǎn)量近200萬噸，約有1000多種人工合成化合物被用作殺蟲劑、殺菌劑、落葉劑等類農(nóng)藥，尤其是有機農(nóng)藥的大量施用，造成了嚴重的農(nóng)藥污染問題，殘留的農(nóng)藥進入糧食、蔬菜、水果、魚、蝦、肉、蛋等食品中，造成食物污染，對人體健康構成嚴重的威脅。目前，大多數(shù)國家和地區(qū)常常采用塑料薄膜、塑料保鮮膜或者塑膠材料包裝各類農(nóng)產(chǎn)品，這些塑料制品中含有塑化劑，其中，由于鄰苯二甲酸二癸酯是鄰苯二甲酸酯類(PAEs)物質可以讓硬塑膠變成有彈性的塑膠，被廣泛運用，研究表明，PAEs類物質在人體內能引起生殖系統(tǒng)異常，甚至導致胎兒畸形等重大疾病，其與農(nóng)藥殘留物一起使用不僅對食物造成雙重污染，對人體健康的威脅更成倍增長。由于目前測試農(nóng)藥殘留物和PAEs類物質需采用液相或氣質聯(lián)用色譜等操作復雜且維護價格高的大型儀器設備進行檢測，一方面這些儀器的開機和維護費用昂貴，不利于經(jīng)濟適用，另一方面，這些設備的檢測時間較長，不能及時給出結果。因此，亟需一種成本低、操作簡單、檢測速度快的器件。基于此，本發(fā)明提供一種農(nóng)產(chǎn)品藥物殘留膠體金檢測試劑盒。技術實現(xiàn)要素：針對上述現(xiàn)有技術存在的不足，本發(fā)明提供了一種農(nóng)產(chǎn)品藥物殘留膠體金檢測試劑盒，以解決上述技術問題。本發(fā)明通過以下技術方案實現(xiàn)：一種農(nóng)產(chǎn)品藥物殘留膠體金檢測試劑盒，包括盒體、蓋體和盒底座，蓋體位于盒體的頂部，盒底座設置于盒體的底部；所述盒底座上設置有多個放置孔，放置孔孔分別固設有檢測試紙、樣品瓶和檢測盤。優(yōu)選地，所述樣品瓶的內壁上設有刻度線。優(yōu)選地，所述檢測盤的內壁上設有檢測刻度線。優(yōu)選地，所述檢測試紙為鄰苯二甲酸二癸酯膠體金免疫層析檢測試紙。優(yōu)選地，所述鄰苯二甲酸二癸酯膠體金免疫層析檢測試紙包括樣品層、膠體金標記層、檢測反應層、吸水層和背襯；所述膠體金標記層上包被有鄰苯二甲酸二癸酯單克隆抗體-膠體金標記物和酶標記的抗有機磷特異性抗體，所述檢測反應層上設置有檢測線T和質控線C，檢測線T上包被有鄰苯二甲酸二癸酯-載體偶聯(lián)物的包被抗原；所述質控線C包被有兔抗鼠IgG和生物酶；所述檢測用金標抗體可以與檢測用包被抗原結合反應并顯色，且檢測用金標抗體上只有一個與抗原特異結合的位點；所述樣品層、膠體金標記層和檢測反應層按照從左至右、從上至下的順序依次結合在背襯板同一面上，所述膠體金標記層和檢測反應層的端部重疊；所述吸水層結合在檢測反應層的另一端。相對于現(xiàn)有技術，本發(fā)明的有益效果：該農(nóng)藥殘留膠體金檢測試劑盒放置、運輸方便，操作簡單，保存時間長，適用于現(xiàn)場檢測和大批量樣品的篩查。本發(fā)明具有特異性強；靈敏度高，達到9.63ng/ml，檢測速度快、通量大、操作簡單方便、顏色穩(wěn)定、檢測溫度適宜范圍寬、試紙保質期長和成本低廉等優(yōu)點，并能夠實現(xiàn)半定量檢測，適合于食品藥品、環(huán)保、檢驗檢疫等部門對樣品中的鄰苯二甲酸二癸酯進行快速檢測，本發(fā)明不需要配合大型儀器使用，很多實驗條件較差基層單位也可以輕松開展檢測，因此具有廣闊的市場前景和推廣意義。附圖說明圖1是本發(fā)明的結構示意圖。圖2是圖1中所示的檢測試紙的結構放大圖。其中：1-樣品層，2-膠體金標記層，3-檢測反應層，4-吸水層，7-背襯板，11-盒體，12-蓋體，13-盒底座，14-樣品瓶，17-檢測盤，18-檢測試紙，T1-第一檢測線，T2-第二檢測線，C1-第一質控線，C2-第二質控線，C3-第三質控線。具體實施方式結合以下實施例對本發(fā)明作進一步描述。圖1是本發(fā)明的結構示意圖，如圖1所示，一種農(nóng)產(chǎn)品藥物殘留膠體金檢測試劑盒，包括盒體11、蓋體12和盒底座13，蓋體11位于盒體11的頂部，盒底座13設置于盒體11的底部；所述盒底座13上設置有多個放置孔，放置孔孔分別固設有如圖2所示的檢測試紙18、樣品瓶14和檢測盤17。優(yōu)選地，所述樣品瓶14的內壁上設有刻度線。優(yōu)選地，所述檢測盤17的內壁上設有檢測刻度線。優(yōu)選地，所述檢測試紙18為鄰苯二甲酸二癸酯膠體金免疫層析檢測試紙。如圖2所示，所述鄰苯二甲酸二癸酯膠體金免疫層析檢測試紙包括由具有吸水性能的材料制備而成的樣品層1、膠體金標記層2、檢測反應層3、吸水層4和由塑料制備而成的背襯板7。所述膠體金標記層2上包被有鄰苯二甲酸二癸酯單克隆抗體-膠體金標記物和酶標記的抗有機磷特異性抗體，在本實施例中，酶的種類可以采用辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶或者是β-半乳糖苷酶，有機磷為甲基對硫磷、倍硫磷、氯硫磷、久效磷或者二甲硫吸磷中的一種或者多種混合；所述檢測反應層3上設置有檢測線T和質控線C，檢測線T為1～3條，質控線C為1～3條，檢測線T上包被有鄰苯二甲酸二癸酯-載體偶聯(lián)物的包被抗原；所述質控線C包被有兔抗鼠IgG和生物酶。在本實施例中，檢測線T包括如圖2所示的依次排布的第一檢測線T1和第二檢測線T2；質控線C包括依次排布的第一質控線C1、第二質控線C2和第三質控線C3；本實施例中嚴格控制膠體金標抗體、鄰苯二甲酸二癸酯-載體偶聯(lián)物和兔抗鼠IgG的比例；可根據(jù)不同的檢測線或質控線的顯色與否以及顏色的深淺，判定樣液中是否含有鄰苯二甲酸二癸酯和有機磷，可以判定樣品中的待檢物質濃度差異，實現(xiàn)半定量檢測。所述檢測用金標抗體可以與檢測用包被抗原結合反應并顯色，且檢測用金標抗體上只有一個與抗原特異結合的位點；所述樣品層1、膠體金標記層2和檢測反應層3按照從左至右、從上至下的順序依次結合在背襯板7同一面上，所述膠體金標記層2和檢測反應層3的端部重疊；所述吸水層4結合在檢測反應層3的另一端。在本實施例中，所述金標抗體為鄰苯二甲酸二癸酯單克隆抗體以鄰苯二甲酸二癸酯-載體蛋白偶聯(lián)物作為抗原免疫動物后制備獲得的。所述鄰苯二甲酸二癸酯-載體偶聯(lián)物所用的載體物質為蛋白質、蛋白質片段、合成多肽、半合成多肽、多糖，或者所述載體物質為具有活性基團的其他合成或天然聚合物，如白喉毒素、破傷風毒素、酵母、尼龍、右旋葡聚糖、纖維素或半纖維素；為了達到更好的效果，所述載體物質進一步可選用牛血清白蛋白、卵清白蛋白、匙孔血藍蛋白、甲狀腺球蛋白或L-多聚賴氨酸等。本發(fā)明中所采用的檢測試紙的工作原理如下：質控線C在檢測試紙中所起的作用是無論樣品溶液中是否含有鄰苯二甲酸二癸酯或者有機磷，膠體金標記層2包被的金標抗體上移到達質控線C時都可以與質控線C上的兔抗鼠IgG或者生物酶集合，聚集形成肉眼可見的紅色顆粒，質控線C始終顯色，如果在測試過程中，質控線C不顯示，則表示測試無效。如果待測樣品中有鄰苯二甲酸二癸酯或者有機磷，待測溶液在吸收層被吸收并通過毛細管作用向前移動，樣品中的小分子物質鄰苯二甲酸二癸酯或者有機磷會快速移動，當移動到膠體金標記層2時，就會與該層上的膠體金包被的鄰苯二甲酸二癸酯單克隆抗體或者酶標記的抗有機磷特異性抗體結合，因為鄰苯二甲酸二癸酯單克隆抗體酶標記的抗有機磷特異性抗體只有一個抗原結合位點，且樣品中游離態(tài)的鄰苯二甲酸二癸酯結合能力比偶合態(tài)的鄰苯二甲酸二癸酯的強，所以當結合了游離態(tài)的鄰苯二甲酸二癸酯的膠體金標抗體繼續(xù)移動到檢測線T時，不能與包被在檢測線T上的鄰苯二甲酸二癸酯-載體偶聯(lián)物結合，此時檢測線為無色，結合了游離態(tài)的鄰苯二甲酸二癸酯的膠體金標抗體繼續(xù)向前移動時，當移動到質控線C時，會與包被在質控線上的兔抗鼠IgG或者有機磷結合，此時質控線為紅色。即當檢測線T為無色，質控線為紅色時，檢測結果為陽性。如果待測樣品中無鄰苯二甲酸二癸酯或有機磷，待測溶液在吸收層被吸收并通過毛細管作用向前移動，膠體金標記層2包被的鄰苯二甲酸二癸酯膠體金標抗體或酶標記的抗有機磷特異性抗體也向前移動，到達檢測線T時就與鄰苯二甲酸二癸酯-載體或有機磷-載體偶聯(lián)物結合，此時檢測線T為紅色，膠體金標抗體或者酶標記的抗有機磷特異性抗體繼續(xù)向前移動，當移動到質控線C時，會與包被在質控線上的兔抗鼠IgG或者生物酶結合，此時質控線為紅色。即當檢測線T為紅色，質控線C為紅色時，檢測結果為陰性。本發(fā)明嚴格控制膠體金標抗體、酶標記的抗有機磷特異性抗體、鄰苯二甲酸二癸酯-載體偶聯(lián)物和兔抗鼠IgG以及生物酶的比例。具體應用時，可根據(jù)不同的檢測線或參數(shù)線的顯色與否以及顏色的深淺，判定樣液中是否含有鄰苯二甲酸二癸酯或者有機磷，以及含量的多與少，實現(xiàn)半定量檢測。當兩條檢測線T1和T2均顯紅色時，則樣品為陰性(即不含鄰苯二甲酸二癸酯或者有機磷)；當檢測線T1顯色，檢測線T2不顯色時，則樣品中含有鄰苯二甲酸二癸酯或者有機磷，但其濃度不高；當兩條檢測線均不顯色時，則樣品中鄰苯二甲酸二癸酯或者有機磷的濃度很高，以此進行半定量檢測。當檢測線T顏色深于參考線C3時，則樣品為陰性(不含鄰苯二甲酸二癸酯鄰苯二甲酸二癸酯或者有機磷或極微量)；當檢測線T顏色深于C3淺于參考線C2時，則樣品含有鄰苯二甲酸二癸酯或者有機磷，濃度比較低；當檢測線T顏色深于C2淺于C1時，則樣品中含有鄰苯二甲酸二癸酯或者有機磷，濃度比較高；當檢測線T不顯色時，則樣品中含有鄰苯二甲酸二癸酯或者有機磷，濃度非常高，以此進行半定量檢測。本發(fā)明由于采用鄰苯二甲酸二癸酯膠體金和酶標記的抗有機磷特異性抗體免疫檢測試紙，金標抗體酶標記的抗有機磷特異性抗體上只有一個與抗原特異結合的位點，具有特異性強；靈敏度高，達到9.63ng/ml，檢測速度快、通量大、操作簡單方便、顏色穩(wěn)定、檢測溫度適宜范圍寬、試紙保質期長和成本低廉等優(yōu)點，并能夠實現(xiàn)半定量檢測。該快速檢測試紙條在4～40℃都可使用，5～15min以后便可觀察結果，適合于食品藥品、環(huán)保、檢驗檢疫等部門對樣品中的鄰苯二甲酸二癸酯或有機磷農(nóng)藥進行快速檢測。使用不同的檢測方法對同一飲料進行鄰苯二甲酸二癸酯檢測，對比其靈敏度(檢出極限)和準確度。表1三種方法對飲料中的鄰苯二甲酸二癸酯檢測檢出極限(ng/ml)準確度檢測試紙9.6398.7％HPLC12.4798.2％GC11.3998.6％使用不同的檢測方法對同一黃瓜進行有機磷農(nóng)藥殘留檢測，對比其靈敏度(檢出極限)和準確度，如表2所示。表2檢出極限(ng/ml)準確度檢測試紙9.2099.6％HPLC13.4597.2％GC9.9999.1％由表1和表2可以知，使用本發(fā)明的試紙檢測飲料中的鄰苯二甲酸二癸酯，與傳統(tǒng)的方法HPLC和GC法相比，檢出極限均低于HPLC和GC法，即靈敏度更高達9.63ng/ml，準確度與HPLC和GC法相比差不多。檢測黃瓜表面有機磷殘留時檢出極限均低于HPLC和GC法。因此使用本發(fā)明提供的試劑盒具有操作簡單，耗時短，對檢測樣品不需要進行除雜的預處理，有利于條件一般的基層單位開展工作，也方便相關部門進行現(xiàn)場快速檢測。最后應當說明的是，以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術方案，而非對本發(fā)明保護范圍的限制，盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細地說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術方案的實質和范圍。當前第1頁1 2 3