本發(fā)明專利涉及一種收集蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的夾層杯及檢驗(yàn)方法。

背景技術(shù)：

現(xiàn)有蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵檢查有直接涂片檢查法與集卵法兩種，其中集卵法又分漂浮集卵法、沉淀集卵法等。直接涂片檢查法的檢查方法是將50％的甘油水溶液或普通水1-2滴放于載玻片上，鑷取黃豆大小的被檢標(biāo)本，如污泥、糞便等，與之混勻，剔除粗渣，加上蓋玻片鏡檢蟲(chóng)卵。此方法操作簡(jiǎn)單，但是檢出率不高，據(jù)統(tǒng)計(jì)不到30％，難以滿足檢驗(yàn)的需求。而雖然集卵法檢測(cè)能將檢出率提高至80％以上，但是現(xiàn)有集卵法仍然存在種種不足。漂浮集卵法一般采用飽和鹽水浮卵，方法是取大約10g標(biāo)本放置于一容器內(nèi)，壓碎，加入適量飽和鹽水?dāng)噭颍^(guò)濾，靜置0.5小時(shí)左右(或2000轉(zhuǎn)/分離心5-10分鐘)，用直徑0.5-0.1cm的金屬圈蘸取表面液膜，抖落于載玻片上，蓋片后鏡檢，或用蓋玻片直接蘸取液面，放于載玻片上在顯微鏡下檢查。該檢查方法，檢出率高，但是操作復(fù)雜，容易污染儀器設(shè)備，且在檢驗(yàn)過(guò)程中操作人員需要接觸糞便，加大感染幾率，同時(shí)標(biāo)本和試劑氣味嚴(yán)重影響操作環(huán)境。傳統(tǒng)沉淀集卵法的方法是取5-10g標(biāo)本搗碎后，放于一容器內(nèi)，加5-10倍清水?dāng)噭?，?jīng)40-60孔銅篩過(guò)濾后，讓濾液自然沉淀約20分鐘，倒掉上清液，反復(fù)2-3次，至上清液清亮為止。左后傾倒掉大部分上清液，留約為沉淀物1/2的溶液量，用膠吸管吹吸，均勻后，吸取少量于載玻片上，加蓋玻片鏡檢。這種方法仍然需要在離心沉淀后由操作人員手工涂片鏡檢，耗時(shí)費(fèi)工，并且仍然存在大部分寄生蟲(chóng)卵不能進(jìn)入閱片環(huán)節(jié)(因?yàn)橹荒軌蛉〔糠蛛x心沉淀制作標(biāo)本片)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了解決上述方法所存在的檢出率不足、操作復(fù)雜、污染操作環(huán)境等技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種能夠顯著提高蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵檢出率、且操作簡(jiǎn)單，能夠保持操作環(huán)境清潔的收集蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的夾層杯及檢驗(yàn)方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是，

一種收集蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的夾層杯，包括設(shè)有頂蓋和底蓋的杯體、過(guò)濾網(wǎng)和截留膜，所述的過(guò)濾網(wǎng)和截留膜設(shè)置于杯體內(nèi)且將杯體分為三部分，過(guò)濾網(wǎng)靠近頂蓋設(shè)置，截留膜靠近底蓋設(shè)置。

所述的一種收集蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的夾層杯，所述的過(guò)濾網(wǎng)的孔徑為100μm-200μm并用于過(guò)濾標(biāo)本的粗顆粒雜質(zhì)，所述的截留膜的孔徑為5μm-10μm并用于排出水份及細(xì)顆粒雜質(zhì)且截留蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵。

所述的一種收集蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的夾層杯，所述的頂蓋上設(shè)有用于插取標(biāo)本的標(biāo)本叉，所述的標(biāo)本叉包括叉桿和叉頭，所述的叉桿的一端固定于頂蓋上，另一端延伸至杯體內(nèi)且固定有叉頭，標(biāo)本叉在杯體內(nèi)的長(zhǎng)度小于過(guò)濾網(wǎng)與頂蓋之間的距離。

所述的一種收集蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的夾層杯，所述的叉桿為空心的管狀結(jié)構(gòu)，且頂蓋在固定叉桿的位置開(kāi)有連通叉桿空心管狀部位的頂蓋孔，所述的叉頭在連接叉桿的部分開(kāi)有多個(gè)叉頭孔。

一種收集蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的夾層杯檢驗(yàn)方法，采用所述的夾層杯，包括以下步驟：

步驟1，采集標(biāo)本，從杯體的頂蓋一端放入杯體中，注入溶解液；

步驟2，對(duì)杯體進(jìn)行振蕩，使杯體內(nèi)的混合液體呈懸濁液狀；

步驟3，從杯體的底蓋一端加負(fù)壓，將混合液體從底蓋一端吸走，使粗顆粒雜質(zhì)被攔截在過(guò)濾網(wǎng)上，細(xì)顆粒雜質(zhì)和水份被吸走，蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵被截留在截留膜上；

步驟4，將截留膜澆注透明液后待截留膜半干燥，進(jìn)行觀察分析。

所述的一種收集蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的夾層杯檢驗(yàn)方法，所述的步驟1中，采集標(biāo)本是取下頂蓋，用固定于頂蓋上的標(biāo)本叉進(jìn)行標(biāo)本插取后，再將頂蓋蓋于杯體上。

所述的一種收集蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的夾層杯檢驗(yàn)方法，所述的步驟1中，注入溶解液，是將溶解液直接經(jīng)管狀結(jié)構(gòu)的叉桿注入至叉頭并沖淋標(biāo)本。

所述的一種收集蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的夾層杯檢驗(yàn)方法，所述的步驟3中，在吸走混合液體后，再加入清洗液抽吸一次以進(jìn)一步去除雜質(zhì)。

所述的一種收集蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的夾層杯檢驗(yàn)方法，溶解液的成分為胰蛋白酶，氯化鈉、緩沖對(duì)試劑和去離子水，透明液的成分為石蠟油和甲基硅油。

所述的一種收集蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的夾層杯檢驗(yàn)方法，清洗液的成分為5％曲拉通X100，緩沖對(duì)和去離子水。

本發(fā)明的技術(shù)效果在于，標(biāo)本通過(guò)截留膜濃集，可以顯著提高蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵檢出率，標(biāo)本中全部蟲(chóng)卵可以進(jìn)入閱片環(huán)節(jié)(截留膜阻攔大于10μm的所有顆粒)。整個(gè)過(guò)程在裝置中進(jìn)行，廢液集中收集，操作環(huán)境完全無(wú)標(biāo)本及氣味溢出，符合實(shí)驗(yàn)室生物安全要求，克服了實(shí)驗(yàn)人員對(duì)標(biāo)本檢驗(yàn)的臭氣和感觀的不適。操作簡(jiǎn)單快捷，每份標(biāo)本完成時(shí)間在3分鐘以內(nèi)。適合于各種標(biāo)本如污泥、糞便，以及含有蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵的水體進(jìn)行寄生蟲(chóng)卵檢驗(yàn)。無(wú)需手工涂片，集卵與涂片同時(shí)完成，降低人工成本。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明的結(jié)構(gòu)示意圖；

其中，1叉桿、2頂蓋、3杯體、4叉頭、5過(guò)濾網(wǎng)、6截留膜、7底蓋。

具體實(shí)施方式

參見(jiàn)圖1，本發(fā)明包括設(shè)有頂蓋和底蓋的杯體、過(guò)濾網(wǎng)和截留膜，過(guò)濾網(wǎng)和截留膜設(shè)置于杯體內(nèi)且將杯體分為三部分，過(guò)濾網(wǎng)靠近頂蓋設(shè)置，截留膜靠近底蓋設(shè)置。

其中過(guò)濾網(wǎng)的孔徑為100μm-200μm并用于過(guò)濾標(biāo)本的粗顆粒雜質(zhì)，截留膜的孔徑為5μm-10μm并用于排出水份及細(xì)顆粒雜質(zhì)且截留蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵。

進(jìn)一步的，為了便于操作，頂蓋上設(shè)有用于插取標(biāo)本的標(biāo)本叉，標(biāo)本叉包括叉桿和叉頭，叉桿的一端固定于頂蓋上，另一端延伸至杯體內(nèi)且固定有叉頭，標(biāo)本叉在杯體內(nèi)的長(zhǎng)度小于過(guò)濾網(wǎng)與頂蓋之間的距離。

進(jìn)一步的，所述的叉桿為空心的管狀結(jié)構(gòu)，且頂蓋在固定叉桿的位置開(kāi)有連通叉桿空心管狀部位的頂蓋孔，所述的叉頭在連接叉桿的部分開(kāi)有多個(gè)叉頭孔。

實(shí)施例1

1、標(biāo)本采集者擰開(kāi)頂蓋，用與杯蓋連接在一起的標(biāo)本叉來(lái)叉取污泥標(biāo)本1-2克，放回杯體中，擰緊杯蓋送檢。

2、檢驗(yàn)人員將收集有污泥標(biāo)本的杯體的底蓋打開(kāi)，插入帶有震蕩裝置和負(fù)壓裝置的儀器中。

3、從叉桿加入溶解液5ml，溶解液直接沖洗標(biāo)本叉上的污泥標(biāo)本。開(kāi)啟儀器震蕩按鈕約1分鐘，使污泥標(biāo)本呈懸濁液。按下抽吸按鈕，將液體抽干。此時(shí)較粗的渣質(zhì)被過(guò)濾網(wǎng)攔截，小于截留膜孔徑的細(xì)顆粒雜質(zhì)直接通過(guò)截留膜(孔徑5-8微米)被抽吸去除，蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵不能被過(guò)濾網(wǎng)攔截，卻完全被截留膜截留。

4、加注透明液5ml，約10秒鐘后抽吸去除，使截留膜呈現(xiàn)半干燥的透明狀態(tài)。

5、取出集卵夾層杯，用鑷子取下截留膜直接置于顯微鏡下觀察。

實(shí)施例2

1、標(biāo)本采集者擰開(kāi)頂蓋，用與杯蓋連接在一起的標(biāo)本叉來(lái)叉取糞便標(biāo)本1-2克，放回杯體中，擰緊杯蓋送檢。

2、檢驗(yàn)人員將收集有糞便標(biāo)本的杯體的底蓋打開(kāi)，插入帶有震蕩裝置和負(fù)壓裝置的儀器中。

3、從叉桿加入溶解液5ml，溶解液直接沖洗標(biāo)本叉上的糞便標(biāo)本。開(kāi)啟儀器震蕩按鈕約1分鐘，使糞便標(biāo)本呈懸濁液。按下抽吸按鈕，將液體抽干。此時(shí)較粗的渣質(zhì)被過(guò)濾網(wǎng)攔截，小于截留膜孔徑的細(xì)顆粒雜質(zhì)直接通過(guò)截留膜(孔徑5-8微米)被抽吸去除，蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵不能被過(guò)濾網(wǎng)攔截，卻完全被截留膜截留。

4、加注清洗液5ml，再抽吸一遍，進(jìn)一步去掉較細(xì)的殘?jiān)?/p>

5、加注透明液5ml，約10秒鐘后抽吸去除，使截留膜呈現(xiàn)半干燥的透明狀態(tài)。

6、取出集卵夾層杯，用鑷子取下截留膜直接置于顯微鏡下觀察。

實(shí)施例3

1、標(biāo)本采集者擰開(kāi)頂蓋，將可能含有蟲(chóng)卵的水體標(biāo)本倒入杯體中，擰緊杯蓋送檢。

2、檢驗(yàn)人員將收集有水體標(biāo)本的杯體的底蓋打開(kāi)，插入帶有震蕩裝置和負(fù)壓裝置的儀器中。

3、從叉桿加入溶解液5ml以溶解水體中可能存在的雜質(zhì)。開(kāi)啟儀器震蕩按鈕約1分鐘，使標(biāo)本呈懸濁液。按下抽吸按鈕，將液體抽干。此時(shí)較粗的渣質(zhì)被過(guò)濾網(wǎng)攔截，小于截留膜孔徑的細(xì)顆粒雜質(zhì)直接通過(guò)截留膜(孔徑5-8微米)被抽吸去除，蠕蟲(chóng)蟲(chóng)卵不能被過(guò)濾網(wǎng)攔截，卻完全被截留膜截留。

4、加注清洗液5ml，再抽吸一遍，進(jìn)一步去掉較細(xì)的殘?jiān)?/p>

5、加注透明液5ml，約10秒鐘后抽吸去除，使截留膜呈現(xiàn)半干燥的透明狀態(tài)。

6、取出集卵夾層杯，用鑷子取下截留膜直接置于顯微鏡下觀察。

上述實(shí)施例中，溶解液：用于溶解糞便中的粘液，充分釋放寄生蟲(chóng)卵。配方：胰蛋白酶，氯化鈉、緩沖對(duì)試劑，去離子水組成，其中胰蛋白酶的含量為0.25％。

清洗液：增強(qiáng)截留膜通透性，將標(biāo)本中雜質(zhì)快速去除。配方：5％曲拉通X100，緩沖對(duì)，去離子水組成，其中緩沖對(duì)即為磷酸鹽緩沖對(duì)，PH6.8～7.2。

透明液：使截留膜完全透明，符合顯微鏡光學(xué)要求。配方：石蠟油、甲基硅油，石蠟油和甲基硅油之間的配比為1:1.8～2.2，采用1:2.0的配比尤佳。

震蕩抽液器：由負(fù)壓泵、管道、密封裝置、震蕩裝置組成，用于混勻液體，抽吸標(biāo)本。