本發(fā)明屬于檢測(cè)分析領(lǐng)域，涉及一種分析大米內(nèi)香氣成分的方法，具體來(lái)說(shuō)是一種對(duì)油粘米中的香氣成分進(jìn)行分離鑒定的方法。
背景技術(shù)：
油粘米是中國(guó)出口大米中的主要品種之一。油粘米依靠當(dāng)?shù)靥赜械耐寥馈⑺|(zhì)、氣候和人文等因素，運(yùn)用獨(dú)特的選育、加工工藝進(jìn)行生產(chǎn)，米質(zhì)觀感晶瑩光亮，富有光澤和油質(zhì)感。
油粘米以其米粒細(xì)小、質(zhì)地硬韌、晶瑩透明、油脂量高而著稱。它色澤白潤(rùn)如玉，煮飯香軟適口，煮粥粘而不膩，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高。色、香、味俱佳的油粘米，堪稱米中珍品，久負(fù)盛名，享譽(yù)嶺南。油粘米具有明顯的果香風(fēng)味，但是這種風(fēng)味是哪些揮發(fā)性物質(zhì)所致卻很少有報(bào)道。
通過(guò)儀器分析檢測(cè)到的大米揮發(fā)性物質(zhì)已有200種，然而揮發(fā)性物質(zhì)與風(fēng)味對(duì)應(yīng)關(guān)系上只有很少一部分為人所了解。大米中的己醛(具有葡萄酒味)、壬醛(具有果香味)等香氣成分主要由不飽和脂肪酸(亞麻酸和亞油酸等)氧化產(chǎn)生，因而含量較多，可以用來(lái)表征大米新鮮度。傳統(tǒng)檢測(cè)大米風(fēng)味物質(zhì)的方法主要為采集、濃縮、分離、定量，操作步驟繁瑣、且分離和定量分析存在一定的困難。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種對(duì)油粘米中的香氣成分進(jìn)行分離鑒定的方法，所述的這種對(duì)油粘米中的香氣成分進(jìn)行分離鑒定的方法要解決現(xiàn)有技術(shù)中測(cè)定油粘米中的香氣成分步驟繁瑣、且定量不準(zhǔn)確等技術(shù)問(wèn)題。
本發(fā)明提供了一種對(duì)油粘米中的香氣成分進(jìn)行分離鑒定的方法，包括以下步驟：
1)一個(gè)利用頂空固相微萃取技術(shù)分離和富集油粘米中風(fēng)味物質(zhì)的步驟，將油粘米用粉粹機(jī)粉粹，過(guò)80目篩，準(zhǔn)確稱取油粘米樣品5g于20ml的頂空瓶中，加入10μl10μg/ml的2,4,6-三甲基吡啶內(nèi)標(biāo)物后立即用硅膠墊片密封，并在恒溫水浴溫度80℃下平衡10min，用于頂空固相微萃取，頂空固相微萃取條件為：將萃取頭插入到頂空瓶中，并使萃取頭處于樣品之上2cm，恒溫水浴溫度80℃下萃取30～40min，隨后迅速將萃取頭插入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)樣口，于250℃下解吸5～6min；
2)一個(gè)利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)分析上述所得到的油粘米風(fēng)味物質(zhì)，并對(duì)其中香氣成分進(jìn)行定性定量分析的步驟；
氣相色譜條件：采用rtx-wax石英毛細(xì)柱，所述的rtx-wax石英毛細(xì)柱的參數(shù)為30m×0.25mm×0.25μm，載氣為氦氣，流量為1.2ml/min，分流進(jìn)樣，分流比設(shè)為18:1，進(jìn)樣口溫度為250℃，升溫程序?yàn)椋撼跏紲囟葹?0℃，保持2min，以5℃/min升至240℃，保持3min；
質(zhì)譜條件為：電子轟擊離子源，電子能量70ev，離子源溫度為250℃，采用全掃描模式，掃描范圍m/z：30–300，接口溫度250℃；四級(jí)桿溫度180℃；
3)在對(duì)檢出的香氣成分進(jìn)行定性分析的過(guò)程中，未知化合物經(jīng)計(jì)算機(jī)檢索同時(shí)與nist14和nist14s譜庫(kù)相匹配，匹配度大于80％的成分作為定性；
4)在定量的過(guò)程中，化合物含量按內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行計(jì)算，即以各種化合物的峰面積除以tmp的峰面積的比值乘以tmp的濃度作為樣品中化合物的濃度。
進(jìn)一步的，所述的分析檢測(cè)儀器為氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。
進(jìn)一步的，所述的定量方法為內(nèi)標(biāo)法定量。
本發(fā)明包括一個(gè)利用頂空固相微萃取技術(shù)分離和富集油粘米中香氣成分(醛類、酮類和醇類)的步驟；一個(gè)利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)分析上述所得到的油粘米香氣成分(醛類、酮類和醇類)，并對(duì)其中香氣成分進(jìn)行定性定量分析的步驟。
本發(fā)明和已有技術(shù)相比，其技術(shù)進(jìn)步是顯著的。本發(fā)明采用頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，建立了一種對(duì)油粘米中的香氣成分進(jìn)行分離鑒定的方法，該鑒定方法具有操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、適用性廣泛等優(yōu)點(diǎn)。
附圖說(shuō)明
圖1是實(shí)施例1采用頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)油粘米中的香氣成分進(jìn)行分析的色譜圖。
具體實(shí)施方式
下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行闡述，但并不限制本發(fā)明。
為進(jìn)一步闡釋采用頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)快速檢測(cè)并定性定量油粘米中的香氣成分的方法，下面結(jié)合實(shí)例作更詳盡的說(shuō)明。
實(shí)施例1
本發(fā)明主要采用頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)油粘米中的香氣成分進(jìn)行定性定量，具體步驟如下：
1)提取油粘米中的香氣成分：
首先將油粘米用粉粹機(jī)粉粹，過(guò)80目篩，準(zhǔn)確稱取油粘米樣品5g于20ml的頂空瓶中，加入10μl10μg/ml的2,4,6-三甲基吡啶(tmp)內(nèi)標(biāo)物后立即用硅膠墊片密封，并在恒溫水浴溫度80℃下平衡10min，用于頂空固相微萃取。頂空固相微萃取條件為：將萃取頭插入到頂空瓶中，并使萃取頭處于樣品之上2cm，恒溫水浴溫度80℃下萃取30～40min，隨后迅速將萃取頭插入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)樣口，于250℃下解吸5～6min，進(jìn)行g(shù)c-ms分析。
2)用頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)分析步驟1)所得到的油粘米中的香氣成分進(jìn)行定性定量分析：
氣相色譜條件：
采用rtx-wax石英毛細(xì)柱(30m×0.25mm×0.25μm)，載氣為氦氣(99.999％)，流量為1.2ml/min，分流進(jìn)樣，分流比設(shè)為18:1，進(jìn)樣口溫度為250℃，升溫程序：初始溫度為40℃，保持2min，以5℃/min升至240℃，保持3min。
質(zhì)譜條件：
電子轟擊離子源，電子能量70ev，離子源溫度為250℃，采用全掃描模式，掃描范圍m/z：30–300，接口溫度250℃；四級(jí)桿溫度180℃。
3)檢出物質(zhì)的定性與定量：gc-ms數(shù)據(jù)處理由島津軟件系統(tǒng)完成，未知化合物經(jīng)計(jì)算機(jī)檢索同時(shí)與nist14和nist14s譜庫(kù)相匹配，匹配度大于80％的成分作為鑒定結(jié)果，化合物含量按內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行計(jì)算，即以各種化合物的峰面積除以tmp的峰面積的比值乘以tmp的濃度作為樣品中化合物的濃度。
表1本發(fā)明方法油粘米中的香氣成分檢測(cè)結(jié)果。