本發(fā)明涉及一種利用QuEChERS萃取技術(shù)處理水果農(nóng)藥檢測樣品的方法，屬于農(nóng)產(chǎn)品檢測領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
農(nóng)藥是指在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，為保障、促進(jìn)植物和農(nóng)作物的成長，所施用的殺蟲、殺菌、殺滅有害動物（或雜草）的一類藥物統(tǒng)稱，包括有機(jī)磷酸酯（有機(jī)磷農(nóng)藥），氨基甲酸酯類，氯乙酰苯胺，和擬除蟲菊酯類，在農(nóng)業(yè)上用于防治病蟲以及調(diào)節(jié)植物生長、除草等藥劑。即使在很低的濃度，廣泛而長期使用和處置不當(dāng)都會造成嚴(yán)重的空氣、水、土壤及農(nóng)產(chǎn)品的污染，最終危害生態(tài)系統(tǒng)，包括人類。殺蟲劑的高毒性歸因于它們不可逆地抑制乙酰膽堿酯酶在中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)的活性，從而導(dǎo)致乙酰膽堿遞質(zhì)在體內(nèi)的積累，這可導(dǎo)致對神經(jīng)系統(tǒng)，呼吸道，和心血管系統(tǒng)的損害，多器官功能衰竭和致命的后果。因此，必須開發(fā)一種簡單、高靈敏度和快速的分析方法用于檢測和定量測定殘留農(nóng)藥保護(hù)環(huán)境和公眾安全。然而，即使現(xiàn)代已有強(qiáng)大技術(shù)應(yīng)用到農(nóng)藥檢測，由于在復(fù)雜的環(huán)境中殺蟲劑是痕量級的，殺蟲劑的直接分析很困難。因此，儀器分析之前，分析物的富集和濃縮預(yù)處理是必要的。
目前，已經(jīng)有許多樣品預(yù)處理技術(shù)用于提取農(nóng)藥，如固相萃取，液液萃取，固相微萃取等。其中，固相萃取是最有效的方法之一，其操作簡便，萃取時間短，良好的富集效率和有機(jī)溶劑用量少等特點(diǎn)。QuEChERS萃取分離技術(shù)是近年來國際上最新發(fā)展起來的一種用于農(nóng)產(chǎn)品檢測的快速樣品前處理技術(shù)，具有回收率高、精確度和準(zhǔn)確度高、可分析的農(nóng)藥范圍廣，分析速度快、溶劑使用量少、操作簡便、安全可靠等特點(diǎn)，因此在農(nóng)藥檢測領(lǐng)域已引起相當(dāng)大的關(guān)注。但是，目前為止，尚未見有用QuEChERS萃取分離技術(shù)處理水果農(nóng)藥檢測樣品的文獻(xiàn)報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種利用QuEChERS萃取技術(shù)處理水果農(nóng)藥檢測樣品的方法。
本發(fā)明處理水果農(nóng)藥檢測樣品的方法，是將購買的水果的果肉和果皮切碎并在榨汁機(jī)中均質(zhì)化后加入到離心管中，并迅速加入萃取劑，渦旋0.5~1.5min；再加入除水劑，渦旋1~6min后在4000~6000rpm離心3~7min以沉淀水果樣品；上清液轉(zhuǎn)移至含有凈化填料的離心管中搖勻后，以4000~6000rpm離心3~7min；上清液用0.2μm的膜過濾凈化，得到提取物樣品，注入HPLC-UV中用于分析。
上述萃取劑為丙酮，乙酸乙酯，乙腈、或含1%醋酸的乙腈，優(yōu)選丙酮；均質(zhì)水果樣品與萃取劑的質(zhì)量體積比為0.8~1.2g/mL。
上述除水劑是由MgSO4和具有出水作用的鈉鹽復(fù)配而成，其中鈉鹽為乙酸鈉、氯化鈉、檸檬酸三鈉或檸檬酸二鈉；均質(zhì)水果樣品與除水劑的質(zhì)量比為10:1~10:2.5。
上述凈化填料由MgSO4、C18和除色劑按1:（2~10）:（1~5）的質(zhì)量比配比而成。除色劑可選用MWNTs（多壁碳納米管），SWNTs（單壁碳納米管）或AC（活性炭），主要用于除去水果中的色素。
吸附填料與對應(yīng)上清液的質(zhì)量體積比為：200~250mg/ mL。
上述渦旋轉(zhuǎn)速為：180~200 rpm。
本發(fā)明水果樣品處理方法，通過對實(shí)際樣品的測定，對8種農(nóng)藥（啶蟲脒，克百威，辛硫磷，毒死蜱，高效氯氟氰菊酯，溴氰菊酯，噠螨靈，阿維菌素）的平均回收率為80.3%~110.4%，RSDs為3.5%~9.3%。
本發(fā)明對于水果樣品的處理方法，具有快速、簡單、廉價、有效、穩(wěn)定、安全及可大量處理等優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施方式
下面通過具體實(shí)施例對本發(fā)明QuEChERS-HPLC-UV萃取方法作進(jìn)一步說明。
實(shí)施例1
（1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：使用色譜級甲醇制備濃度為100mg L-1的8種殺蟲劑的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后在使用前在5℃下儲存。通過用甲醇稀釋儲備溶液來制備工作溶液。
（2）用甲醇稀釋標(biāo)準(zhǔn)溶液成不同濃度的工作溶液（為5 μg kg-1~2000 μg kg-1）后分別進(jìn)行測定：每個濃度平行測定3次，得出8種農(nóng)藥的線性方程和相關(guān)系數(shù)。以3倍信噪比計(jì)算得出8種農(nóng)藥的方法檢出限，結(jié)果見表1所示：8種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線在各自的線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.995。當(dāng)實(shí)際樣品殘留量超過此線性范圍時，應(yīng)對樣品溶液進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行定量測定。
（3）樣品處理和分析：將10 g的均質(zhì)水果樣品放入50mL離心管中；將10 mL丙酮迅速加入管中，隨后渦旋1 min；然后加入4g MgSO4，1g NaCl，1g檸檬酸二鈉和0.5g檸檬酸三鈉作為除水劑，將離心管渦旋5 min，并在5000 rpm離心5 min以沉淀水果樣品；取1 mL上清液轉(zhuǎn)移至含有凈化填料（包括20 mg C18吸附劑、200 mg MgSO4、20 mg SWNTs）的10 mL離心管中，搖動5 min，然后將試管以5000 rpm離心5 min；最后使用0.2 μm的膜過濾凈化上清液，并將0.5 mL提取物注入HPLC-UV中用于分析。
（4）加標(biāo)回收率：分別對實(shí)際樣品按高、低兩個濃度加標(biāo)水平進(jìn)行測定，每個加標(biāo)水平重復(fù)3次，計(jì)算平均回收率與相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），結(jié)果見表2。
實(shí)施例2
樣品處理和分析中，以乙酸乙酯代替丙酮作為萃取劑，其它同實(shí)施例1；分析結(jié)果見表2。
實(shí)施例3
樣品處理和分析中，以含1%醋酸的乙腈代替丙酮作萃取劑，其它同實(shí)施例1；分析結(jié)果見表2。
實(shí)施例4
樣品處理和分析中，以乙腈丙酮作萃取劑，其它同實(shí)施例1；分析結(jié)果見表2。
實(shí)施例5
樣品處理和分析中，以4g MgSO4，1g NaCl為除水劑，其它同實(shí)施例1；分析結(jié)果見表2。
實(shí)施例6
樣品處理和分析中，以4g MgSO4，1g NaOAc為除水劑，其它同實(shí)施例1；分析結(jié)果見表2。
實(shí)施例7
樣品處理和分析中，以20 mg C18，200 mg MgSO4和20 mg MWNTs為凈化填料，其它同實(shí)施例1；分析結(jié)果見表2。
實(shí)施例8
樣品處理和分析中，以為20 mg C18，200 mg MgSO4和20 mg AC為凈化填料，其它同實(shí)施例1；分析結(jié)果見表2。
結(jié)果顯示，8種農(nóng)藥的平均回收率為80.3%~110.4%，RSDs為3.5%~9.3%。
表1為 8種農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系
表2 4種樣品的加標(biāo)回收率