本發(fā)明屬于化學(xué)藥制劑的質(zhì)量控制，具體涉及非洛地平琥珀酸美托洛爾緩釋片中雜質(zhì)的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
非洛地平(felodipine)為二氫吡啶類鈣通道阻滯劑，臨床用于高血壓、穩(wěn)定性心絞痛的治療。其作用是可逆性競爭二氫吡啶結(jié)合位點(diǎn)，阻斷血管平滑肌和人工培養(yǎng)的兔心房細(xì)胞的電壓依賴性ca2+電流，并阻斷k+誘導(dǎo)的鼠門靜脈攣縮。
美托洛爾(metoprolol)是一種選擇性的β1受體阻滯劑，其對心臟β1受體產(chǎn)生作用所需劑量低于其對外周血管和支氣管上的β2受體產(chǎn)生作用所需劑量。美托洛爾的治療可減弱與生理和心理負(fù)荷有關(guān)的兒茶酚胺的作用，降低心率、心排出量及血壓。在應(yīng)激狀態(tài)下，腎上腺分泌的腎上腺素增加，美托洛爾不會妨礙生理性血管擴(kuò)張。在治療劑量，美托洛爾對支氣管平滑肌的收縮作用弱于非選擇性β受體阻滯劑，該特性使之能與β2受體激動劑合用，治療合并有支氣管哮喘或其他明顯的阻塞性肺病的患者，美托洛爾對胰島素釋放及糖代謝的影響小于非選擇性β受體阻滯劑，因而可用于糖尿病患者。與非選擇性β受體阻滯劑相比美托洛爾對低血糖的心血管反應(yīng)如心動過速的影響較小，血糖會升至正常水平的速度較快。對于高血壓患者，可明顯降低直立位、平臥位及運(yùn)動時(shí)的血壓。
非洛地平和美托洛爾兩種藥物已經(jīng)廣泛用于心血管疾病的治療。而且多項(xiàng)研究表明，在高血壓的治療中，二氫吡啶類鈣拮抗劑與β受體阻滯劑被認(rèn)為是最有效的聯(lián)合用藥。鈣拮抗劑能抑制β受體阻滯劑阻滯β受體所致的血管收縮作用；而β受體阻滯劑則可防止二氫吡啶類鈣拮抗劑引起的心動過速和交感神經(jīng)活化。阿斯利康公司已經(jīng)研發(fā)了非洛地平和美托洛爾的復(fù)方緩釋制劑(商品名：logimax)，用于高血壓等心血管疾病的治療。
化學(xué)藥制劑中一個(gè)重要的質(zhì)量控制指標(biāo)是雜質(zhì)含量的限量控制，以保證制劑產(chǎn)品的質(zhì)量和臨床使用有效、安全。
現(xiàn)有技術(shù)為單獨(dú)測定非洛地平緩釋片的雜質(zhì)和琥珀酸美托洛爾的雜質(zhì)。兩者均為單一體系，琥珀酸美托洛爾是原料，為單一成分，只用考慮原料降解雜質(zhì)，雜質(zhì)的測定方法在美國藥典有記載，方法的創(chuàng)新性不足；非洛地平緩釋片雜質(zhì)測定方法的建立需要考慮非洛地平原料的降解，還要考慮原料與輔料、原料與包材的相互反應(yīng)產(chǎn)生的雜質(zhì)。對于復(fù)方非洛地平緩釋片雜質(zhì)檢測的報(bào)道也是分別建立非洛地平雜質(zhì)和酒石酸美托洛爾雜質(zhì)的檢測方法。但是對于本發(fā)明中的非洛地平琥珀酸美托洛爾緩釋片與現(xiàn)有技術(shù)中的產(chǎn)品(非洛地平緩釋片、琥珀酸美托洛爾緩釋片)并不一樣，原料、輔料、配方均不同，建立雜質(zhì)控制方法需要考慮原料降解、原料與原料的相互反應(yīng)、原料與輔料的相互反應(yīng)，原料與包材的相互反應(yīng)產(chǎn)生的雜質(zhì)，體系更為復(fù)雜，需要進(jìn)行更深入的研究，故現(xiàn)有技術(shù)方案并不適用。沒有簡便的同時(shí)測定復(fù)方制劑中非洛地平、琥珀酸美托洛爾中雜質(zhì)的方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種方法簡化、省時(shí)節(jié)能的、可操作性強(qiáng)的非洛地平琥珀酸美托洛爾緩釋片中雜質(zhì)的質(zhì)量控制方法，十分有利于工業(yè)化生產(chǎn)的應(yīng)用。
本發(fā)明希望解決的技術(shù)問題包括：
(1)在非洛地平琥珀酸美托洛爾緩釋片這個(gè)復(fù)雜體系中，原料降解情況；原料之間是否產(chǎn)生相互作用，有新的降解產(chǎn)物；兩個(gè)原料與輔料是否產(chǎn)生相互作用，有新的降解產(chǎn)物；兩個(gè)原料與包材是否產(chǎn)生相互作用，有新的降解產(chǎn)物；本品在長期、加速條件下是否產(chǎn)生新的降解產(chǎn)物，或者原有的降解產(chǎn)物是否增加。
(2)非洛地平、琥珀酸美托洛爾兩者的最大吸收波長不同，研究同時(shí)測定二者雜質(zhì)需要首先考慮波長選擇，如何選擇一個(gè)可以盡量檢測出兩個(gè)原料及其降解產(chǎn)物的波長。
(3)本品中非洛地平的量為5mg，琥珀酸美托洛爾的量為47.5mg，后者的量為前者的9.5倍，如何確定在同一取樣量下，測定出琥珀酸美托洛爾雜質(zhì)的同時(shí)，非洛地平的雜質(zhì)也能夠準(zhǔn)確測定。
(4)非洛地平、琥珀酸美托洛爾二者的極性不同，用高效液相色譜法進(jìn)行測定時(shí)，在保證主峰和雜質(zhì)達(dá)到基線分離的情況下，二者出峰時(shí)間差別較大，整個(gè)測定過程用時(shí)較長，效率不高，如何能盡量減少檢測時(shí)間，提高效率。
本發(fā)明以如下技術(shù)方案解決上述技術(shù)問題：
非洛地平琥珀酸美托洛爾緩釋片中雜質(zhì)的質(zhì)量控制方法包括以下步驟中的一種或多種：
取非洛地平琥珀酸美托洛爾緩釋片的細(xì)粉適量(約相當(dāng)于琥珀酸美托洛爾47.5mg與非洛地平5mg)，置25ml量瓶中，加乙腈10ml，超聲處理5分鐘使琥珀酸美托洛爾與非洛地平溶解，放冷，用流動相a稀釋至刻度，搖勻，離心5分鐘(10,000轉(zhuǎn)/分)，取上清液作為供試品溶液。精密量取1ml，置100ml量瓶中，用溶劑[辛烷磺酸鈉溶液-乙腈(60:40)]水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照高效液相色譜法(《中國藥典》四部通則)試驗(yàn)，用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相a為辛烷磺酸鈉溶液(取辛烷磺酸鈉1.3g，冰醋酸1.0ml，加水溶解并稀釋至1000ml)，流動相b為乙腈，梯度洗脫；流速為1.0ml/ml；檢測波長為223nm。按下表進(jìn)行梯度洗脫，理論板數(shù)按非洛地平峰計(jì)算不小于2000，兩主峰與各自相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。取對照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使非洛地平色譜峰高約為滿量程的20％～25％。精密量取供試品溶液與對照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，琥珀酸美托洛爾主峰保留時(shí)間為9min～10min，非洛地平主峰保留時(shí)間為17min～18min，供試品溶液的色譜圖中：扣除相對非洛地平主峰保留時(shí)間0.25之前和2.18的色譜峰；相對非洛地平主峰保留時(shí)間0.80之前、與雜質(zhì)d保留時(shí)間一致的色譜峰，歸屬為琥珀酸美托洛爾的雜質(zhì)；其他均為非洛地平的雜質(zhì)。琥珀酸美托洛爾單個(gè)雜質(zhì)不得過0.5％，總雜質(zhì)不得過1.0％，供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液中琥珀酸美托洛爾主峰面積0.01倍(0.01％)的峰可忽略不計(jì)；如有與雜質(zhì)i保留時(shí)間(相對非洛地平主峰時(shí)間約為0.95)一致的色譜峰，不得過非洛地平標(biāo)示量的1.0％，非洛地平的其他單個(gè)雜質(zhì)不得過0.5％，總雜質(zhì)不得過1.5％，供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液中非洛地平主峰面積0.05倍(0.05％)的峰可忽略不計(jì)。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明的質(zhì)量控制方法是經(jīng)過大量的試驗(yàn)篩選并經(jīng)過方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)得到的最佳方案，
條件篩選包括了：色譜柱、檢測波長、供試液前處理、流動相等條件的篩選，最種確定本發(fā)明技術(shù)方案的液相條件。
通過方法學(xué)驗(yàn)證，證明本發(fā)明技術(shù)方案的方法是準(zhǔn)確的、可重復(fù)、可重現(xiàn)、穩(wěn)定的，方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果為：
實(shí)施例1：
取自制的非洛地平琥珀酸美托洛爾緩釋片三批(批號：20131201、20131202、20131203)、香港購買的阿斯利康制藥有限公司生產(chǎn)的原研產(chǎn)品非洛地平琥珀酸美托洛爾緩釋片一批(批號：60004066)，分別取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于琥珀酸美托洛爾47.5mg與非洛地平5mg)，置25ml量瓶中，加乙腈10ml，超聲處理5分鐘使琥珀酸美托洛爾與非洛地平溶解，放冷，用流動相a稀釋至刻度，搖勻，離心5分鐘(10,000轉(zhuǎn)/分)，取上清液作為供試品溶液。精密量取1ml，置100ml量瓶中，用溶劑[辛烷磺酸鈉溶液-乙腈(60:40)]稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。照高效液相色譜法(《中國藥典》四部通則)試驗(yàn)，用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相a為辛烷磺酸鈉溶液(取辛烷磺酸鈉1.3g，冰醋酸1.0ml，加水溶解并稀釋至1000ml)，流動相b為乙腈，梯度洗脫；流速為1.0ml/ml；檢測波長為223nm。按下表進(jìn)行梯度洗脫，理論板數(shù)按非洛地平峰計(jì)算不小于2000，兩主峰與各自相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。取對照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使非洛地平色譜峰高約為滿量程的20％～25％。精密量取供試品溶液與對照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，琥珀酸美托洛爾主峰保留時(shí)間為9min～10min，非洛地平主峰保留時(shí)間為17min～18min，供試品溶液的色譜圖中：扣除相對非洛地平主峰保留時(shí)間0.25之前和2.18的色譜峰；相對非洛地平主峰保留時(shí)間0.80之前、與雜質(zhì)d保留時(shí)間一致的色譜峰，歸屬為琥珀酸美托洛爾的雜質(zhì)；其他均為非洛地平的雜質(zhì)。琥珀酸美托洛爾單個(gè)雜質(zhì)不得過0.5％，總雜質(zhì)不得過1.0％，供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液中琥珀酸美托洛爾主峰面積0.01倍(0.01％)的峰可忽略不計(jì)；如有與雜質(zhì)i保留時(shí)間(相對非洛地平主峰時(shí)間約為0.95)一致的色譜峰，不得過非洛地平標(biāo)示量的1.0％，非洛地平的其他單個(gè)雜質(zhì)不得過0.5％，總雜質(zhì)不得過1.5％，供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液中非洛地平主峰面積0.05倍(0.05％)的峰可忽略不計(jì)。
加速穩(wěn)定性試驗(yàn)(加速試驗(yàn)條件：溫度40℃±2℃、相對濕度75％±5％)加速試驗(yàn)6個(gè)月的結(jié)果如下：
雜質(zhì)加速試驗(yàn)對比結(jié)果
上述加速6個(gè)月的穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明：本發(fā)明技術(shù)方案的質(zhì)量控制方法，能快速、準(zhǔn)確的、可重復(fù)性的檢測出非洛地平琥珀酸美托洛爾緩釋片中雜質(zhì)的含量，確保非洛地平琥珀酸美托洛爾緩釋片在雜質(zhì)方面的可控性，避免因雜質(zhì)含量增高卻未檢測出帶來的產(chǎn)品質(zhì)量、療效、安全方面的隱患。