1.一種煙草樣品中松蘿科植物特征成分的檢測方法,包括以下步驟:
a)用含內(nèi)標物的萃取溶劑萃取煙草樣品,獲得樣品溶液;
b)用松蘿科植物特征成分、內(nèi)標物和所述萃取溶劑配制系列濃度標準溶液;
c)用氣相色譜-質(zhì)譜法測定所述系列濃度標準溶液中的松蘿科植物特征成分,繪制標準工作曲線;
d)用氣相色譜-質(zhì)譜法測定所述樣品溶液中的松蘿科植物特征成分的含量,采用內(nèi)標標準曲線法定量;
e)計算煙草樣品中松蘿科植物特征成分的含量;
所述內(nèi)標物為乙酸苯乙酯;
所述萃取溶劑為二氯甲烷;
所述氣相色譜-質(zhì)譜法參數(shù)包括:采用選擇離子法,色譜柱為苯基亞芳基聚合物(性能上等同于5%-苯基)-甲基聚硅氧烷毛細管色譜柱;
所述松蘿科植物特征成分選自:苔黑酚,苔黑酚單甲醚、苔黑酚羧酸乙酯和β-苔黑酚羧酸甲酯中的一種或多種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,所述氣相色譜-質(zhì)譜法的色譜參數(shù)包括以下一項或多項:
-色譜柱型號:J&W DB-5ms;
-色譜柱尺寸:30m×0.25mm×0.25μm;
-進樣口溫度:240~260℃;
-進樣量:0.5~1.5μL;
-分流比:8~12:1;
-載氣流速:1~2mL/min;
-吹掃氣流速:4~6mL/min;
-采用程序升溫,升溫程序為:
初始50~70℃,保持1~3min,
以3~5℃/min速率升溫至230~250℃,保持0.5~1.5min,
以15~25℃/min速率升溫至250~270℃,保持4~6min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,所述氣相色譜-質(zhì)譜法的質(zhì)譜參數(shù)包括以下一項或多項:
-離子源:電子轟擊源;
-電子能:60~80eV;
-傳輸線溫度:200~300℃;
-離子源溫度:200~300℃;
-四級桿溫度100~200℃;
-溶劑延遲:6~10min;
-采用SCAN和SIM同時掃描,質(zhì)量掃描范圍m/z 45~300。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,所述氣相色譜-質(zhì)譜法的質(zhì)譜參數(shù)包括以下一項或多項:
-乙酸苯乙酯的定性離子為m/z43,91和104的離子,定量離子為m/z104的離子;
-苔黑酚單甲醚的定性離子為m/z76,107和138的離子,定量離子為m/z138的例子;
-苔黑酚的定性離子為m/z67,95和124的離子,定量離子為m/z124的離子;
-β-苔黑酚羧酸甲酯的定性離子為m/z136,164和196的離子,定量離子為m/z136的離子;
-苔黑酚羧酸乙酯的定性離子為m/z122,150和196的離子,定量離子為m/z150的離子。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,步驟a)包括:
-將煙草樣品用含內(nèi)標的萃取溶劑超聲萃取,過濾,收集濾液;
-在濾液中加入飽和氯化鈉溶液和鹽酸,振蕩,離心分液,收集有機相;
-將有機相用無水硫酸鈉干燥,用PTFE濾膜過濾,獲得樣品溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,所述煙草樣品為卷煙主流煙氣的總粒相物,步驟a)包括:
-用劍橋濾片收集卷煙主流煙氣的總粒相物;
-將含有總粒相物的劍橋濾片用含內(nèi)標的萃取溶劑超聲萃取,過濾,收集濾液;
-在濾液中加入飽和氯化鈉溶液和鹽酸,振蕩,離心分液,收集有機相。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,所述煙草樣品為煙絲,步驟a)包括:
-將煙絲用含內(nèi)標的萃取溶劑超聲萃取,過濾,收集濾液;
-在濾液中加入飽和氯化鈉溶液和鹽酸,振蕩,離心分液,收集有機相。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測煙草樣品中松蘿科植物特征成分的檢測方法,步驟b)中,所述系列濃度標準溶液為基質(zhì)匹配系列濃度標準溶液;
優(yōu)選地,所述基質(zhì)匹配系列濃度標準溶液的制備方法包括以下步驟:
-使用萃取溶劑萃取不含松蘿科植物特征成分的對照煙草樣品,獲得煙草樣品的基質(zhì)溶液;
-用松蘿科植物特征成分、所述內(nèi)標物和所述萃取溶劑配制不同濃度的松蘿科植物特征成分的溶液;
-將基質(zhì)溶液氮吹至近干,再分別加入不同濃度的松蘿科植物特征成分的溶液,得到基質(zhì)匹配系列標準溶液。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,所述系列濃度標準溶液的濃度范圍為0.01μg/mL~2.0μg/mL。
10.根據(jù)權(quán)利要求6~8任一項所述的方法,所述鹽酸濃度范圍為2wt%~5wt%。
11.根據(jù)權(quán)利要求1~9任一項所述的方法,其包括以下步驟中的一步或多步:
1.標準溶液的配制
1.1內(nèi)標溶液和標準溶液的配制:稱取乙酸苯乙酯的標準品,加入溶劑定容,配成內(nèi)標儲備溶液,準確稱取松蘿科植物特征成分,加入溶劑定容,配成標準儲備溶液,移取系列體積標準儲備溶液和適量內(nèi)標儲備溶液,配制成一般系列標準溶液;
1.2基質(zhì)匹配標準溶液的配制:使用萃取溶劑萃取不含松蘿科植物特征成分的對照煙草樣品,得到煙草制品的基質(zhì)溶液,移取適量基質(zhì)溶液,氮吹至近干,再加入等體積的1.1配制的一般系列標準溶液,得到基質(zhì)匹配系列標準溶液;
2.樣品前處理
2.1萃取溶液的配制:在萃取溶劑中加入適量的內(nèi)標儲備溶液,得到內(nèi)標萃取溶液;
2.2煙草制品的前處理:煙草制品使用適當體積的內(nèi)標萃取溶液并輔以超聲萃取,過濾后濾液使用飽和食鹽水和鹽酸洗滌,混合溶液靜置后離心分層,移除水相,有機相用無水硫酸鈉干燥后,氣相色譜質(zhì)譜進樣;
3.樣品的定性檢測:氣相色譜質(zhì)譜總離子流圖確定待測組分的保留時間,確定待測組分的定性離子和定量離子;
4.樣品的定量檢測
4.1繪制標準工作曲線:將步驟1.2中的基質(zhì)匹配標準溶液進行氣相色譜質(zhì)譜選擇離子測定,以目標成分與內(nèi)標的定量離子峰面積比為縱坐標,以目標成分的質(zhì)量濃度為橫坐標,繪制對應煙草制品基質(zhì)中的松蘿科植物特征成分的標準工作曲線,得到線性回歸方程;
4.2樣品的測定:將步驟2.2中的待測溶液進行氣相色譜質(zhì)譜選擇離子測定,將獲得的待測溶液中目標成分/內(nèi)標的定量離子峰面積比代入4.1中的線性回歸方程,計算得到目標成分的質(zhì)量濃度,進而換算得到在煙草制品中的含量。
12.根據(jù)權(quán)利要求1~9任一項所述的方法,所述煙草樣品選自煙葉、煙絲、再造煙葉、電子煙液、卷煙主流煙氣、卷煙紙、內(nèi)襯紙、濾棒、卷煙包裝盒中的一種或多種。