本發(fā)明涉及藥物成分的檢測，具體涉及一種1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的檢測方法。

背景技術(shù)：

高效液相色譜是目前應(yīng)用較多的色譜分析方法，高效液相色譜系統(tǒng)由流動(dòng)相儲(chǔ)液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成。常用的檢測器為紫外吸收檢測器，是基于溶質(zhì)分子吸收紫外光的原理設(shè)計(jì)的。然而對于一些不存在生色基團(tuán)的化合物，由于無紫外吸收，因此無法使用紫外吸收檢測器進(jìn)行物質(zhì)檢測。

1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸為白色粉末狀固體，結(jié)構(gòu)式如下所示：

其分子式為c13h18o4，分子量為238.28，分子內(nèi)含有羧基，呈弱酸性。該化合物是一種重要的甾體藥物原料，其有效分離對甾體藥物合成意義重大。但是由于該化合物不存在生色基團(tuán)、無紫外吸收，無法使用紫外吸收檢測器對其進(jìn)行檢測，因此目前急需一種能夠?qū)?,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸進(jìn)行有效分離和檢測的方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的檢測方法，以全部或部分解決上述技術(shù)問題。

為了解決上述問題，本發(fā)明公開了一種1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的檢測方法，包括：

步驟1、配制由乙腈和有機(jī)酸水溶液混合而成的流動(dòng)相，配制不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液；

步驟2、利用安裝有蒸發(fā)光散射檢測器的高效液相色譜儀以及配制的所述流動(dòng)相，對不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行檢測，根據(jù)測得的各濃度1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積的大小和濃度的對應(yīng)關(guān)系，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線；

步驟3、對1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸待測品進(jìn)行溶液配制，得到待測品溶液，利用所述高效液相色譜儀測得所述待測品溶液中所述1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸待測品的峰面積；

步驟4、根據(jù)所述步驟2制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線，確定所述步驟3測得的所述待測品溶液中所述1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸待測品的峰面積對應(yīng)的待測品濃度，進(jìn)一步計(jì)算出所述1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸待測品中1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量。

可選地，配制所述流動(dòng)相時(shí)，所述有機(jī)酸水溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05～0.2％；

所述乙腈和所述有機(jī)酸水溶液的體積比為40:60～30:70。

可選地，所述有機(jī)酸水溶液為甲酸水溶液、乙酸水溶液或丙酸水溶液。

可選地，所述蒸發(fā)光散射檢測器的霧化溫度為30～90℃，漂移管溫度為40～90℃，載氣流速為1.0～1.8bar。

可選地，所述步驟1中需要配制5～8個(gè)不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液；

所述標(biāo)準(zhǔn)曲線中，根據(jù)所述蒸發(fā)光散射檢測器檢測的各濃度1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積的大小與濃度的相關(guān)系數(shù)大于0.999。

可選地，所述高效液相色譜儀使用的反相色譜固定相為zorbaxsb-c18，尺寸為250mm×4.6mm。

可選地，所述步驟1還包括：在配制不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液后，使用0.2μm厚的濾膜對配制的不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行過濾。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明包括以下優(yōu)點(diǎn)：

本發(fā)明實(shí)施例提供了一種1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的檢測方法，由于使用蒸發(fā)光散射檢測器(elsd)，因此實(shí)現(xiàn)了對無紫外吸收的二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸的檢測。利用本發(fā)明實(shí)施例提供的方法可以實(shí)現(xiàn)紫外波段無吸收的樣品測定，該方法為一種通用型的分析檢測方法，具有廣泛的應(yīng)用前景。

本發(fā)明實(shí)施例使用有機(jī)酸水溶液調(diào)節(jié)流動(dòng)相的酸堿性，簡單快速地實(shí)現(xiàn)了1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的定量分析檢測。本發(fā)明實(shí)施例使用蒸發(fā)光散射檢測器對樣品進(jìn)行檢測，具有無溶劑效應(yīng)、干擾少等特點(diǎn)，同時(shí)溶劑兼容性廣泛。

附圖說明

圖1是本發(fā)明實(shí)施例所述的一種1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的檢測方法的流程圖；

圖2是本發(fā)明實(shí)施例中以乙腈和水為流動(dòng)相進(jìn)行1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液檢測的色譜圖；

圖3是本發(fā)明實(shí)施例中以乙腈和0.2％甲酸水溶液為流動(dòng)相進(jìn)行1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液檢測的色譜圖；

圖4是本發(fā)明實(shí)施例中對不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行檢測的色譜圖；

圖5是本發(fā)明實(shí)施例對不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

具體實(shí)施方式

為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更加明顯易懂，下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。

下面通過實(shí)施例對本發(fā)明所述方法的實(shí)現(xiàn)流程進(jìn)行詳細(xì)說明。

本發(fā)明實(shí)施例提供了一種1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的檢測方法。

參照圖1，其示出了本發(fā)明實(shí)施例所述的一種1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的檢測方法的流程圖，所述方法包括以下步驟：

步驟101、配制由乙腈和有機(jī)酸水溶液混合而成的流動(dòng)相，配制不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

使用高效液相色譜系統(tǒng)時(shí)，液體待檢測物被注入色譜柱，通過壓力在固定相中移動(dòng)，由于被測物中不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同，不同的物質(zhì)順序離開色譜柱，通過檢測器得到不同的峰信號(hào)，最后通過分析比對這些信號(hào)來判斷待側(cè)物所含有的物質(zhì)。

1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸的分子內(nèi)含有羧基，呈弱酸性。本發(fā)明實(shí)施例對流動(dòng)相的酸堿性與檢測樣品的保留時(shí)間的關(guān)系進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，研究結(jié)果表明，以含有機(jī)酸溶液的流動(dòng)相進(jìn)行樣品分離具有更合適的分離時(shí)間，且其色譜峰形得到明顯改善，可實(shí)現(xiàn)對1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸的有效定量分析檢測。有機(jī)酸水溶液可以為多種，優(yōu)選為甲酸水溶液、乙酸水溶液或丙酸水溶液。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，有機(jī)酸水溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)優(yōu)選為0.05～0.2％，乙腈和有機(jī)酸水溶液的體積比優(yōu)選為40:60～30:70，在上述數(shù)值范圍下，檢測樣品具有較為合適的保留時(shí)間，色譜峰形較好，有利于實(shí)現(xiàn)1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的分析檢測。

本發(fā)明實(shí)施例使用高效液相色譜法對待測品進(jìn)行含量檢測，在對待測品進(jìn)行含量檢測前，需要使用標(biāo)準(zhǔn)品配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，之后對不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行檢測，以標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為橫坐標(biāo)，檢測所得色譜圖的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出待測品溶液中被測物質(zhì)的濃度，進(jìn)一步計(jì)算出待測品中被測物質(zhì)的含量。

實(shí)際操作中，標(biāo)準(zhǔn)品可以是購買的，也可以是自制的。自制標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)可以將生產(chǎn)的樣品經(jīng)過多次提純，使純度達(dá)到99.0％以上，再扣除水分、溶劑殘留和灼燒殘?jiān)蟮臉悠泛繛闃?biāo)準(zhǔn)品的含量，用來檢測待測樣品的含量。

基于上述檢測原理，本發(fā)明實(shí)施例需要先準(zhǔn)確稱取一定量的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品，使用有機(jī)溶劑對其進(jìn)行稀釋，配制出不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液。具體地，可以使用甲醇作為溶劑對1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行稀釋，配制標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

具有不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液的數(shù)目可以根據(jù)實(shí)際設(shè)定，優(yōu)選地，配制5～8個(gè)不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液。不同標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度差值可以相同，也可以不同。

在配制不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液后，可以使用0.2μm厚的濾膜對配制的不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行過濾。

步驟102、利用安裝有蒸發(fā)光散射檢測器的高效液相色譜儀以及配制的流動(dòng)相，對不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行檢測，根據(jù)測得的各濃度1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積的大小和濃度的對應(yīng)關(guān)系，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

由于1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸不存在生色基團(tuán)、無紫外吸收，因此無法使用紫外吸收檢測器對其進(jìn)行檢測，為了克服上述缺陷，本發(fā)明實(shí)施例使用蒸發(fā)光散射檢測器對該樣品進(jìn)行檢測，蒸發(fā)光散射檢測器的響應(yīng)值與待測物質(zhì)量正相關(guān)，靈敏度較高且具有較好的溫度穩(wěn)定性，同時(shí)具有無溶劑效應(yīng)、干擾少、溶劑兼容性廣泛等特點(diǎn)。

在步驟101執(zhí)行結(jié)束后，得到不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液，將不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液經(jīng)0.2μm厚的濾膜過濾后，注入高效液相色譜儀，使用步驟101配制的流動(dòng)相對不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行測定并分別繪制色譜圖。

針對繪制的各色譜圖，確定色譜圖的峰面積，之后以標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以對應(yīng)的色譜圖的峰面積的大小為縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線，供后續(xù)使用。

實(shí)驗(yàn)過程中，蒸發(fā)光散射檢測器的霧化溫度優(yōu)選為30～90℃，漂移管溫度優(yōu)選為40～90℃，載氣流速優(yōu)選為1.0～1.8bar。

在繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線中，根據(jù)蒸發(fā)光散射檢測器檢測的各濃度1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積的大小與濃度的相關(guān)系數(shù)大于0.999。蒸發(fā)光檢測器的響應(yīng)值與標(biāo)準(zhǔn)品含量間具有較好的線性關(guān)系，在根據(jù)該曲線查找峰面積對應(yīng)的濃度時(shí)，所查濃度較為準(zhǔn)確。

高效液相色譜儀使用的反相色譜固定相可以為zorbaxsb-c18，尺寸為250mm×4.6mm。

步驟103、對1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸待測品進(jìn)行溶液配制，得到待測品溶液，利用高效液相色譜儀測得待測品溶液中1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸待測品的峰面積。

稱取一定量的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸待測品，使用有機(jī)溶劑如甲醇對其進(jìn)行溶解和稀釋，配制一定濃度的待測品溶液。將配制的待測品溶液注入安裝有蒸發(fā)光散射檢測器的高效液相色譜儀，使用由乙腈和有機(jī)酸溶液配制的流動(dòng)相，對待測品溶液進(jìn)行測定，得到該待測品溶液的色譜圖，進(jìn)而確定該色譜圖的峰面積。

步驟104、根據(jù)步驟102制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線，確定步驟103測得的待測品溶液中1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸待測品的峰面積對應(yīng)的待測品濃度，進(jìn)一步計(jì)算出1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸待測品中1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量。

從步驟102制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線中，查找出步驟103確定的待測品溶液中1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸待測品的峰面積對應(yīng)的濃度，確定待測品溶液中被測物質(zhì)的濃度。進(jìn)一步根據(jù)如下計(jì)算公式(i)，計(jì)算出1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸待測品中1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸的含量。含量計(jì)算公式如下：y＝ax²+bx+c，式中，y為待測樣品峰面積，x為待測樣品溶液的峰面積對應(yīng)的濃度，a、b和c均為常數(shù)。

本發(fā)明實(shí)施例提供了一種1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的檢測方法，由于使用蒸發(fā)光散射檢測器，因此實(shí)現(xiàn)了對無紫外吸收的二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸的檢測。利用本發(fā)明實(shí)施例提供的方法可以實(shí)現(xiàn)紫外波段無吸收的樣品測定，該方法為一種通用型的分析檢測方法，具有廣泛的應(yīng)用前景。

本發(fā)明實(shí)施例使用有機(jī)酸水溶液調(diào)節(jié)流動(dòng)相的酸堿性，簡單快速地實(shí)現(xiàn)了1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的定量分析檢測。本發(fā)明實(shí)施例使用蒸發(fā)光散射檢測器對樣品進(jìn)行檢測，具有無溶劑效應(yīng)、干擾少等特點(diǎn)，同時(shí)溶劑兼容性廣泛。

為使本領(lǐng)域技術(shù)人員更好地理解本發(fā)明，以下通過多個(gè)具體的實(shí)施例來說明本發(fā)明實(shí)施例的一種1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的檢測方法。

實(shí)施例1

(1)稱取25mg樣品于50ml容量瓶中，以甲醇為溶劑進(jìn)行樣品溶解。

(2)將步驟(1)所述樣品溶液經(jīng)0.2μm濾膜過濾后，分別以乙腈和水、乙腈和0.2％甲酸水溶液為流動(dòng)相，注入高效液相色譜儀進(jìn)行測定。

儀器與試劑

安捷倫agilent1260高效液相色譜儀。

色譜柱：zorbaxsb-c18250mm*4.6mm，5μm。

蒸發(fā)光散射檢測器的霧化溫度為30～90℃，漂移管溫度為40～90℃，載氣流速為1.0～1.8bar。

試劑：乙腈(色譜純)，蒸餾水(up)，甲酸、乙酸或丙酸(分析純)。

流動(dòng)相比例：v乙腈:v水＝40:60v乙腈:v0.2％甲酸水溶液＝40:60。

流動(dòng)相流速：1.0ml/min。

樣品進(jìn)樣量：20μl。

圖2是使用乙腈和水作為流動(dòng)相，對1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行檢測；圖3是使用乙腈和0.2％甲酸水溶液為流動(dòng)相，對圖2中使用的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行檢測，即兩側(cè)檢測的檢測樣品相同，所使用的流動(dòng)相不同。

對比圖2和圖3可知，以乙腈和水為流動(dòng)相進(jìn)行樣品檢測分離時(shí)，樣品的保留時(shí)間約為2.0min且峰形較差，而以乙腈和0.2％甲酸水溶液為流動(dòng)相進(jìn)行樣品檢測時(shí)，樣品的保留時(shí)間約為5.0min。因此以含0.2％甲酸的流動(dòng)相進(jìn)行樣品分離具有更合適的分離時(shí)間，且其色譜峰形得到明顯改善，相比于乙腈和水的組合形式，乙腈和有機(jī)酸溶液的組合形式為1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸的色譜分離的流動(dòng)相最優(yōu)條件。

通過上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，選取乙腈和有機(jī)酸水溶液作為流動(dòng)相，使用有機(jī)酸溶液調(diào)節(jié)流動(dòng)相的酸堿性，可以實(shí)現(xiàn)1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的有效定量分析檢測。

實(shí)施例2

(1)準(zhǔn)確稱取1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品于50ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度配制得到0.6～0.7mg/ml的樣品溶液，并進(jìn)行梯度稀釋，得一系列樣品濃度分別為0.4858、0.3643、0.2429、0.1214和0.0607mg/ml。

(2)將步驟(1)配制的各濃度的樣品溶液經(jīng)0.2μm濾膜過濾后，注入高效液相色譜儀進(jìn)行測定并繪制得到各濃度的樣品溶液對應(yīng)的色譜圖，進(jìn)一步確定各濃度樣品溶液對應(yīng)的峰面積，以樣品溶液的濃度為橫坐標(biāo)，以對應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制對應(yīng)關(guān)系標(biāo)準(zhǔn)曲線。

(3)準(zhǔn)確稱取21.68mg待測樣品于50ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度配制樣品溶液，經(jīng)0.2μm濾膜過濾后，注入高效液相色譜儀進(jìn)行測定，確定所得色譜圖的峰面積，根據(jù)步驟(2)所得的標(biāo)準(zhǔn)曲線，確定待測樣品溶液的峰面積對應(yīng)的濃度，進(jìn)一步計(jì)算出待測樣品中被測物質(zhì)的含量。

圖4是本發(fā)明實(shí)施例中對不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行檢測的色譜圖。圖4中，曲線a對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為0.0607mg/ml，曲線b對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為0.1214mg/ml，曲線c對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為0.2429mg/ml，曲線d對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為0.3643mg/ml，曲線e對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為0.4858mg/ml，曲線f對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為0.6072mg/ml。圖5是本發(fā)明實(shí)施例對不同濃度的1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

由圖4和圖5可知，依據(jù)蒸發(fā)光檢測器檢測確定的峰面積的大小與標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度間具有較好的線性關(guān)系，擬合曲線的相關(guān)系數(shù)r＝0.9997。依據(jù)該標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測樣品中1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸的含量為15.78％。

儀器與試劑

agilent1260高效液相色譜儀。

色譜柱：zorbaxsb-c18250mm*4.6mm，5μm。

蒸發(fā)光散射檢測器的霧化溫度為30～90℃，漂移管溫度為40～90℃，載氣流速為1.0～1.8bar。

試劑：乙腈(色譜純)，蒸餾水(up)，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2％的甲酸水溶液。

流動(dòng)相：v乙腈:v0.2％甲酸水溶液＝40:60。

流動(dòng)相流速：1.0ml/min。

樣品進(jìn)樣量：20μl。

實(shí)施例3

(1)稱取30mg樣品于50ml容量瓶中，以甲醇為溶劑進(jìn)行樣品溶解。

(2)將步驟(1)所述樣品溶液經(jīng)0.2μm濾膜過濾后，以乙腈和0.1％乙酸水溶液為流動(dòng)相，注入高效液相色譜儀進(jìn)行測定。

儀器與試劑

安捷倫agilent1260高效液相色譜儀。

色譜柱：zorbaxsb-c18250mm*4.6mm，5μm。

蒸發(fā)光散射檢測器的霧化溫度為30～90℃，漂移管溫度為40～90℃，載氣流速為1.0～1.8bar。

試劑：乙腈(色譜純)，蒸餾水(up)，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1％的乙酸水溶液。

流動(dòng)相比例：v乙腈:v0.1％乙酸水溶液＝30:70。

流動(dòng)相流速：1.0ml/min。

樣品進(jìn)樣量：20μl。

實(shí)施例4

(1)稱取30mg樣品于50ml容量瓶中，以甲醇為溶劑進(jìn)行樣品溶解。

(2)將步驟(1)所述樣品溶液經(jīng)0.2μm濾膜過濾后，以乙腈和0.05％丙酸水溶液為流動(dòng)相，注入高效液相色譜儀進(jìn)行測定。

儀器與試劑

agilent1260高效液相色譜儀。

色譜柱：zorbaxsb-c18250mm*4.6mm，5μm。

蒸發(fā)光散射檢測器的霧化溫度為30～90℃，漂移管溫度為40～90℃，載氣流速為1.0～1.8bar。

試劑：乙腈(色譜純)，蒸餾水(up)，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05％的丙酸水溶液。

流動(dòng)相比例：v乙腈:v0.05％丙酸水溶液＝40:80。

流動(dòng)相流速：1.0ml/min。

樣品進(jìn)樣量：20μl。

以上對本發(fā)明所提供的一種1,5-二氧-7ab-甲基-3aa-六氫茚滿-4a-丙酸含量的檢測方法進(jìn)行了詳細(xì)介紹，本文中應(yīng)用了具體個(gè)例對本發(fā)明的原理及實(shí)施方式進(jìn)行了闡述，以上實(shí)施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其核心思想；同時(shí)，對于本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員，依據(jù)本發(fā)明的思想，在具體實(shí)施方式及應(yīng)用范圍上均會(huì)有改變之處，綜上所述，本說明書內(nèi)容不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。