本發(fā)明涉及β-丙氨酸的定量檢測
技術(shù)領域：
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背景技術(shù)：
：β-丙氨酸是自然界中唯一存在的β型氨基酸，在醫(yī)藥、化工、食品、環(huán)境等領域應用廣泛，可合成泛酸、肌肽、帕米磷酸鈉、巴柳氮等，它還可以作為藥劑制備中的沉淀劑，水的凈化絮凝劑，電鍍緩蝕劑，鉛中毒的解毒劑?，F(xiàn)有公開的技術(shù)文獻中，測定β-丙氨酸轉(zhuǎn)化液中β-丙氨酸的含量為柱前衍生后，用c18柱進行液相檢測，此方法需預先處理樣品，步驟較為復雜，耗時長。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種β-丙氨酸的定量檢測方法，能夠快速、準確的測定β-丙氨酸的含量，適于工業(yè)生產(chǎn)中使用，尤其適用于轉(zhuǎn)化液中β-丙氨酸含量的快速測定。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：β-丙氨酸的定量檢測方法，使用高效液相色譜法檢測，所用色譜柱為氨基鍵合硅膠柱，柱溫為30℃；以0.05mol/l的磷酸鹽緩沖溶液為流動相，其ph值為4.0，流速為0.7～1.0ml/min；檢測波長為205nm；檢測步驟為：1）將待測樣品用流動相稀釋制備成為樣品待測液，將β-丙氨酸對照品溶于流動相制備成為對照品溶液；2）將樣品待測液、對照品溶液分別采用相同的檢測條件用高效液相色譜儀檢測，得到樣品待測液色譜圖、對照品溶液色譜圖，通過外標法測算出待測樣品中β-丙氨酸的含量。所述磷酸鹽緩沖溶液為磷酸二氫鉀緩沖溶液。樣品待測液和對照品溶液的色譜柱進樣量均為20μl。優(yōu)選的，所述流動相流速為1.0ml/min。所述對照品溶液按以下方法制得：稱取β-丙氨酸對照品20.0mg于50ml容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度。本發(fā)明還提供了如上所述的β-丙氨酸的定量檢測方法的應用，用于轉(zhuǎn)化液中β-丙氨酸含量的測定。采用上述技術(shù)方案所產(chǎn)生的有益效果在于：本發(fā)明能夠簡便、快速、準確的測定化工生產(chǎn)產(chǎn)物中β-丙氨酸的含量，相比于現(xiàn)有技術(shù)，操作更簡單，耗時更短，適于工業(yè)生產(chǎn)中使用，尤其適用于轉(zhuǎn)化液中β-丙氨酸含量的快速測定。附圖說明圖1是β-丙氨酸轉(zhuǎn)化液一個樣品的色譜圖；圖2是β-丙氨酸對照品的色譜圖。具體實施方式下面對本發(fā)明作進一步詳細的說明。一種轉(zhuǎn)化液中β-丙氨酸的定量檢測方法，其步驟如下：1）配制流動相0.05mlo/l的磷酸二氫鉀緩沖液，調(diào)節(jié)其ph值為4.0，過濾，脫氣；2）調(diào)節(jié)高效液相色譜儀，平衡色譜柱，采用的高效液相色譜儀為日本島津lc-15c，進樣體積為20μl（定量環(huán)），色譜柱采用氨基鍵合硅膠柱，5μm，4.6*250mm；3）對照品溶液的制備：稱取標品β-丙氨酸固體20.0mg至50ml容量瓶中，用流動相定容，即得對照品溶液。4）樣品待測溶液的制備：從轉(zhuǎn)化液中吸取0.5ml，轉(zhuǎn)移至25ml容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度。5）將對照品溶液和樣品待測溶液分別用高效液相色譜法檢測，記錄色譜圖及峰面積，檢測條件為：控制柱溫為30℃；流動相流速：0.7～1.0ml/min；檢測波長：205nm。需要說明的是，本領域技術(shù)人員根據(jù)需要，也可以適當調(diào)整選擇采用其他廠家和型號的高效液相色譜儀、其他粒徑和長度的氨基鍵合硅膠柱以及其他進樣體積，也能達到本發(fā)明的目的。6）含量計算：待測樣品液中β-丙氨酸的含量為：x=c樣×待測樣品的稀釋倍數(shù)=(c對×a樣/a對)×待測樣品的稀釋倍數(shù)，式中：c對為對照品溶液中β-丙氨酸的濃度，單位為mg/ml；a對為對照品溶液色譜圖的峰面積或峰高；a樣為樣品待測液色譜圖的峰面積或峰高；c樣為樣品待測液中待測溶液的濃度，單位為mg/ml。實施例1-3實施例1-3分別取不同生產(chǎn)批次β-丙氨酸轉(zhuǎn)化液樣品0.5ml，按上述方法測量，測量數(shù)據(jù)見下表。實施例稀釋步驟c對（mg/ml）a對a樣x（mg/ml）10.5ml→25ml0.40564441231646037.5220.5ml→25ml0.405644412328652813.0830.5ml→25ml0.405644412327631912.62供試品溶液色譜圖見圖1所示：9.208min為β-丙氨酸的峰，其余的為雜峰，主峰的出峰時間適宜、理論塔板數(shù)大于5000，且與雜峰分離度良好。對照品溶液色譜圖見圖2所示，9.202min為β-丙氨酸的峰。以上對本發(fā)明進行了詳細介紹，本發(fā)明中應用具體個例對本發(fā)明的實施方式進行了闡述，以上實施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明，應當指出，對于本
技術(shù)領域：
的技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可對本發(fā)明進行若干改進，這些改進也落入本發(fā)明權(quán)利要求的保護范圍內(nèi)。當前第1頁12