本發(fā)明涉及一種醫(yī)用腦脊液質(zhì)控品的制備方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)無淋巴液，而代之為腦脊液，腦脊液是充滿腦室系統(tǒng)、蛛網(wǎng)膜下隙和脊髓中央管內(nèi)的無色透明液體，其內(nèi)含多種濃度不等的無機離子、葡萄糖、微量蛋白和少量淋巴細胞，ph為7.4，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)起緩沖、保護、運輸代謝產(chǎn)物和調(diào)節(jié)顱內(nèi)壓等作用。腦脊液總量在成人平均約150ml。
臨床檢驗中腦脊液生化檢驗和常規(guī)檢驗是用于診療中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腦膜疾病的重要指標，是指導(dǎo)臨床用藥的重要依據(jù)。腦脊液化學成分的改變不僅能直接影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能，也反映其功能狀態(tài)和病變情況。腦脊液生物化學檢驗包括蛋白質(zhì)、葡萄糖、氯化物、乳酸等，腦脊液常規(guī)檢驗包括潘氏試驗、細胞總數(shù)、細胞分類等，在臨床檢驗工作中由于沒有合適的質(zhì)控品，往往實驗室管理人員難以監(jiān)測檢驗質(zhì)量。市售的質(zhì)控品多為國外生產(chǎn)，不僅很難購買且價格昂貴，保質(zhì)期短，不適用于常規(guī)使用。因此，根據(jù)臨床檢驗需求，有必要研制一種價格便宜、方便實惠的腦脊液質(zhì)控品，以解決常規(guī)檢驗的質(zhì)量控制問題。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
針對現(xiàn)有技術(shù)存在的上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種制作簡單易行、成本低、易于保存的醫(yī)用腦脊液質(zhì)控品的制備方法，該腦脊液質(zhì)控品與人體的腦脊液滲透壓、離子濃度以及ph值近似，可應(yīng)用于臨床檢驗常規(guī)工作和教學。
本發(fā)明的技術(shù)方案：一種醫(yī)用腦脊液質(zhì)控品的制備方法，包括以下步驟：
(1)自配腦脊液：按質(zhì)量份計算，將氯化鈉6.0～6.5g、氯化鉀0.2～0.3g、氯化鈣0.2～0.4g、氯化鎂0.3～0.5g、碳酸氫鈉1.5～2.0g、葡萄糖0.2～0.8g、磷酸氫二鈉0.2～0.5g以及用市售0.01mol/l、ph7.2-7.4的pbs磷酸鹽緩沖液以蒸餾水2000ml復(fù)溶，充分混勻，然后用20～75μm篩網(wǎng)過濾，將濾液高壓滅菌后得到自配腦脊液，最后通入5％的co2和95％空氣平衡，備用；
(2)配制白細胞懸液：取健康人edta-k2抗凝血2～3ml，加入4～6％右旋糖酐1～2ml，混勻，靜置30～50分鐘，待紅細胞下沉后吸取含大量白細胞的上液于另一試管中，向試管內(nèi)加入1～3％鹽酸(溶解紅細胞)混勻后離心，棄上液，將試管底部的白細胞用生理鹽水洗滌2～3次，制成白細胞懸液；
(3)配制細胞陽性質(zhì)控品：向步驟(1)所述的自配腦脊液中加入健康人混合血清，然后在56℃的溫度下加熱30分鐘滅活，血清終濃度調(diào)整為5～20％，取3～5ml的血清以及步驟(2)提取的白細胞懸液2ml充分混勻后得到腦脊液質(zhì)控品，然后用dmem培養(yǎng)基保存細胞形態(tài)，置于4℃冰箱保存。
進一步，向步驟(1)所述的自配腦脊液中加入濃度為20％的人血蛋白2～5ml以及濃度為20％的葡萄糖液2～5ml，充分混勻后得到腦脊液質(zhì)控品，然后置于4℃冰箱保存。
進一步，所述的dmem培養(yǎng)基是由低糖dmem干粉13.4g、碳酸氫鈉3.7g、l-谷氨酰胺0.2g以及超純水1000ml混勻而成。
由于采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明的優(yōu)點在于：本發(fā)明利用氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣腦等常規(guī)試劑自配腦脊液，取材方便，制備過程簡單，成本較低，而且所制得的腦脊液質(zhì)控品與人體的腦脊液滲透壓、離子濃度以及ph值近似，可應(yīng)用于臨床檢驗常規(guī)工作和教學。
具體實施方式
為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明。
實施例1
本發(fā)明的一種醫(yī)用腦脊液質(zhì)控品的制備方法，包括以下步驟：
(1)自配腦脊液：按質(zhì)量份計算，將氯化鈉6.0g、氯化鉀0.2g、氯化鈣0.2g、氯化鎂0.3g、碳酸氫鈉1.5g、葡萄糖0.2g、磷酸氫二鈉0.2g以及用市售0.01mol/l、ph7.2-7.4的pbs磷酸鹽緩沖液以蒸餾水2000ml復(fù)溶，充分混勻，然后用20μm篩網(wǎng)過濾，將濾液高壓滅菌后得到自配腦脊液，最后通入5％的co2和95％空氣平衡，備用；
(2)配制白細胞懸液：取健康人edta-k2抗凝血2ml，加入4％右旋糖酐1ml，混勻，靜置30分鐘，待紅細胞下沉后吸取含大量白細胞的上液于另一試管中，向試管內(nèi)加入1％鹽酸(溶解紅細胞)混勻后離心，棄上液，將試管底部的白細胞用生理鹽水洗滌2次，制成白細胞懸液；
(3)配制細胞陽性質(zhì)控品：向步驟(1)所述的自配腦脊液中加入健康人混合血清，然后在56℃的溫度下加熱30分鐘滅活，血清終濃度調(diào)整為5％，取3ml的血清以及步驟(2)提取的白細胞懸液2ml充分混勻后得到腦脊液質(zhì)控品，然后用dmem培養(yǎng)基保存細胞形態(tài)，置于4℃冰箱保存即可。所述的dmem培養(yǎng)基是由低糖dmem干粉13.4g、碳酸氫鈉3.7g、l-谷氨酰胺0.2g以及超純水1000ml混勻而成。
本發(fā)明利用氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣腦等常規(guī)試劑自配腦脊液，取材方便，制備過程簡單，成本較低，而且所制得的腦脊液質(zhì)控品與人體的腦脊液滲透壓、離子濃度以及ph值近似，可應(yīng)用于臨床檢驗常規(guī)工作和教學。
實施例2
本發(fā)明的一種醫(yī)用腦脊液質(zhì)控品的制備方法，包括以下步驟：
(1)自配腦脊液：按質(zhì)量份計算，將氯化鈉6.0～6.5g、氯化鉀0.2～0.3g、氯化鈣0.2～0.4g、氯化鎂0.3～0.5g、碳酸氫鈉1.5～2.0g、葡萄糖0.2～0.8g、磷酸氫二鈉0.2～0.5g以及用市售0.01mol/l、ph7.2-7.4的pbs磷酸鹽緩沖液以蒸餾水2000ml復(fù)溶，充分混勻，然后用20～75μm篩網(wǎng)過濾，將濾液高壓滅菌后得到自配腦脊液，最后通入5％的co2和95％空氣平衡，備用；
(2)向步驟(1)所述的自配腦脊液中加入濃度為20％的人血蛋白2～5ml以及濃度為20％的葡萄糖液2～5ml，充分混勻后得到腦脊液質(zhì)控品，然后置于4℃冰箱保存。
本發(fā)明利用氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣腦等常規(guī)試劑自配腦脊液，取材方便，制備過程簡單，成本較低，而且所制得的腦脊液質(zhì)控品與人體的腦脊液滲透壓、離子濃度以及ph值近似，可應(yīng)用于臨床檢驗常規(guī)工作和教學。