本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種凝膠制劑質(zhì)量控制方法。

背景技術(shù)：

凝膠制劑由藥物溶解或均勻分散于凝膠中制成。因凝膠能與作用部位緊密黏附，有較好的生物相容性，多通過皮膚、黏膜給藥，也可通過口服發(fā)揮藥效。由于凝膠吸水溶脹后形成的水化凝膠層對藥物有一定的控制釋放作用，現(xiàn)廣泛用于緩釋、控釋系統(tǒng)。對于制備得到的凝膠制劑，質(zhì)量的控制十分重要，但是目前還沒有一種有效的、針對主要成分是主要藥物成分聚篩蕊提取物的凝膠制劑的質(zhì)量控制方法。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明旨在提供一種凝膠制劑質(zhì)量控制方法，以聚篩蕊藥材、巴巴酸對照品檢查制劑中主要藥物成分聚篩蕊提取物，方法簡便、宜操作，有較好的專屬性。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種凝膠制劑質(zhì)量控制方法，包括如下步驟：

s1檢查

1.1)對照品溶液制備

稱取巴巴酸對照品加甲醇溶劑定容到容量瓶中，制備成每1ml含0.101mg的溶液，作為對照品溶液；

1.2)稱取聚篩蕊藥材置于錐形瓶中，加入丙酮溶液，置水浴鍋加熱回流，提取液濾過，水浴揮干，所得的浸膏用v甲醇：v丙酮＝1:1的甲醇和丙酮的混合溶劑溶解，溶液濾過，取過濾液作為聚篩蕊對照藥材溶液；

1.3)稱取制備好的待測凝膠制劑置于三角燒瓶中，加入v乙腈：v0.1％磷酸＝80:20的乙腈和0.1％磷酸的混合溶液，稱重，加熱超聲20min，冷卻，稱定重量，用所述乙腈和0.1％磷酸的混合溶液補足損失的重量，離心12min，取上清液作為凝膠制劑供試品溶液；

1.4)按照薄層色譜的方法試驗，將所述對照品溶液、聚篩蕊對照藥材溶液和凝膠制劑供試品溶液，分別點于同一硅膠薄層板，用以v環(huán)己烷：v乙酸乙酯：v冰醋酸＝4∶1∶0.25的環(huán)己烷、乙酸乙酯和冰醋酸混合的展開劑展開；取出晾干，噴以10％的硫酸溶液，加熱顯色；在薄層色譜展開相同的位置，對照品溶液、對照藥材溶液和供試品溶液應(yīng)顯相同顏色斑點；

s2巴巴酸含量測定

2.1)確定色譜條件

diamonsilc18(2)柱：250mmx4.6mm，5μl；流動相：v乙腈：v0.1％磷酸＝80:20的乙腈和0.1％磷酸的混合溶液；流速：1ml/min；檢測波長：278nm；柱溫：300℃；進樣量：10μl；

2.2)對照品溶液的制備

稱取巴巴酸對照品置于容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，配成為0.1mg/ml的巴巴酸對照品溶液；

2.3)供試品的制備

稱取待測凝膠制劑置于具塞錐形瓶中，加入所述乙腈和0.1％磷酸的混合溶液，并稱定重量，超聲20min，取出放冷，稱定重量，以所述乙腈和0.1％磷酸的混合溶液補足重量，搖勻后，置入離心管中，高速離心，取上清液濾過，得供試品溶液；

2.4)按照高效液相色譜法，取步驟2.2)中得到的巴巴酸對照品溶液和步驟2.3)中得到的供試品溶液分別進樣，按步驟2.1)中的色譜條件測定，測得的峰面積并計算含量；待測凝膠制劑所含浸提物以巴巴酸計算應(yīng)不低于1.1mg/g。

進一步地，還包括有檢查待測凝膠制劑形狀的步驟：應(yīng)呈淡綠色的粘稠體，稠度適中，涂展均勻。

進一步地，步驟1.1)具體如下：稱取巴巴酸對照品1.01mg加甲醇溶劑定容到10ml的容量瓶中，制備成每1ml含0.101mg的溶液，作為對照品溶液。

進一步地，步驟1.2)具體為：稱取10g的聚篩蕊藥材置于250ml的錐形瓶中，加入150ml的丙酮溶液，置水浴鍋加熱回流2h，提取液濾過，水浴揮干，所得的浸膏以30ml所述甲醇和丙酮的混合溶劑溶解，溶液濾過，取過濾液作為聚篩蕊對照藥材溶液。

進一步地，步驟1.3)具體為：稱取制備好的待測凝膠制劑5.027g，置于三角燒瓶中，加入20ml的所述乙腈和0.1％磷酸的混合溶液，稱重，加熱超聲20min，冷卻，稱定重量，用所述乙腈和0.1％磷酸的混合溶液補足損失的重量，離心12min，取上清液作為凝膠制劑供試品溶液。

進一步地，步驟2.2)具體為：精密稱取巴巴酸對照品5.0mg，置于50ml的容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，配成為0.1mg/ml的巴巴酸對照品溶液。

進一步地，步驟2.3)具體為：精密稱取待測凝膠制劑1g，置于25ml的具塞錐形瓶中，精密加入20ml所述乙腈和0.1％磷酸的混合溶液，并稱定重量，超聲20min，取出放冷，稱定重量，以所述乙腈和0.1％磷酸的混合溶液補足重量，搖勻后，置入50ml的離心管中，高速離心12min，取上清液微孔濾膜濾過，得供試品溶液。

本發(fā)明的有益效果在于：對于以聚篩蕊藥材為主要成分的凝膠制劑給出了有效的質(zhì)量控制方法，以聚篩蕊藥材、巴巴酸對照品檢查凝膠制劑中主要藥物成分聚篩蕊提取物，方法簡便、宜操作，有較好的專屬性。

附圖說明

圖1為本發(fā)明的薄層色譜展開示意圖；

圖2a、圖2b和圖2c分別是本發(fā)明的巴巴酸對照品溶液、凝膠制劑供試品溶液和陰性對照品溶液的高效液相色譜圖譜。

圖3為巴巴酸對照品溶液的紫外圖譜；

圖4a-圖4e分別為不同濃度線性范圍的考察的結(jié)果色譜圖，圖4f為線性關(guān)系考察曲線示意圖；

圖5a-圖5f分別表示6次精密度測定的實驗圖譜；

圖6a-6f分別表示在0h、2h、4h、6h、8h、10h將供試品溶液注入高效液相色譜儀的穩(wěn)定性實驗圖譜；

圖7a-圖7f分別表示6次重復(fù)實驗的實驗圖譜；

圖8a-圖8g分別為加樣回收率實驗的實驗圖譜，其中圖8a所示為空白對照試驗圖譜，圖8b-圖8g分別表示6次實驗的實驗圖譜。

圖9為巴巴酸對照品制備流程圖；

圖10為巴巴酸對照品的質(zhì)譜圖。

具體實施方式

以下將結(jié)合附圖對本發(fā)明作進一步的描述，需要說明的是，本實施例以本技術(shù)方案為前提，給出了詳細(xì)的實施方式和具體的操作過程，但本發(fā)明的保護范圍并不限于本實施例。

一種凝膠制劑質(zhì)量控制方法，包括如下步驟：

s1檢查

1.1)對照品和對照品溶液制備

巴巴酸對照品由貴州省中科院天然藥物化學(xué)分析重點實驗室分離純化所得，純度為97％，分離純化流程圖如圖9所示，質(zhì)譜圖如圖10所示。稱取巴巴酸對照品加甲醇溶劑定容到容量瓶中，制備成每1ml含0.101mg的溶液，作為對照品溶液；

1.2)稱取10g的聚篩蕊藥材置于250ml的錐形瓶中，加入150ml的丙酮溶液，置水浴鍋加熱回流2h，提取液濾過，水浴揮干，所得的浸膏以30ml的甲醇∶丙酮＝1∶1(體積比)的溶劑溶解，溶液濾過，取過濾液作為聚篩蕊對照藥材溶液；

1.3)稱取制備好的待測凝膠制劑5.027g，置于三角燒瓶中，加入20ml的乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液，稱重，加熱超聲20min，冷卻，稱定重量，用乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液補足損失的重量，離心12min，取上清液作為凝膠制劑供試品溶液；

1.4)按照薄層色譜的方法試驗，將所述對照品溶液、聚篩蕊對照藥材溶液和凝膠制劑供試品溶液，分別點于同一硅膠薄層板，以環(huán)己烷∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝4∶1∶0.25(體積比)的展開劑展開；取出晾干，噴以10％的硫酸溶液，加熱顯色；在薄層色譜展開相同的位置，對照品溶液、對照藥材溶液和供試品溶液應(yīng)顯相同顏色斑點；

s2巴巴酸含量測定

2.1)確定色譜條件

diamonsilc18(2)柱：250mmx4.6mm，5μl；流動相：乙腈：0.1％磷酸溶液＝80∶20(體積比)；流速：1ml/min；檢測波長：278nm；柱溫：300℃；進樣量：10μl；

2.2)對照品溶液的制備

精密稱取巴巴酸對照品5.0mg，置于50ml的容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，配成為0.1mg/ml的巴巴酸對照品溶液。

2.3)供試品的制備

精密稱取待測凝膠制劑1g，置于25ml的具塞錐形瓶中，精密加入20ml乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液，并稱定重量，超聲20min，取出放冷，稱定重量，以乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液補足重量，搖勻后，置入離心管中，高速離心，取上清液微孔濾膜濾過，得供試品溶液；

2.4)按照高效液相色譜法，取步驟2.2)中得到的巴巴酸對照品溶液和步驟2.3)中得到的供試品溶液分別進樣，按步驟2.1)中的色譜條件測定，測得的峰面積并計算含量；凝膠制劑所含浸提物以巴巴酸計算應(yīng)不低于1.1mg/g。

需要說明的是，在檢查步驟和巴巴酸含量測定步驟之前，先檢查凝膠制劑形狀的步驟：凝膠劑應(yīng)呈淡綠色的粘稠體，稠度適中，涂展均勻。

本發(fā)明適用于以聚篩蕊藥材為主要成分的凝膠制劑的質(zhì)量控制。在本實施例中，參與性能實驗的凝膠制劑的組分以重量份1000份計包括：聚篩蕊提取物100份；卡波姆11份；丁二醇200份；甘油160份；吐溫10份；ve0.25份；三乙醇胺1.2份；玫瑰精油1.5份；蒸餾水余量。

制備方法包括如下步驟：

s1稱取聚篩蕊藥材粉碎，以丙酮回流提取2h，過濾，濃縮成稠膏狀，得到聚篩蕊提取物；聚篩蕊藥材和丙酮的料液比為1:15(g/ml)；

s2取卡波姆置入適量蒸餾水中，靜置過夜，使其充分溶脹，然后往其中加入甘油、吐溫、丁二醇和ve并攪勻；加入聚篩蕊提取物，攪勻；再加入玫瑰精油和三乙醇胺，調(diào)節(jié)ph至6.0～7.0；加蒸餾水調(diào)整到1000份，攪拌均勻，分裝即得。

以下將通過實驗對本發(fā)明方法的性能進行分析

一、關(guān)于檢查步驟的性能：

1)巴巴酸對照品溶液制備

取巴巴酸對照品1.01mg加甲醇溶劑定容到10ml的容量瓶，制備成每1ml含0.101mg的溶液，作為對照品溶液。

2)對照藥材溶液制備

稱取10g的聚篩蕊藥材置于250ml的錐形瓶中，加入150ml的丙酮溶液，置水浴鍋加熱回流2h，提取液濾過，水浴揮干，所得的浸膏以30ml的甲醇∶丙酮＝1∶1(體積比)溶劑溶解，溶液濾過，取過濾液作為聚篩蕊對照藥材溶液。

3)供試品溶液制備

稱取制備好的凝膠制劑5.027g，置于三角燒瓶中，加入20ml的乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液，稱重，加熱超聲20min，冷卻，稱定重量，用乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液補足損失的重量，離心12min，取上清液作為凝膠制劑供試品溶液。

4)陰性對照溶液制備

稱取不含聚篩蕊的凝膠制劑5.033g在三角瓶中，加入20ml的乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液，稱重，加熱超聲20min，冷卻，稱定重量，用乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液補足重量，離心12min，取上清液作為陰性對照品溶液。

5)薄層色譜展開

按照薄層色譜的方法試驗，將上述對照品溶液、對照藥材溶液、陰性對照溶液和供試品溶液，分別點于同一硅膠薄層板，以環(huán)己烷∶乙酸乙酯∶冰醋酸＝4∶1∶0.25(體積比)為展開劑展開。取出晾干，噴以10％的硫酸溶液，加熱顯色，結(jié)果顯示對照品溶液、聚篩蕊對照藥材溶液和凝膠制劑供試品溶液顯相同顏色斑點，陰性對照溶液在相同展開位置無斑點，如圖1所示。其中1對應(yīng)對照品溶液，2對應(yīng)聚篩蕊對照藥材溶液；3和4對應(yīng)凝膠制劑供試品溶液，5對應(yīng)陰性對照品。

二、關(guān)于巴巴酸含量檢測步驟的性能：

1、實驗條件：

1)色譜條件

diamonsilc18(2)柱(250mmx4.6mm5μl)；流動相：乙腈-0.1％磷酸溶液(80∶20體積比)；流速：1ml/min；檢測波長：278nm；柱溫：300℃；進樣量：10μl。

2)測試溶液制備

對照品溶液的制備

精密稱取巴巴酸對照品5.0mg，置于50ml的容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，配成為0.1mg/ml的巴巴酸對照品溶液。巴巴酸對照品溶液的紫外圖譜如圖3所示。

供試品溶液的制備

精密稱取凝膠制劑1g，置于25ml的具塞錐形瓶中，精密加入20ml的乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液，并稱定重量，超聲20min，取出放冷，稱定重量，以乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液補足重量，搖勻后，置入50ml的離心管中，高速離心12min，取上清液微孔濾膜濾過，得供試品溶液。

陰性對照品溶液的制備

精密稱取空白凝膠制劑(不含聚篩蕊)1g，置于25ml的具塞錐形瓶中，精密加入20ml的乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液，并稱定重量，超聲20min，取出放冷，稱定重量，以乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液補足重量，搖勻后，置入50ml的離心管中，高速離心12min，取上清液微孔濾膜濾過，得陰性對照品溶液。

2、色譜條件研究

按上述色譜條件，取巴巴酸對照品溶液、供試品溶液和陰性對照品溶液分別注入色譜儀中，實驗結(jié)果顯示，供試品溶液中的主要成分出峰的保留時間和巴巴酸對照品溶液出峰的保留時間是一致的，陰性對照品溶液在相同保留時間未見吸收，如圖2a-圖2c所示。

3、線性范圍的考察

精密稱取巴巴酸對照品5.6mg，置10ml的容量瓶中，然后加5.6ml甲醇溶成1mg/ml的巴巴酸對照品溶液，精密吸取巴巴酸對照品溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、1ml分別置于10ml容量瓶中，加入甲醇溶液溶解稀釋至刻度，配成10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、100μg/ml，按上述色譜條件，進樣測定，以巴巴酸對照品溶液的濃度(c,μg/ml)為橫坐標(biāo)，峰面積(a)為縱坐標(biāo)進行線性回歸，所測得的回歸方程是y＝34.509x-26.78(r＝0.9993)，結(jié)果在10μg/ml～100μg/ml之間與峰面積呈現(xiàn)較好的線性關(guān)系，如表1所示。色譜圖如圖4a-4f所示，圖4a-4e分別表示濃度為10.0μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、100μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)曲線實驗圖譜，圖4f則為線性關(guān)系考察曲線示意圖。

表1色譜條件下測定巴巴酸線性范圍試驗結(jié)果

4、精密度實驗

精密吸取巴巴酸對照品溶液(40.0μg/ml)按上述色譜條件，進樣測定，連續(xù)6次，按照測定的峰面積，計算出平均峰面積值為1321.0，rsd為0.3％，結(jié)果表明試驗所用的色譜條件精密度良好，如表2所示。色譜圖如圖5a-圖5f所示，圖5a-圖5f分別表示6次測定的實驗圖譜。

表2色譜條件下測定巴巴酸精密度試驗結(jié)果

5、穩(wěn)定性實驗

精密吸取供試品溶液按上述色譜條件，分別于0h、2h、4h、6h、8h、10h注入高效液相色譜儀，測定不同時間段的峰面積，結(jié)果表明在10h內(nèi)巴巴酸的平均峰面積為2279.6，rsd為0.2％(n＝6)，結(jié)果表明供試品溶液在10h之內(nèi)穩(wěn)定性良好，見表3。色譜圖如圖6a-6f所示。圖6a-6f分別表示在0h、2h、4h、6h、8h、10h將供試品溶液注入高效液相色譜儀的實驗圖譜。

表3色譜條件下測定巴巴酸穩(wěn)定性試驗結(jié)果

6、重復(fù)性實驗

取同一凝膠制劑6份，每份1g，精密稱定，分別置于25ml的具塞錐形瓶中，精密加入20ml乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液，稱定重量，超聲20min，放冷，再稱定重量，用乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液補足損失的重量，搖勻后，置50ml的離心管中，高速離心12min，取上清微孔濾膜濾過，按上述色譜條件，注入高效液相色譜儀中測定，以測得的峰面積計算含量，每克凝膠制劑含有巴巴酸1.29mg，rsd為2.90％(n＝6)，結(jié)果表明重現(xiàn)性好，結(jié)果如表4所示。色譜圖如圖7a-圖7f所示，圖7a-圖7f分別表示6次實驗的實驗圖譜。

表4色譜條件下測定巴巴酸重復(fù)性試驗結(jié)果

7、加樣回收率實驗

稱取已知含量的供試品(含量為1.29mg/g)6份，每份量為0.5g，精密稱定，分別加入已知含量的巴巴酸對照品，置于25ml的具塞錐形瓶中，精密加入20ml的乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液，稱定重量，超聲20min，放冷，稱定重量，用乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液補足重量，搖勻后，置50ml的離心管中，高速離心12min，取上清微孔濾膜濾過，按上述色譜條件，注入高效液相色譜儀中測定，計算回收率和rsd％值，平均回收率為99.36％，rsd為1.69％(n＝6)，結(jié)果如表5所示。色譜圖如圖8a-圖8g所示,圖8a所示為空白對照試驗圖譜，圖8b-圖8g分別表示試驗1-6的實驗圖譜。

表5色譜條件下測定巴巴酸加樣回收試驗結(jié)果

8、樣品的測定

精密稱取10個不同批次的凝膠制劑各1g，分別置于25ml的具塞錐形瓶中，精密加入20ml的乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)溶液，稱定重量，超聲20min，取出放冷，再稱定重量，以乙腈∶0.1％磷酸＝80∶20(體積比)的溶液補足重量，搖勻后，置50ml的離心管中，高速離心12min，取上清微孔濾膜濾過，即得供試品溶液。

分別取供試品溶液注入高效液相色譜儀測定，以峰面積分別計算10個樣品巴巴酸含量，試驗結(jié)果如表6所示。

表610批樣品測定試驗結(jié)果

對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，可以根據(jù)以上的技術(shù)方案和構(gòu)思，作出各種相應(yīng)的改變和變形，而所有的這些改變和變形都應(yīng)該包括在本發(fā)明權(quán)利要求的保護范圍之內(nèi)。