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一種正相液相色譜?串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)口含煙中煙堿旋光異構(gòu)體的方法與流程

文檔序號(hào):12784726閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種正相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)口含煙中煙堿旋光異構(gòu)體的方法,其特征在于:首先對(duì)口含煙中的煙堿進(jìn)行提取,采用手性色譜柱實(shí)現(xiàn)煙堿旋光異構(gòu)體的分離,柱后高壓輸液泵引入異丙醇并進(jìn)行分流,結(jié)合串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行分析測(cè)定,具體步驟如下:

a、口含煙中煙堿的萃取:

首先對(duì)口含煙進(jìn)行預(yù)處理,稱(chēng)取處理后的口含煙樣品0.1~0.5g,加入1~5 mL 5.0%NaOH溶液,靜置5~30 min,準(zhǔn)確加入含有內(nèi)標(biāo)的正己烷溶液10~50 mL,超聲萃取5~30 min,取上層清液過(guò)有機(jī)相濾膜,有機(jī)相濾膜上加有1~3.0 g無(wú)水硫酸鈉,凈化后的樣品溶液進(jìn)正相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析;

b、樣品的分析:

液相色譜條件:采用正相液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析,所用色譜柱為手性色譜柱;柱溫:30 oC;流動(dòng)相A:含有堿性添加劑的正己烷,流動(dòng)相B:異丙醇;等度洗脫;流速0.5~1.0 mL/min;進(jìn)樣體積10 μL,分析時(shí)間為17 min;

柱后加入異丙醇及分流:在柱后通過(guò)三通閥連接,采用安捷倫高壓輸液泵引入異丙醇,控制異丙醇流速,同時(shí),采用離子源上配置的三通閥進(jìn)行柱后分流,通過(guò)控制PEEK管的長(zhǎng)度,控制分流比;

離子源:電噴霧電離源(ESI);掃描方式:正離子掃描;檢測(cè)方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)MRM;電噴霧電壓:5000 V;氣簾氣壓力:30 psi;輔助氣1壓力:70 psi;輔助氣2壓力:70 psi;離子源溫度:550 oC。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)口含煙中煙堿旋光異構(gòu)體的方法,其特征在于:所述口含煙包括以下類(lèi)型口含煙:袋裝口含煙、含化型口含煙、膠基型口含煙;所述口含煙預(yù)處理方式如下:袋裝口含煙直接剪碎,含化型口含煙碾磨成粉,膠基型口含煙碾成片狀并剪碎。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)口含煙中煙堿旋光異構(gòu)體的方法,其特征在于:步驟a中,采用外消旋的d3-煙堿為內(nèi)標(biāo),d3-S-(-)-煙堿和d3-R-(+)-煙堿合并計(jì)算,濃度范圍為1~10 mg/mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)口含煙中煙堿旋光異構(gòu)體的方法,其特征在于:步驟b中,所述的手性色譜柱為大賽璐手性色譜柱CHIRALPAK? IC,規(guī)格為4.6 mm×250 mm,i.d. 5 μm。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)口含煙中煙堿旋光異構(gòu)體的方法,其特征在于:所述堿性流動(dòng)相添加劑為二乙胺,添加量為正己烷質(zhì)量的0.02%~0.2%。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)口含煙中煙堿旋光異構(gòu)體的方法,其特征在于:所述的等度洗脫條件為A: B = 95:5。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)口含煙中煙堿旋光異構(gòu)體的方法,其特征在于:柱后加入異丙醇流速為0.1~1.0 mL/min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)口含煙中煙堿旋光異構(gòu)體的方法,其特征在于:柱后分流比例為1:3~1:5。

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