本發(fā)明屬于食品、藥品、保健食品檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種食品、藥品、保健食品中化學(xué)成分拉非及其衍生物快速檢測(cè)和檢測(cè)卡的研制方法。
背景技術(shù)：
1、術(shù)語(yǔ)解釋：
食品中危害因子及非法添加藥物智能化綜合檢測(cè)儀：簡(jiǎn)稱為檢測(cè)儀，又可稱手持式食品安全快速檢測(cè)儀，利用反射光譜與顯色物跟檢測(cè)成分濃度呈比例的原理，通過(guò)內(nèi)部公式計(jì)算得到檢測(cè)成分的濃度數(shù)值的儀器。
拉非及其衍生物特指：他達(dá)拉非、氨基他達(dá)拉非以及甲基被氨基、c1-6烷基、c1-6烷氧等基團(tuán)取代的化合物。
2、現(xiàn)有技術(shù)
近年來(lái)，人們對(duì)自身的養(yǎng)生越來(lái)越重視。但是市場(chǎng)上標(biāo)示各種功能的保健食品、功能性藥品、食品魚(yú)龍混雜，不法分子公然制假售假，為了使原本不具有治療作用的保健品、食品或宣稱為純中藥制劑的功能性藥品達(dá)到某一種療效，他們?cè)谄渲刑砑痈鞣N化學(xué)藥物，欺騙消費(fèi)者，以獲取高額利潤(rùn)。有不法分子在標(biāo)示無(wú)危害的食品、功能性藥品、保健食品中違禁添加壯陽(yáng)類化學(xué)藥物pde5型抑制劑拉非及其拉非衍生物，如他達(dá)拉非(品牌名：西力士cialis)和氨基他達(dá)拉非等。違禁添加化學(xué)藥物他達(dá)拉非和氨基他達(dá)拉非的這些產(chǎn)品，會(huì)對(duì)用戶的身體健康造成傷害，比如冠心病、高血壓、腦血栓等心血管疾病患者在不知情的情況下服用該制劑，由于對(duì)化學(xué)藥品的用法用量無(wú)法控制等原因，易引起心肌梗死，甚至有可能造成突然死亡的后果。
在國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局關(guān)于市場(chǎng)上查獲的31種假冒保健食品并涉嫌違法添加藥物成分的通告(2015年第88號(hào))中，就提到假冒深圳市寶和堂保健品有限公司生產(chǎn)的御和坊牌海狗膠囊(批次：2014/06/05)，檢出違禁添加他達(dá)拉非。
目前檢測(cè)他達(dá)拉非、氨基他達(dá)拉非等拉非類衍生物的方法多為高效液相色譜法、液-質(zhì)聯(lián)用法、uplc-ms/ms法(超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用)、化學(xué)方法、快檢定性法等方法。儀器方法存在的共同問(wèn)題是：檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng)、操作復(fù)雜、對(duì)檢測(cè)人員專業(yè)素質(zhì)要求高，因而基層推廣應(yīng)用困難，使用范圍受到局限；采用目測(cè)比色易出現(xiàn)誤檢及漏檢等問(wèn)題，且只能對(duì)保健食品進(jìn)行他達(dá)拉非、氨基他達(dá)拉非的定性粗篩，不能準(zhǔn)確判定拉非及其衍生物的含量。
與本方案相近的申請(qǐng)?zhí)枮?00910040854.1的專利《一種藥品、保健食品和食品中拉非類pde5型抑制劑的快速檢測(cè)方法》存在的不足之處是，該專利只能進(jìn)行目測(cè)判定，易出現(xiàn)誤判、漏判的問(wèn)題；專利申請(qǐng)?zhí)枮?00710064562.2的專利《一種檢測(cè)他達(dá)拉非及其衍生物的方法》存在的不足為目測(cè)判定，易出現(xiàn)漏檢問(wèn)題，且樣品前處理過(guò)于復(fù)雜，不適用于基層現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的需求。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為了解決現(xiàn)有的針對(duì)保健食品、功能性藥品、食品中拉非及其衍生物快檢方法中存在的誤檢漏檢、只能定性檢測(cè)；儀器方法中存在的檢測(cè)成本高、耗時(shí)長(zhǎng)、對(duì)人員專業(yè)素質(zhì)要求高及樣品前處理復(fù)雜繁瑣等問(wèn)題，本發(fā)明提供一種保健食品、藥品、食品中化學(xué)成分拉非及其衍生物快速檢測(cè)法及檢測(cè)卡研制方法。利用所述檢測(cè)卡，依據(jù)所述檢測(cè)方法，可現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)保健食品、功能性藥品、食品中拉非及其衍生物的含量；大幅度降低誤檢與漏檢率。
為實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
一種化學(xué)成分拉非及其衍生物快速檢測(cè)方法，所述方法首先用提取液浸泡待測(cè)樣品，充分混勻后靜置；其次，取上層清液用微孔濾膜進(jìn)行過(guò)濾，濾液為待檢樣品處理液；第三，取濾液若干，加入4倍體積的檢測(cè)液混勻后，靜置顯色；第四，將50微升混合液移取到檢測(cè)卡觀察窗中間位置，計(jì)時(shí)一分鐘后在儀器上讀取檢測(cè)結(jié)果。所述方法適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)食品、藥品、保健食品中拉非及其衍生物。
所述提取液為有機(jī)試劑，選自二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、丙酮、甲醇或者其組合。
優(yōu)選的，提取液為乙酸乙酯和三氯甲烷的混合液，體積比為1:5。
所述檢測(cè)液為鹽酸、硝酸、硫酸中的一種，含量為10.00％～85.00％。
優(yōu)選的，檢測(cè)液為硫酸，含量為50％。
一種拉非及其衍生物快速檢測(cè)卡研制方法，包括以下步驟：
1)制備試紙基材：以吸水紙作為拉非及其衍生物檢測(cè)試紙的基材；
2)制備浸泡液；
3)浸泡試紙基材：將拉非及其衍生物檢測(cè)試紙基材放入浸泡液中浸潤(rùn)10分鐘；
4)制備檢測(cè)試紙：將拉非及其衍生物檢測(cè)試紙基材放在溫度為57攝氏度的真空干燥箱，烘干2小時(shí)后晾干；
5)制備檢測(cè)卡：將檢測(cè)試紙裁剪成條狀，制作檢測(cè)卡。
所述浸泡液的組分為：由二甘醇醚(0.20％～2.00％)、edta(2.50％～8.00％)、蔗糖(2.00％～10.00％)組成，體積比為3:2:5。
所述拉非及其衍生物檢測(cè)卡的檢出限為0.50mg/g，檢測(cè)范圍為0.50mg/g～4.00mg/g；所述拉非及其衍生物檢測(cè)卡與所述食品中危害因子及非法添加藥物智能化綜合檢測(cè)儀相配合可進(jìn)行拉非及其衍生物定量檢測(cè)。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和有益效果為：
1)快速檢測(cè)：現(xiàn)有準(zhǔn)確度高的拉非及其衍生物檢測(cè)方法，如高效液相色譜、液-質(zhì)聯(lián)用、拉曼光譜檢測(cè)，檢測(cè)成本高、檢測(cè)周期長(zhǎng)、對(duì)人員專業(yè)素質(zhì)要求高；本發(fā)明研制的拉非檢測(cè)卡，二十五分鐘即可得出檢測(cè)結(jié)果，適用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)保健食品、藥品、食品中拉非及其衍生物含量。
2)準(zhǔn)確度高：本發(fā)明篩選了針對(duì)性樣品前處理方法，改善了保健食品、藥品、食品基質(zhì)干擾引起拉非及其衍生物快速檢測(cè)時(shí)易出現(xiàn)的誤檢和漏檢的問(wèn)題。
3)結(jié)果定量：常規(guī)的拉非及其衍生物快檢方法只通過(guò)目測(cè)定性，本發(fā)明中拉非及其衍生物檢測(cè)卡與食品中危害因子及非法添加藥物智能化綜合檢測(cè)儀配套進(jìn)行定量檢測(cè)。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1：片劑、軟膠囊、硬膠囊保健食品中拉非及其衍生物快速檢測(cè)方法
檢測(cè)過(guò)程如下：
1)待測(cè)樣品前處理：稱取0.10克樣品，放入2ml離心管內(nèi)，加入0.90毫升提取液，充分混勻，靜置5分鐘，取上層清液用微孔濾膜過(guò)濾，濾液為待檢樣品處理液；
2)檢測(cè)：取100微升待檢樣品處理液加入1.5ml離心管中，加入400微升檢測(cè)液混勻,靜置顯色15分鐘，混勻后取50微升移取到檢測(cè)卡觀察窗中間位置，計(jì)時(shí)一分鐘后在儀器上讀取檢測(cè)結(jié)果。
實(shí)施例2：液態(tài)酒類或口服液保健食品中拉非及其衍生物快速檢測(cè)方法
檢測(cè)過(guò)程如下：
1)待測(cè)樣品前處理：量取0.10毫升樣品，放入2ml離心管內(nèi)，加入0.90毫升提取液，充分混勻，靜置5分鐘，取無(wú)色液體層為待檢樣品處理液。
2)檢測(cè)：取100微升待檢樣品處理液加入1.5ml離心管中，加入400微升檢測(cè)液混勻,靜置顯色15分鐘，混勻后取50微升移取到檢測(cè)卡觀察窗中間位置，計(jì)時(shí)一分鐘后在儀器上讀取檢測(cè)結(jié)果。
實(shí)施例3：藥品中拉非及其衍生物快速檢測(cè)方法
檢測(cè)過(guò)程如下：
1)待測(cè)樣品前處理：稱取0.10克碾碎的藥品，放入2ml離心管中，加入0.90毫升提取液，充分混勻，靜置5分鐘，取上層清液用微孔濾膜過(guò)濾，濾液為待檢樣品處理液；
2)檢測(cè)：取100微升待檢樣品處理液加入1.5ml離心管中，加入400微升檢測(cè)液混勻,靜置顯色15分鐘，混勻后取50微升移取到檢測(cè)卡觀察窗中間位置，計(jì)時(shí)一分鐘后在儀器上讀取檢測(cè)結(jié)果。
實(shí)施例4：固體食品中拉非及其衍生物快速檢測(cè)方法
檢測(cè)過(guò)程如下：
1)待測(cè)樣品前處理：稱取0.10克剪碎的食品，放入2ml離心管中，加入0.90毫升提取液，充分混勻，靜置5分鐘，取上層清液用微孔濾膜過(guò)濾，濾液為待檢樣品處理液；
2)檢測(cè)：取100微升待檢樣品處理液加入1.5ml離心管中，加入400微升檢測(cè)液混勻,靜置顯色15分鐘，混勻后取50微升移取到檢測(cè)卡觀察窗中間位置，計(jì)時(shí)一分鐘后在儀器上讀取檢測(cè)結(jié)果。
實(shí)施例5：液態(tài)食品中拉非及其衍生物快速檢測(cè)方法
檢測(cè)過(guò)程如下：
1)待測(cè)樣品前處理：量取0.10毫升液體食品，放入2ml離心管中，加入0.90毫升提取液，充分混勻，靜置5分鐘，取上層清液用微孔濾膜過(guò)濾，濾液為待檢樣品處理液；
2)檢測(cè)：取100微升待檢樣品處理液加入1.5ml離心管中，加入400微升檢測(cè)液混勻,靜置顯色15分鐘，混勻后取50微升移取到檢測(cè)卡觀察窗中間位置，計(jì)時(shí)一分鐘后在儀器上讀取檢測(cè)結(jié)果。
實(shí)施例6：拉非及其衍生物快速檢測(cè)卡制備方法
制備過(guò)程如下：
1)制備試紙基材：以吸水紙作為拉非及其衍生物檢測(cè)試紙的基材；
2)制備浸泡液：取二甘醇醚(0.20％～2.00％)溶液30ml、edta(2.50％～8.00％)溶液20ml和蔗糖(2.00％～10.00％)50ml；將各組分放入反應(yīng)器中混合制得浸泡液；
3)浸泡試紙基材：將拉非及其衍生物檢測(cè)試紙基材放入浸泡液中浸潤(rùn)10分鐘；
4)制備檢測(cè)試紙：將拉非及其衍生物檢測(cè)試紙基材放在溫度為57攝氏度的真空干燥箱中，烘干2小時(shí)后晾干，得到拉非及其衍生物檢測(cè)試紙；
5)制備檢測(cè)卡：將檢測(cè)試紙裁剪成條狀，制作檢測(cè)卡。
最后應(yīng)說(shuō)明的是：顯然，上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說(shuō)明本發(fā)明所作的舉例，而并非對(duì)實(shí)施方式的限定。對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在上述說(shuō)明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)。這里無(wú)需也無(wú)法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉。而由此所引伸出的顯而易見(jiàn)的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之中。