本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及判斷pm2.5細(xì)顆粒物的生物毒性的方法。

背景技術(shù)：

大氣中pm2.5細(xì)顆粒物是指空氣動(dòng)力學(xué)直徑≤2.5μm的顆粒物，可通過(guò)呼吸沉積在肺泡。近年來(lái)研究表明，細(xì)顆粒物具有明顯的毒性作用，可引起機(jī)體呼吸系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等較為廣泛的損害。隨著大氣中細(xì)顆粒物的廣泛監(jiān)測(cè)，pm2.5細(xì)顆粒物的日均濃度以及aqi指數(shù)越來(lái)越受到關(guān)注。

但是缺乏對(duì)pm2.5細(xì)顆粒物毒性描述的指標(biāo)。

因此，本領(lǐng)域迫切需要開(kāi)發(fā)一種大氣pm2.5細(xì)顆粒物生物毒性的綜合評(píng)價(jià)方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種大氣pm2.5細(xì)顆粒物生物毒性的綜合評(píng)價(jià)方法。

本發(fā)明第一方面提供了一種判斷pm2.5細(xì)顆粒物生物毒性的方法，包括步驟：

(i)提供待測(cè)樣本，所述樣本為對(duì)應(yīng)于pm2.5細(xì)顆粒物的空氣污染的樣本；

(ii)向所述待測(cè)樣本中加入發(fā)光細(xì)菌培養(yǎng)液，從而獲得發(fā)光抑制率；和

(iii)在50％±10％的發(fā)光抑制率下，測(cè)定所述樣本的毒性指數(shù)，從而判斷pm2.5細(xì)顆粒物的生物毒性。

在另一優(yōu)選例中，所述步驟(ii)中，還包括步驟：

(a)取1/10-1/5(較佳地，1/9-1/7)濾膜的待測(cè)樣本，向其中加入純水，水浴超聲離心后，從而獲得上清液；

(b)向所述上清液中加入純水和滲透壓液，從而獲得樣品待測(cè)液；和

(c)向所述樣品待測(cè)液中加入發(fā)光細(xì)菌培養(yǎng)液，加入前所述發(fā)光細(xì)菌培養(yǎng)液中的發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度(原始發(fā)光強(qiáng)度)為i0，加入后所述發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度為i1，比較i0與i1，從而獲得發(fā)光抑制率。

在另一優(yōu)選例中，所述待測(cè)樣本的量為0.01-0.5g/膜，較佳地，0.02-0.4g/膜，更佳地，0.05-0.4g/膜。

在另一優(yōu)選例中，所述步驟(a)和(b)中不含鹽類(lèi)物質(zhì)。

在另一優(yōu)選例中，所述鹽類(lèi)物質(zhì)選自下組：氯化鈉、氯化鉀、或其組合。

在另一優(yōu)選例中，步驟(a)中，所述純水的體積為10-40ml，較佳地，15-25ml。

在另一優(yōu)選例中，步驟(a)中，水浴溫度為20-40℃。

在另一優(yōu)選例中，步驟(a)中，超聲時(shí)間為10min-2h，較佳地，20min-1h。

在另一優(yōu)選例中，步驟(a)中，離心時(shí)間為5-30min，較佳地，10-20min。

在另一優(yōu)選例中，所述步驟(b)中，所述純水的體積為0.1-20ml，較佳地，0.5-15ml，更佳地，0.5-10ml。

在另一優(yōu)選例中，所述步驟(b)中，所述滲透壓液的體積為0.1-2ml，較佳地，0.2-1ml。

在另一優(yōu)選例中，所述步驟(c)中，根據(jù)發(fā)光細(xì)菌的原始發(fā)光強(qiáng)度i0和發(fā)光強(qiáng)度i1，用急性毒性測(cè)試儀，用以下公式計(jì)算發(fā)光抑制率；

其中公式如下：

發(fā)光抑制率(％)＝(發(fā)光細(xì)菌的原始發(fā)光強(qiáng)度i0-發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度i1)/發(fā)光細(xì)菌的原始發(fā)光強(qiáng)度i0×100％。

在另一優(yōu)選例中，所述發(fā)光細(xì)菌為淡水發(fā)光細(xì)菌。

在另一優(yōu)選例中，所述發(fā)光細(xì)菌選自下組：青海弧菌、費(fèi)氏弧菌、或其組合。

在另一優(yōu)選例中，所述步驟(c)中，所述發(fā)光細(xì)菌培養(yǎng)液的體積為10-100μl，較佳地，20-80μl，更佳地，30-60μl。

在另一優(yōu)選例中，所述步驟(iii)中，用以下公式測(cè)定所述樣本的毒性指數(shù)：

t＝c×d；

其中，

d是毒性當(dāng)量，即毒性陽(yáng)性，取測(cè)試樣本質(zhì)量的倒數(shù)作為毒性當(dāng)量；

c為所述待測(cè)樣本中pm2.5的濃度；

t為毒性指數(shù)，以所述待測(cè)樣本中pm2.5的濃度c值與毒性當(dāng)量d的乘積(無(wú)量綱)表示，用以反應(yīng)當(dāng)日大氣中pm2.5的毒性情況。

在另一優(yōu)選例中，所述毒性當(dāng)量(d)的測(cè)試范圍為0.1-1.2，較佳地，0.121－1.079。

在另一優(yōu)選例中，所述毒性指數(shù)t的范圍為10-150，較佳地，15.0－145.8。

應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實(shí)施例)中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附圖說(shuō)明

圖1顯示了pm2.5樣本毒性當(dāng)量值分布圖。

圖2顯示了pm2.5樣本毒性指數(shù)分布圖。

圖3顯示了pm2.5樣本毒性當(dāng)量與日均質(zhì)量濃度關(guān)系。

圖4顯示了pm2.5樣本毒性指數(shù)與日均質(zhì)量濃度關(guān)系。

圖5顯示了pm2.5樣本日均質(zhì)量濃度對(duì)應(yīng)毒性指數(shù)分布。

圖6顯示了pm2.5樣本中鎘日均質(zhì)量濃度對(duì)應(yīng)毒性指數(shù)分布。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明人經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期廣泛而深入的研究，首次開(kāi)發(fā)了一種大氣pm2.5細(xì)顆粒物生物毒性的綜合評(píng)價(jià)方法，具體地，本發(fā)明在50％±10％的發(fā)光抑制率下，用公式t＝c×d測(cè)定空氣樣本中的毒性指數(shù)，從而判斷pm2.5細(xì)顆粒物的生物毒性。在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明人完成了本發(fā)明。

發(fā)光細(xì)菌檢測(cè)法

發(fā)光細(xì)菌檢測(cè)法是一種簡(jiǎn)單快速的生物毒性檢測(cè)方法，用以反映環(huán)境中有毒物質(zhì)的綜合毒性。該方法是在一定濃度范圍內(nèi)，污染物的濃度與發(fā)光細(xì)菌的相對(duì)發(fā)光抑制率存在劑量-效應(yīng)關(guān)系。研究表明，pm2.5細(xì)顆粒物是一種表面吸附金屬成分、多環(huán)芳烴、硝酸鹽、硫酸鹽等不同化學(xué)組分的混合體。因此發(fā)光細(xì)菌法可適用于pm2.5細(xì)顆粒物綜合生物毒性的研究。

在本發(fā)明中，通過(guò)采集pm2.5細(xì)顆粒物樣品，采用商品化的發(fā)光細(xì)菌來(lái)探究pm2.5細(xì)顆粒物的毒性特征，以獲得一種大氣pm2.5細(xì)顆粒物綜合生物毒性的評(píng)價(jià)方法。

在本發(fā)明中，本發(fā)明的發(fā)光細(xì)菌檢測(cè)法包括檢測(cè)方法和評(píng)價(jià)方法，即通過(guò)毒性檢測(cè)后用毒性指數(shù)表征大氣污染的綜合毒性。

淡水菌(淡水弧菌)與海洋菌

在本發(fā)明中，經(jīng)過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，淡水菌(淡水弧菌)的培養(yǎng)條件更接近人體內(nèi)環(huán)境條件。

具體地，本發(fā)明采用淡水菌，比如"青?；【?，淡水弧菌的培養(yǎng)條件更接近人體內(nèi)環(huán)境條件。樣品在不加鹽類(lèi)(如nacl、kcl等鹽類(lèi)物質(zhì))的環(huán)境下就可以進(jìn)行檢測(cè)，而且該菌對(duì)外界有毒物質(zhì)反應(yīng)很靈敏。此外，本發(fā)明使用淡水弧菌(如青?；【?，因?yàn)椴患欲}類(lèi)(如nacl、kcl等鹽類(lèi)物質(zhì))，提高了對(duì)各種離子濃度的反應(yīng)靈敏度。

而海洋菌(海洋發(fā)光菌)有局限性，樣品因添加鹽類(lèi)(如nacl、kcl等鹽類(lèi)物質(zhì))之后會(huì)影響生物毒性，致使檢測(cè)結(jié)果不正確。

判斷pm2.5細(xì)顆粒物生物毒性的方法

本發(fā)明提供了一種判斷pm2.5細(xì)顆粒物生物毒性的方法，包括步驟：

(i)提供待測(cè)樣本，所述樣本為對(duì)應(yīng)于pm2.5細(xì)顆粒物的空氣污染的樣本；

(ii)向所述待測(cè)樣本中加入發(fā)光細(xì)菌培養(yǎng)液，從而獲得發(fā)光抑制率；

(ii)在50％±10％的發(fā)光抑制率下，測(cè)定所述樣本的毒性指數(shù)，從而判斷pm2.5細(xì)顆粒物的生物毒性。

在另一優(yōu)選例中，所述步驟(ii)中，還包括步驟：

(a)取1/10-1/5(較佳地，1/9-1/7)濾膜的待測(cè)樣本，向其中加入純水，水浴超聲離心后，從而獲得上清液；

(b)向所述上清液中加入純水和滲透壓液，從而獲得樣品待測(cè)液；

(c)向所述樣品待測(cè)液中加入發(fā)光細(xì)菌培養(yǎng)液，加入前所述發(fā)光細(xì)菌培養(yǎng)液中的發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度(原始發(fā)光強(qiáng)度)為i0，加入后所述發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度為i1，比較i0與i1，從而獲得發(fā)光抑制率。

本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)包括：

(1)本發(fā)明首次使用發(fā)光細(xì)菌檢測(cè)法，用公式t＝c×d測(cè)定空氣樣本中的毒性指數(shù)，從而判斷pm2.5細(xì)顆粒物的生物毒性。

(2)本發(fā)明首次對(duì)pm2.5樣品中20種重金屬元素進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其日均濃度較高的前7種元素依次為fe、al、zn、pb、mn、cu、ba，重金屬總量的90％以上。

(3)本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)，毒性當(dāng)量與日均質(zhì)量濃度無(wú)相關(guān)性，毒性當(dāng)量并未隨pm2.5日均質(zhì)量濃度的升高而呈現(xiàn)出趨勢(shì)性變化，反而略有下降。

(4)本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)，毒性指數(shù)與日均質(zhì)量濃度無(wú)相關(guān)性，毒性指數(shù)并未隨pm2.5日均質(zhì)量濃度的升高而呈現(xiàn)出趨勢(shì)性變化。

(5)本發(fā)明觀察一些pm2.5日均較高質(zhì)量濃度點(diǎn)，首次發(fā)現(xiàn)對(duì)應(yīng)的毒性指數(shù)部分升高，但是有些反而很低。

(6)本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)，pm2.5毒性指數(shù)與多種重金屬的濃度呈顯著相關(guān)性，其中與se、cd和as呈強(qiáng)相關(guān)，因此毒性指數(shù)可用作對(duì)重金屬等物質(zhì)引起的生物毒性強(qiáng)度的描述。

(7)本發(fā)明首次利用發(fā)光細(xì)菌對(duì)重金屬、含氮雜環(huán)化合物等物質(zhì)毒性敏感的特性，采用定量發(fā)光細(xì)菌法來(lái)測(cè)試pm2.5細(xì)顆粒物的生物毒性，并以毒性指數(shù)反應(yīng)大氣中pm2.5細(xì)顆粒物的污染程度和生物毒性，對(duì)現(xiàn)有pm2.5日均濃度和aqi指數(shù)進(jìn)行了補(bǔ)充。

(8)本發(fā)明首次運(yùn)用毒性指數(shù)和毒性當(dāng)量?jī)煞N表達(dá)方式，能結(jié)合當(dāng)日的日均pm2.5濃度，反映出pm2.5帶來(lái)的綜合毒性強(qiáng)度。

(9)本方面通過(guò)特定的采樣手段，只采集測(cè)定能進(jìn)入肺泡的pm2.5細(xì)顆粒物，從而排除非pm2.5帶來(lái)的干擾。

(10)本發(fā)明采用24小時(shí)采樣，代表全天的樣品毒性，并且與氣象指標(biāo)pm2.5日均濃度結(jié)合一起進(jìn)行評(píng)價(jià)，所得到的結(jié)果更準(zhǔn)確。

(11)本發(fā)明首次采用定量分析方法，可定量測(cè)試毒性，通過(guò)實(shí)際采樣研究(如一年多的實(shí)際采樣研究)，確認(rèn)最低檢出限為5mg/2ml的樣品待測(cè)液。

(12)本發(fā)明首次應(yīng)用毒性指數(shù)和毒性當(dāng)量?jī)煞N表達(dá)方式，能結(jié)合當(dāng)日的日均pm2.5濃度，反映出pm2.5帶來(lái)的綜合毒性強(qiáng)度，可對(duì)氣象局預(yù)報(bào)的aqi等指數(shù)就行補(bǔ)充，極具實(shí)用價(jià)值。

(13)加入的任何化學(xué)物質(zhì)都可能影響到發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光抑制率，從而影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確度，本發(fā)明不添加任何化學(xué)試劑，避免了實(shí)驗(yàn)干擾。

(14)本發(fā)明采用純水超聲提取，更加接近生物體內(nèi)環(huán)境，且操作非常簡(jiǎn)單，工作效率大幅提高。

下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說(shuō)明，否則百分比和份數(shù)是重量百分比和重量份數(shù)。

本發(fā)明實(shí)施例中所用的材料如無(wú)特別說(shuō)明，均為市售產(chǎn)品。

通用方法

1.材料與方法

1.1儀器與試劑alk601q急性毒性測(cè)試儀(上海安力康科學(xué)儀器有限公司)。發(fā)光細(xì)菌(淡水青?；【?(購(gòu)自上海安力康科學(xué)儀器有限公司)、復(fù)蘇液、滲透壓調(diào)節(jié)液、實(shí)驗(yàn)試管(上海安利康科學(xué)儀器有限公司)。50ml聚丙烯離心管、15ml聚丙烯離心管(美國(guó)coring公司)、kq2200de型數(shù)控超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)。th-1000型大流量采樣器(武漢市天虹儀表有限責(zé)任公司)、1851-865石英濾膜(英國(guó)whatman公司，203mm×254mm)、石英剪刀、超純水均由純水機(jī)現(xiàn)制現(xiàn)用。六價(jià)鉻標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(gbw(e)080257)

1.2方法

1.2.1樣品采集濾膜采樣前后均經(jīng)25℃、50％濕度恒重處理稱量。設(shè)定本單位大樓三樓平臺(tái)為固定采樣點(diǎn)，采用大流量采樣器和石英濾膜于2014年9月-2015年8月進(jìn)行大氣pm2.5采樣，采樣流量為1000l/min。每月10日-19日連續(xù)采樣10d，每次采樣24h，每天更換濾膜，遇霧霾天連續(xù)采樣，共采集有效樣品117份，恒重稱量后進(jìn)行毒性測(cè)試。

1.2.2樣品預(yù)處理準(zhǔn)確剪取1/8濾膜，剪碎置于50ml離心管中，加入20ml純水，30℃水浴中超聲0.5h后以8000r/min離心10min(離心半徑為8cm)，吸取上清液，進(jìn)行測(cè)定。

1.2.3樣品測(cè)定取適量上述上清液于15ml離心管中，加入純水至9.5ml，加入0.5ml滲透壓液(購(gòu)自上海安利康科學(xué)儀器有限公司2015)，制成樣品待測(cè)液。取5個(gè)實(shí)驗(yàn)試管，在每個(gè)試管底部加入50μl發(fā)光細(xì)菌培養(yǎng)液，按順序放入急性毒性測(cè)試儀，測(cè)試發(fā)光細(xì)菌的最初發(fā)光強(qiáng)度。然后依次在5個(gè)試管，1個(gè)試管中加入復(fù)蘇液(作為空白管)和4個(gè)試管中加入樣品待測(cè)液(樣品平行樣)各2ml，等待反應(yīng)時(shí)間15min結(jié)束后再依序放入急性毒性測(cè)試儀測(cè)試發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度。儀器根據(jù)兩次數(shù)據(jù)，自動(dòng)計(jì)算發(fā)光抑制率(發(fā)光抑制率(％)＝(發(fā)光細(xì)菌的原始發(fā)光強(qiáng)度i0-發(fā)光細(xì)菌的發(fā)光強(qiáng)度i1)/發(fā)光細(xì)菌的原始發(fā)光強(qiáng)度i0×100％)。

1.2.4質(zhì)量控制平行樣測(cè)定發(fā)光抑制率偏差要求＜10％。對(duì)于待測(cè)樣本，應(yīng)取不同濃度分別可以得到25％、50％、75％的發(fā)光抑制率，才能確認(rèn)該樣本呈毒性陽(yáng)性。每批次反應(yīng)體系的試劑耗材，應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行質(zhì)量控制，確保發(fā)光細(xì)菌發(fā)光抑制率在控制范圍內(nèi)。

實(shí)施例1毒性當(dāng)量與毒性指數(shù)

毒性當(dāng)量(d)是在本毒性測(cè)試體系中當(dāng)發(fā)光抑制率在40％～60％時(shí)，即毒性陽(yáng)性，取測(cè)試樣本質(zhì)量的倒數(shù)作為毒性當(dāng)量。數(shù)值越大，表示樣品毒性越大。

毒性指數(shù)(t)以當(dāng)日大氣中pm2.5的濃度c值與毒性當(dāng)量的乘積(無(wú)量綱)表示。用以反應(yīng)當(dāng)日大氣中pm2.5的毒性情況，數(shù)值越大，表示毒性越大。

t＝c×d。

實(shí)施例2毒性測(cè)試體系的量值溯源

使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)水中六價(jià)鉻進(jìn)行毒性測(cè)試，測(cè)試條件與樣本相同，反應(yīng)體系試劑的測(cè)試結(jié)果為3.0μg(抑制率達(dá)到40％～60％)。

實(shí)施例3采樣及測(cè)試結(jié)果

研究期間共采集pm2.5樣本117件，全部完成pm2.5質(zhì)量濃度檢測(cè)。對(duì)其中采樣量達(dá)到0.05g/膜滿足測(cè)試要求的樣本進(jìn)行重金屬含量和毒性測(cè)試，四個(gè)季度分別為0.06g/膜～0.33g/膜13件、0.06g/膜～0.37g/膜19件、0.06g/膜～0.26g/膜20件和0.05g/膜～0.14g/膜10件。

3.1重金屬含量測(cè)試結(jié)果

對(duì)pm2.5樣品中20種重金屬元素進(jìn)行檢測(cè)，其日均濃度較高的前7種元素依次為fe、al、zn、pb、mn、cu、ba，濃度值為801ng/m³、543ng/m³、191ng/m³、7ng/m³、51ng/m³、27ng/m³、25ng/m³，合計(jì)占重金屬總量的90％以上。

3.2毒性當(dāng)量測(cè)試結(jié)果

毒性當(dāng)量值結(jié)果范圍0.121～1.079(圖1)，均值0.507，中位值0.496，標(biāo)準(zhǔn)偏差0.205，最高值大約是最低值的9倍，這表明樣品不同，樣品的毒性當(dāng)量不同，也就是樣品之間的綜合生物毒性不同。

3.3毒性指數(shù)的分布

毒性指數(shù)值范圍15.0為～145.8(圖2)，均值為43.7,中位值為38.4，標(biāo)準(zhǔn)偏差23.6，最高值約是最低值的10倍，這表明，毒性指數(shù)是結(jié)合了大氣中pm2.5的濃度以及毒性當(dāng)量給出的綜合生物毒性指標(biāo)。

3.4毒性當(dāng)量與日均質(zhì)量濃度的關(guān)系

以pm2.5日均質(zhì)量濃度對(duì)應(yīng)毒性當(dāng)量值繪圖(圖3)，可以看出兩者間無(wú)相關(guān)性。毒性當(dāng)量并未隨pm2.5日均質(zhì)量濃度的升高而呈現(xiàn)出趨勢(shì)性變化，反而略有下降。這種情況可能由于pm2.5日均質(zhì)量濃度增高時(shí)，其主要成分可能以非“毒性”物質(zhì)為主，即發(fā)光細(xì)菌對(duì)此不敏感。

3.5毒性指數(shù)與日均質(zhì)量濃度的關(guān)系

以pm2.5日均質(zhì)量濃度對(duì)應(yīng)毒性指數(shù)值繪圖(圖4)，可以看出兩者間無(wú)相關(guān)性。毒性指數(shù)并未隨pm2.5日均質(zhì)量濃度的升高而呈現(xiàn)出趨勢(shì)性變化。觀察一些pm2.5日均較高質(zhì)量濃度點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)對(duì)應(yīng)的毒性指數(shù)部分升高，但是有些反而很低。與公眾習(xí)慣于根據(jù)日均質(zhì)量濃度數(shù)值的高低來(lái)判斷污染程度不同，從急性毒性角度來(lái)說(shuō)，毒性指數(shù)比日均質(zhì)量濃度更能準(zhǔn)確反映毒性的程度。即使某日的日均質(zhì)量濃度數(shù)值很高，但是毒性指數(shù)可能并未升高，甚至很低。從日均質(zhì)量濃度對(duì)應(yīng)毒性指數(shù)作圖(圖5)觀察到，在毒性指數(shù)為20～40時(shí)，日均質(zhì)量濃度最低小于50，最高大于200。即雖然這兩天的pm2.5日均質(zhì)量濃度相差4倍，但是其毒性指數(shù)基本相近。

3.6毒性指數(shù)與重金屬濃度的關(guān)系

pm2.5檢測(cè)出含量較高的元素有fe、al、zn、pb、mn、ba、cu等，均值濃度為801ng/m³、543ng/m³、191ng/m³、57ng/m³、51ng/m³、25ng/m³、27ng/m³。用spearman相關(guān)分析pm2.5毒性指數(shù)與各種重金屬元素濃度的關(guān)聯(lián)性，結(jié)果顯示pm2.5毒性指數(shù)與多種重金屬的濃度呈顯著相關(guān)性(p<0.01),其中與se、cd和as呈強(qiáng)相關(guān)(相關(guān)系數(shù)≥0.7，(圖6)為cd日均質(zhì)量濃度對(duì)應(yīng)毒性指數(shù)分布)，與pb、cu、zn、ba、cr、co、sb等元素呈中等強(qiáng)度相關(guān)(相關(guān)系數(shù)0.4～0.7)。毒性指數(shù)與濃度最高的6種重金屬fe、zn、pb、mn、ba、cu呈統(tǒng)計(jì)相關(guān)，因此毒性指數(shù)可用作對(duì)重金屬等物質(zhì)引起的生物毒性強(qiáng)度的描述。

此外，上述實(shí)驗(yàn)還表明：選用發(fā)光抑制率在50％時(shí)取測(cè)試樣本質(zhì)量的倒數(shù)來(lái)定義毒性當(dāng)量，同時(shí)測(cè)定發(fā)光抑制率為25％和75％，來(lái)排除由于儀器、試劑或者樣品本身引起的假陽(yáng)性。

并且，選用發(fā)光抑制率在50％時(shí)，重復(fù)性誤差<5％,而抑制率在25％、75％時(shí)重復(fù)性誤差<10％。因此，選用發(fā)光抑制率在50％時(shí)的測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性最高。

并且，通過(guò)實(shí)際采樣研究(如一年多的實(shí)際采樣研究)，確認(rèn)最低檢出限為5mg/2ml的樣品待測(cè)液。

總結(jié)

本發(fā)明利用發(fā)光細(xì)菌對(duì)重金屬、含氮雜環(huán)化合物等物質(zhì)毒性敏感的特性，采用定量發(fā)光細(xì)菌法來(lái)測(cè)試pm2.5細(xì)顆粒物的生物毒性。并以毒性指數(shù)反應(yīng)大氣中pm2.5細(xì)顆粒物的污染程度和生物毒性，是對(duì)現(xiàn)有pm2.5日均濃度和aqi指數(shù)的補(bǔ)充。

在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請(qǐng)中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨(dú)引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍。