本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域，尤其涉及一種快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)方法、檢測(cè)裝置及其制備方法。
背景技術(shù)：
：根據(jù)流行病統(tǒng)計(jì)，腫瘤患者每年有數(shù)十萬(wàn)，甚至上百萬(wàn)的患者，數(shù)字都在不斷的上升。目前篩查方法為酶聯(lián)法或發(fā)光法，pcr，ct，或mri。程序復(fù)雜，需專業(yè)設(shè)備和專業(yè)人員操作。目前市場(chǎng)上亦有少量的快速層析法，例如檢測(cè)前列腺癌和非特異性腫瘤指標(biāo)cea，但只能定性檢測(cè)，無(wú)法確診和監(jiān)控隨訪。其它主要的腫瘤特異抗原快速檢測(cè)，靈敏度極差，也是定性目測(cè)，無(wú)臨床實(shí)用價(jià)值。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置，包括腫瘤相關(guān)特異抗原檢測(cè)條、與定量檢測(cè)儀、網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置以及終端讀數(shù)裝置。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置中，所述腫瘤相關(guān)特異抗原檢測(cè)條包括樣品吸收區(qū)、過(guò)濾區(qū)、層析區(qū)與吸水區(qū)。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置包括底板，樣品吸收區(qū)(條)、過(guò)濾區(qū)(條)、層析區(qū)(條)和吸水區(qū)(條)粘貼在粘膠底板上，得到組裝的底板；本發(fā)明對(duì)所述組裝優(yōu)選為先在底板由下而上依次粘帖樣品吸收區(qū)(第1區(qū))、過(guò)濾區(qū)(第2區(qū))、層析區(qū)(第3區(qū))、吸水區(qū)(第7區(qū))，粘帖在粘膠板上，粘貼時(shí)使所述各區(qū)的交疊1～1.5mm；本發(fā)明中，所述切條的寬度優(yōu)選為3.0～5.0mm，優(yōu)選為4mm。本發(fā)明對(duì)所述底板的材質(zhì)、尺寸和來(lái)源沒(méi)有特殊的限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的用于免疫檢測(cè)條中的底板即可。在本發(fā)明中，所述底板的材質(zhì)優(yōu)選為塑料或膠片材料。得到組裝的底板后，將組裝的底板進(jìn)行切條，得到免疫試紙條。本發(fā)明對(duì)所述切條的方法沒(méi)有特殊限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的切條方法即可。本發(fā)明提供的免疫檢測(cè)條包括設(shè)置在所述底板上的樣品吸收區(qū)。在本發(fā)明中，所述樣品吸收區(qū)的材料優(yōu)選為玻璃纖維。本發(fā)明對(duì)所述玻璃纖維的來(lái)源沒(méi)有任何限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的玻璃纖維即可。本發(fā)明對(duì)所述樣品吸收區(qū)粘帖在底板的下端，將所述樣品吸收區(qū)的下邊緣與底板下邊緣平齊。本發(fā)明中，所述樣品吸收區(qū)吸收的樣品為血液，血清或血漿。所述血液的來(lái)源沒(méi)有限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的血液或血清、血漿即可。本發(fā)明實(shí)施例中添加的樣品也可以為手指血。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置中，所述層析區(qū)包括固相化標(biāo)記抗體區(qū)、檢測(cè)區(qū)與對(duì)照區(qū)；所述固相標(biāo)記抗體區(qū)設(shè)置在所述底板上，位于樣品吸收區(qū)上方，并且所述固相標(biāo)記抗體區(qū)與樣品吸收區(qū)的重疊1.5mm。在本發(fā)明中，所述固相標(biāo)記抗體區(qū)的材料優(yōu)選為玻璃纖維。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置中，還包括設(shè)置在所述底板上的反應(yīng)區(qū)，所述反應(yīng)區(qū)緊鄰所述固相標(biāo)記抗體區(qū)，位于所述固相標(biāo)記抗體區(qū)的上方，并且所述反應(yīng)區(qū)和所述固相標(biāo)記抗體區(qū)重疊1.5mm。在本發(fā)明中，所述反應(yīng)區(qū)的材料優(yōu)選為硝酸纖維素膜。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置中，所述反應(yīng)區(qū)設(shè)置有檢測(cè)區(qū)，所述檢測(cè)區(qū)設(shè)置有檢測(cè)線t和質(zhì)控線c。所述檢測(cè)線t位于質(zhì)控線c的下面，所述檢測(cè)線t靠近固相標(biāo)記抗體區(qū)，所述質(zhì)控線c靠近吸水區(qū)。本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置是基于以下原理：樣品為血樣：血液，或指血，或血清，或血漿。滴加到加樣區(qū)(第1區(qū))，血樣不需要處理，借或不借助展開(kāi)液上行至過(guò)濾區(qū)(第2區(qū))，血樣中紅細(xì)胞血球滯留于過(guò)濾區(qū)，濾過(guò)的液體溶解固相標(biāo)記抗體區(qū)(第4區(qū))的標(biāo)記抗體進(jìn)入層析區(qū)(第3區(qū))。血樣中如存在抗原，則與標(biāo)記抗體形成“抗原—標(biāo)記抗體”復(fù)合物。該復(fù)合物按毛細(xì)管原理在層析條上上行，至第5區(qū)檢測(cè)區(qū)上，與t區(qū)一條固相線的另一特異標(biāo)記抗體形成“標(biāo)記抗體—抗原—固相標(biāo)記抗體”復(fù)合沉淀線。該沉淀線的顏色將與強(qiáng)度抗原血樣中濃度成正比例。雙抗體夾心法原理—在t檢測(cè)區(qū)形成“固相包被標(biāo)記抗體—待測(cè)抗原—標(biāo)記抗體”免疫復(fù)合物，其顏色強(qiáng)度與待測(cè)標(biāo)記抗原濃度成正比。在特定檢測(cè)時(shí)間如10—15分鐘，將層析檢測(cè)條(盒)用肉眼觀察記錄結(jié)果或定量分析儀中讀取結(jié)果。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置中，所述定量檢測(cè)儀為手持便攜式檢測(cè)儀。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置中，所述手持便攜式檢測(cè)儀由智能手機(jī)為基礎(chǔ)的讀數(shù)儀、檢測(cè)軟件、云端服務(wù)組成。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置中，所述網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置的傳輸方式包括以下方法的一種或幾種：通過(guò)所述云端服務(wù)，經(jīng)微信下載數(shù)據(jù)；經(jīng)由所述檢測(cè)儀輸出軟件，經(jīng)usb輸出數(shù)據(jù)；從微信或藍(lán)牙印刷機(jī)打印輸出；從所述讀數(shù)儀通過(guò)郵件方式發(fā)送。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置中，所述手持便攜式檢測(cè)儀的檢測(cè)軟件中已儲(chǔ)存待測(cè)樣品的腫瘤相關(guān)特異抗原濃度與檢測(cè)儀的顏色強(qiáng)度之間的線性關(guān)系曲線。優(yōu)選地，本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置中，所述腫瘤相關(guān)特異抗原包括乳房腫瘤特異抗原ca-125、乳房腫瘤特異抗原ca-153、乳房腫瘤特異抗原ca-199、小細(xì)胞肺癌特異抗原progrp、非小細(xì)胞肺癌特異抗原cyfra21-1的一種或幾種。本發(fā)明的另一方面是提供一種快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)方法，包括以下步驟：1)將樣品(血，或血清，或血漿)滴加至上述特異抗原檢測(cè)條的樣品加樣區(qū)；2)所述樣品借助或不借助展開(kāi)液，進(jìn)入上述過(guò)濾區(qū)、層析區(qū)；3)如果在層析區(qū)出現(xiàn)“標(biāo)記抗體-抗原-固相包被抗體”復(fù)合沉淀線，則說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，如果沒(méi)有出現(xiàn)所述復(fù)合沉淀線，則說(shuō)明檢測(cè)為陰性；當(dāng)所述樣品進(jìn)入對(duì)照區(qū)時(shí)，應(yīng)出現(xiàn)對(duì)照線，如沒(méi)有對(duì)照線時(shí)，檢測(cè)失??；4)應(yīng)用上述定量檢測(cè)儀對(duì)所述“標(biāo)記抗體-抗原-固相包被抗體”復(fù)合沉淀線進(jìn)行顏色強(qiáng)度測(cè)定，獲得樣品中抗原濃度，通過(guò)上述網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置傳輸至所述終端讀數(shù)裝置。本發(fā)明的另一目的在于提供上述快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置的制備方法，包括下列步驟：1)將標(biāo)記抗體溶解于緩沖液中，得到稀釋的標(biāo)記抗體，將所述的稀釋的標(biāo)記抗體噴涂在玻璃纖維膜，然后在真空干燥器進(jìn)行干燥，得到固相標(biāo)記抗體膜；2)將包被抗體溶液劃線于反應(yīng)區(qū)上形成檢測(cè)線，將兔抗鼠igg溶液劃線于反應(yīng)區(qū)上制作質(zhì)控線形成對(duì)照區(qū)，將劃線后的硝基纖維膜放在37℃環(huán)境下烘干25分鐘，得到包被標(biāo)記抗體層析膜；3)將先在底板由下而上依次粘帖樣品吸收區(qū)(第1區(qū))、過(guò)濾區(qū)(第2區(qū))、層析區(qū)(第3區(qū))、吸水區(qū)(第7區(qū))，粘帖在粘膠板上，粘貼時(shí)使所述各區(qū)的交疊1～1.5mm得到組裝的底板后，將組裝的底板進(jìn)行切條，得到腫瘤相關(guān)特異抗原檢測(cè)條；4)配置定量檢測(cè)儀、網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置以及終端讀數(shù)裝置即可。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：1.特異性高：所需配對(duì)標(biāo)記抗體僅作用于高特異性檢測(cè)腫瘤相關(guān)特異抗原。2.靈敏性高：所需配對(duì)標(biāo)記抗體以高靈敏度檢測(cè)腫瘤相關(guān)特異抗原，與酶標(biāo)法，發(fā)光法相近，能達(dá)到0.1ng/ml的檢測(cè)水平。3.所需配對(duì)抗體制作成的檢測(cè)盒檢測(cè)腫瘤相關(guān)特異抗原試驗(yàn)區(qū)(t)顏色深淺或測(cè)試線強(qiáng)度與腫瘤相關(guān)特異抗原濃度呈線性關(guān)系，通過(guò)儲(chǔ)存在云端服務(wù)的檢測(cè)儀與網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置，可以方便地獲得定量檢測(cè)結(jié)果。4.能夠一步快速檢測(cè)，所需配對(duì)標(biāo)記抗體制作成的檢測(cè)盒只需滴加待測(cè)血樣，在10-15分鐘便能測(cè)得結(jié)果。5.檢測(cè)結(jié)果量化信息化，通過(guò)將腫瘤相關(guān)特異抗原檢測(cè)條插入檢測(cè)儀器，當(dāng)即進(jìn)入數(shù)字化程序顯示，并可將相關(guān)信息通過(guò)電腦或任何網(wǎng)絡(luò)設(shè)備，或智能手機(jī)，儲(chǔ)存?zhèn)魉徒o待測(cè)者，如操作人員、醫(yī)生，或傳送至檢測(cè)中心。附圖說(shuō)明圖1為本發(fā)明快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原檢測(cè)條結(jié)構(gòu)示意圖；圖2為本發(fā)明實(shí)施例中單項(xiàng)腫瘤特異性抗原檢測(cè)條的檢測(cè)結(jié)果示意圖；圖3為本發(fā)明實(shí)施例中單項(xiàng)腫瘤特異性抗原檢測(cè)盒的檢測(cè)結(jié)果示意圖；圖4為本發(fā)明實(shí)施例中雙項(xiàng)腫瘤特異性抗原檢測(cè)盒的檢測(cè)結(jié)果示意圖；；圖5為本發(fā)明實(shí)施例中的腫瘤特異性抗原檢測(cè)裝置外觀示意圖；圖6為本發(fā)明實(shí)施例中的腫瘤特異性抗原檢測(cè)裝置中智能手機(jī)位置示意示意圖；圖7為本發(fā)明實(shí)施例中的腫瘤特異性抗原檢測(cè)裝置中量化信息化結(jié)果輸出顯示示意圖。具體實(shí)施方式本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例提供了一種快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置，包括腫瘤相關(guān)特異抗原檢測(cè)條、與定量檢測(cè)儀、網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置以及終端讀數(shù)裝置。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述腫瘤相關(guān)特異抗原檢測(cè)條具有以下結(jié)構(gòu)，如圖1所示，：第1區(qū)為樣品吸收區(qū)(加樣區(qū))，第2區(qū)為過(guò)濾區(qū)，第3區(qū)為層析區(qū)(硝基纖維層析膜)，第4區(qū)固相化標(biāo)記抗體區(qū)a，第5區(qū)為檢測(cè)區(qū)t，其中包括標(biāo)記抗體噴涂區(qū)帶，第6區(qū)為對(duì)照區(qū)c,第7區(qū)為吸水區(qū)，其中，所述層析區(qū)包括固相化標(biāo)記抗體區(qū)、檢測(cè)區(qū)與對(duì)照區(qū)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置的樣品吸收區(qū)(條)、過(guò)濾區(qū)(條)、層析區(qū)(條)和吸水區(qū)(條)設(shè)置于底板上；本發(fā)明對(duì)所述組裝優(yōu)選為先在底板由下而上依次粘帖樣品吸收區(qū)(第1區(qū))、過(guò)濾區(qū)(第2區(qū))、層析區(qū)(第3區(qū))、吸水區(qū)(第7區(qū))，粘帖在粘膠板上，粘貼時(shí)使所述各區(qū)的交疊1～1.5mm；本發(fā)明中，所述切條的寬度優(yōu)選為3.0～5.0mm，優(yōu)選為4mm。本發(fā)明對(duì)所述底板的材質(zhì)、尺寸和來(lái)源沒(méi)有特殊的限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的用于免疫檢測(cè)條中的底板即可。在本發(fā)明中，所述底板的材質(zhì)優(yōu)選為塑料或膠片材料。得到組裝的底板后，將組裝的底板進(jìn)行切條，得到免疫試紙條。本發(fā)明對(duì)所述切條的方法沒(méi)有特殊限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的切條方法即可。本發(fā)明提供的免疫檢測(cè)條包括設(shè)置在所述底板上的樣品吸收區(qū)。在本發(fā)明中，所述樣品吸收區(qū)的材料優(yōu)選為玻璃纖維。本發(fā)明對(duì)所述玻璃纖維的來(lái)源沒(méi)有任何限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的玻璃纖維即可。本發(fā)明對(duì)所述樣品吸收區(qū)粘帖在底板的下端，將所述樣品吸收區(qū)的下邊緣與底板下邊緣平齊。本發(fā)明中，所述樣品吸收區(qū)吸收的樣品為血液，血清或血漿。所述血液的來(lái)源沒(méi)有限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的血液或血清、血漿即可。本發(fā)明實(shí)施例中添加的樣品也可以為手指血。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述固相標(biāo)記抗體區(qū)設(shè)置在所述底板上，位于樣品吸收區(qū)上方，并且所述固相標(biāo)記抗體區(qū)與樣品吸收區(qū)的重疊1.5mm。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述固相標(biāo)記抗體區(qū)的材料優(yōu)選為玻璃纖維。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述反應(yīng)區(qū)緊鄰所述固相標(biāo)記抗體區(qū)，位于所述固相標(biāo)記抗體區(qū)的上方，并且所述反應(yīng)區(qū)和所述固相標(biāo)記抗體區(qū)重疊1.5mm。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述反應(yīng)區(qū)的材料優(yōu)選為硝酸纖維素膜。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述反應(yīng)區(qū)設(shè)置有檢測(cè)區(qū)，所述檢測(cè)區(qū)設(shè)置有檢測(cè)線t和質(zhì)控線c。所述檢測(cè)線t位于質(zhì)控線c的下面，所述檢測(cè)線t靠近固相標(biāo)記抗體區(qū)，所述質(zhì)控線c靠近吸水區(qū)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，提供了腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)條的制備方法，包括下列步驟：將標(biāo)記抗體加入膠體金標(biāo)記溶液，攪拌10～15分鐘后，加入濃度為1％的小牛血清蛋白液，所述小牛血清蛋白液與膠體金標(biāo)記溶液體積比為1：7～15，經(jīng)高速(12000pm)離心十分鐘后，得到有色沉淀物，所述有色沉淀物為標(biāo)記抗體。抽取上血清液，沉淀物溶解于特定緩沖液中。本發(fā)明對(duì)所述膠體金標(biāo)記溶液的來(lái)源沒(méi)有特殊限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的膠體金標(biāo)記溶液即可。本發(fā)明中，所述離心轉(zhuǎn)速優(yōu)選為12000vpm，所述離心的溫度為4℃。在本發(fā)明中，所述標(biāo)記抗體的方法沒(méi)有特殊限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的稀釋方法即可。得到標(biāo)記抗體后，標(biāo)記噴涂在玻璃纖維膜上。所述噴涂?jī)?yōu)選為浸泡、手動(dòng)涂布或儀器噴涂，本發(fā)明實(shí)施例中采用浸泡的方法。標(biāo)記抗體隨后將浸泡后的纖維膜在真空干燥器下，進(jìn)行真空干燥，得到固相標(biāo)記抗體區(qū)。在本發(fā)明中，所述干燥的溫度優(yōu)選為35～38℃，8小時(shí)左右制得固相標(biāo)記抗體膜。包被抗體的制備：將標(biāo)記抗體溶液真空干燥劃線于硝基纖維膜(第5區(qū))反應(yīng)區(qū)上制作檢測(cè)線t線，將兔抗鼠igg溶液劃線于反應(yīng)區(qū)上制作質(zhì)控線c線(第6區(qū))，得到劃線的對(duì)照區(qū)。本發(fā)明對(duì)所述劃線的方式并沒(méi)有限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的標(biāo)記抗體噴涂方式即可。本發(fā)明實(shí)施例中劃線采用劃線儀進(jìn)行劃線，所述劃線儀的型號(hào)為biojet,biodotca,usa。在本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例中，所述包被液的濃度優(yōu)選為2mg/ml；所述包被液噴涂量?jī)?yōu)選為每30cm硝基纖維膜噴涂80ul/秒劃線后，本發(fā)明將硝基纖維膜放在37℃環(huán)境下烘干25分鐘，得到包被標(biāo)記抗體層析膜。本發(fā)明對(duì)所述烘干的方法沒(méi)有特殊限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的烘干方法即可。在本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例中，將樣品吸收條、過(guò)濾條、標(biāo)記層析條和吸水條粘貼在粘膠底板上，得到組裝的底板。在本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例中，對(duì)所述組裝優(yōu)選為先在底板由下而上依次粘帖樣品吸收區(qū)(第1區(qū))、過(guò)濾區(qū)(第2區(qū))、層析區(qū)(第3區(qū))、吸水區(qū)(第7區(qū))，粘帖在粘膠板上，粘貼時(shí)使所述各區(qū)的交疊1～1.5mm。得到組裝的底板后，將組裝的底板進(jìn)行切條，得到腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)條。本發(fā)明對(duì)所述切條的方法沒(méi)有特殊限制，采用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的切條方法即可。本發(fā)明實(shí)施例中切條采用切條機(jī)切條，所述切條機(jī)型號(hào)為k:nematic2360ca,usa。在本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例中，所述切條的寬度優(yōu)選為3.0～5.0mm，優(yōu)選為4mm。在本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例中，所述的抗體標(biāo)記顆粒可為膠體金,磁顆粒，碳顆粒，曬粒，膠金體粒，銀粒，有色乳膠粒，熒光，紡織染料，酶，量子點(diǎn)，脂質(zhì)體，其它顆粒等。在本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例中，所述的抗體標(biāo)記顆粒優(yōu)選膠體金。在本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例中，所述的腫瘤相關(guān)特異抗原優(yōu)選為卵巢腫瘤特異抗原ca125、卵巢腫瘤特異抗原ca153、卵巢腫瘤特異抗原ca199、小細(xì)胞肺癌抗原胃泌素釋放肽前體progastrinreleasingpeptide，簡(jiǎn)稱(progrp)；非小細(xì)胞肺癌抗原角蛋白類抗原cyffa21-1。本發(fā)明的實(shí)施例中，所述腫瘤標(biāo)志物對(duì)應(yīng)的抗體和標(biāo)記抗體的抗體來(lái)源均來(lái)自jajinternational，inc.sandiego，ca，usa。本發(fā)明實(shí)施例中所述的腫瘤特異性抗原的的包被抗體與標(biāo)記抗體的產(chǎn)品型號(hào)見(jiàn)下表1。表1腫瘤相關(guān)特異抗原配對(duì)標(biāo)記抗體產(chǎn)品型號(hào)名稱腫瘤相關(guān)特異抗原檢測(cè)區(qū)(t)包被抗體標(biāo)記抗體ca125#125-4012#125-3401ca153#153-782#153-678ca199#199-1033#199-1214pro-grp#grp-084#grp-086cyfra#cyf-124#cyf-138本發(fā)明所述的快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置是基于以下原理：樣品為血樣：血液，或指血，或血清，或血漿。滴加到加樣區(qū)(第1區(qū))，血樣不需要處理，借或不借助展開(kāi)液上行至過(guò)濾區(qū)(第2區(qū))，血樣中紅細(xì)胞血球滯留于過(guò)濾區(qū)，濾過(guò)的液體溶解固相標(biāo)記抗體區(qū)(第4區(qū))的標(biāo)記抗體進(jìn)入層析區(qū)(第3區(qū))。血樣中如存在抗原，則與標(biāo)記抗體形成“抗原-標(biāo)記抗體”復(fù)合物。該復(fù)合物按毛細(xì)管原理在層析條上上行，至第5區(qū)檢測(cè)區(qū)上，與t區(qū)一條固相線的另一特異標(biāo)記抗體形成“標(biāo)記抗體-抗原-固相標(biāo)記抗體”復(fù)合沉淀線。該沉淀線的顏色將與強(qiáng)度抗原血樣中濃度成正比例。雙抗體夾心法原理-在t檢測(cè)區(qū)形成“固相包被標(biāo)記抗體-待測(cè)抗原-標(biāo)記抗體”免疫復(fù)合物，其顏色強(qiáng)度與待測(cè)標(biāo)記抗原濃度成正比。在特定檢測(cè)時(shí)間如10-15分鐘，將層析檢測(cè)條(盒)用肉眼觀察記錄結(jié)果或定量分析儀中讀取結(jié)果。優(yōu)選地，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述定量檢測(cè)儀為手持便攜式檢測(cè)儀。優(yōu)選地，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述手持便攜式檢測(cè)儀由智能手機(jī)為基礎(chǔ)的讀數(shù)儀、檢測(cè)軟件、云端服務(wù)組成。優(yōu)選地，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置的傳輸方式包括以下方法的一種或幾種：通過(guò)所述云端服務(wù)，經(jīng)微信下載數(shù)據(jù)；經(jīng)由所述檢測(cè)儀輸出軟件，經(jīng)usb輸出數(shù)據(jù)；從微信或藍(lán)牙印刷機(jī)打印輸出；從所述讀數(shù)儀通過(guò)郵件方式發(fā)送。在本發(fā)明的實(shí)施例中，所用之量化信息化讀數(shù)儀為qiktech-4000(jajinternational,inc.sandiego,ca,usa)，是一種影像免疫測(cè)定整套設(shè)備，由“在智能手機(jī)為基礎(chǔ)的讀數(shù)儀；檢測(cè)軟件；云端服務(wù)”組成。qiktech-4000為手持便攜式檢測(cè)儀，其外觀如圖5所示，使用時(shí)將檢測(cè)盒(檢測(cè)條外層設(shè)置塑料殼的檢測(cè)盒)插入檢測(cè)儀，基于智能快速診斷測(cè)試(rdt)閱讀器，進(jìn)行圖像采集，處理和分析。檢測(cè)盒中檢測(cè)線的顏色強(qiáng)度與待測(cè)物質(zhì)成比例關(guān)系。這種顏色或光強(qiáng)度或?yàn)轭伾珡?qiáng)度如金標(biāo)記，或?yàn)闊晒鈴?qiáng)度，或?yàn)榘l(fā)光強(qiáng)度。顏色強(qiáng)度讀數(shù)儀可以對(duì)檢測(cè)結(jié)果先影像讀出結(jié)果，然后數(shù)字化軟件分析。最終將整套結(jié)果輸入至云端。一旦將檢測(cè)盒插入讀數(shù)儀，智能手機(jī)硬件通訊開(kāi)放照明裝置，此照明裝置在檢測(cè)盒下面(智能手機(jī)及其與其他部分的連接關(guān)系如圖6所示)，這種狹窄的led光，透過(guò)檢測(cè)盒，檢測(cè)出檢測(cè)線(t)的顏色強(qiáng)度，通過(guò)智能手機(jī)進(jìn)入數(shù)字影錄程序。待測(cè)強(qiáng)度與軟件里已儲(chǔ)存的標(biāo)準(zhǔn)曲線(見(jiàn)實(shí)施例)作比較，直接顯示出待測(cè)物質(zhì)的濃度：?jiǎn)挝?毫升，量化信息化的檢測(cè)結(jié)果如圖7所示。優(yōu)選地，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述手持便攜式檢測(cè)儀的檢測(cè)軟件中已儲(chǔ)存待測(cè)樣品的腫瘤相關(guān)特異抗原濃度與檢測(cè)儀的顏色強(qiáng)度之間的線性關(guān)系曲線。優(yōu)選地，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，所述腫瘤相關(guān)特異抗原包括乳房腫瘤特異抗原ca-125、乳房腫瘤特異抗原ca-153、乳房腫瘤特異抗原ca-199、小細(xì)胞肺癌特異抗原progrp、非小細(xì)胞肺癌特異抗原cyfra21-1的一種或幾種。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，提供了一種快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)方法，包括以下步驟：1)將樣品(血，或血清，或血漿)滴加至上述特異抗原檢測(cè)條的樣品加樣區(qū)；2)所述樣品借助或不借助展開(kāi)液，進(jìn)入上述過(guò)濾區(qū)、層析區(qū)；3)如圖2所示，如果在層析區(qū)出現(xiàn)“標(biāo)記抗體-抗原-固相包被抗體”復(fù)合沉淀線，則說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，如果沒(méi)有出現(xiàn)所述復(fù)合沉淀線，則說(shuō)明檢測(cè)為陰性；當(dāng)所述樣品進(jìn)入對(duì)照區(qū)時(shí)，應(yīng)出現(xiàn)對(duì)照線(圖2所示)，如沒(méi)有對(duì)照線時(shí)，檢測(cè)失?。?)應(yīng)用上述定量檢測(cè)儀對(duì)所述“標(biāo)記抗體-抗原-固相包被抗體”復(fù)合沉淀線進(jìn)行顏色強(qiáng)度測(cè)定，獲得樣品中抗原濃度，通過(guò)上述網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置傳輸至所述終端讀數(shù)裝置。優(yōu)選地，在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例中，所述腫瘤特異抗原檢測(cè)條外層可以設(shè)置有塑料外殼，如圖3所示，為單項(xiàng)(樣品中僅有一種腫瘤特異性抗原)檢測(cè)盒(檢測(cè)條)的結(jié)果示意圖，其中，出現(xiàn)“標(biāo)記抗體-抗原-固相包被抗體”復(fù)合沉淀線t，則說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，如果沒(méi)有出現(xiàn)所述復(fù)合沉淀線(t)，則說(shuō)明檢測(cè)為陰性；當(dāng)所述樣品進(jìn)入對(duì)照區(qū)時(shí)，應(yīng)出現(xiàn)對(duì)照線c(圖3所示)，如沒(méi)有對(duì)照線時(shí)，則檢測(cè)失敗。優(yōu)選地，在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例中，所述腫瘤特異抗原檢測(cè)條可以測(cè)試兩種或兩種以上的腫瘤特異性抗原，如圖4所示，為雙項(xiàng)(樣品中僅有兩種腫瘤特異性抗原)檢測(cè)盒(檢測(cè)條)的結(jié)果示意圖，其中，出現(xiàn)“標(biāo)記抗體-抗原-固相包被抗體”復(fù)合沉淀線t1、t2，則說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果對(duì)于腫瘤特異性兩種抗原(例如卵巢腫瘤特異抗原ca125、ca153)為陽(yáng)性結(jié)果，如果沒(méi)有出現(xiàn)所述復(fù)合沉淀線(t)，則說(shuō)明檢測(cè)為陰性；當(dāng)所述樣品進(jìn)入對(duì)照區(qū)時(shí)，應(yīng)出現(xiàn)對(duì)照線c(圖3所示)，如沒(méi)有對(duì)照線時(shí)，則檢測(cè)失敗。優(yōu)選地，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，提供上述快速量化信息化的腫瘤相關(guān)特異抗原的檢測(cè)裝置的制備方法，包括下列步驟：1)將標(biāo)記抗體溶解于緩沖液中，得到稀釋的標(biāo)記抗體，將所述的稀釋的標(biāo)記抗體噴涂在玻璃纖維膜，然后在真空干燥器進(jìn)行干燥，得到固相標(biāo)記抗體膜；2)將包被抗體溶液劃線于反應(yīng)區(qū)上形成檢測(cè)線，將兔抗鼠igg溶液劃線于反應(yīng)區(qū)上制作質(zhì)控線形成對(duì)照區(qū)，將劃線后的硝基纖維膜放在37℃環(huán)境下烘干25分鐘，得到包被標(biāo)記抗體層析膜；3)將先在底板由下而上依次粘帖樣品吸收區(qū)(第1區(qū))、過(guò)濾區(qū)(第2區(qū))、層析區(qū)(第3區(qū))、吸水區(qū)(第7區(qū))，粘帖在粘膠板上，粘貼時(shí)使所述各區(qū)的交疊1～1.5mm得到組裝的底板后，將組裝的底板進(jìn)行切條，得到腫瘤相關(guān)特異抗原檢測(cè)條；4)配置定量檢測(cè)儀、網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置以及終端讀數(shù)裝置即可。下面將結(jié)合本發(fā)明中的實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1卵巢腫瘤特異抗原ca125檢測(cè)裝置的配置1)卵巢腫瘤特異抗原ca125檢測(cè)條的設(shè)置將產(chǎn)品型號(hào)為#125-4012的卵巢腫瘤特異抗原ca125標(biāo)記抗體(jajinternational,inc.sandiego,ca,usa)加入膠體金標(biāo)記溶液，攪拌10～15分鐘后，加入濃度為1％的小牛血清蛋白液，所述小牛血清蛋白液與膠體金標(biāo)記溶液體積比為1：7～15，經(jīng)高速(12000pm)4℃離心10分鐘后，得到有色沉淀物，所述有色沉淀物為標(biāo)記抗體。抽取上血清液，沉淀物溶解于特定緩沖液中。將稀釋后的標(biāo)記抗體標(biāo)記浸泡在玻璃纖維膜上，將浸泡后的纖維膜在真空干燥器下，35～38℃進(jìn)行真空干燥，8小時(shí)左右制得固相標(biāo)記抗體膜。包被液的濃度為2mg/ml；所述包被液噴涂量為每30cm硝基纖維膜噴涂80ul/秒。將兔抗鼠igg溶液(產(chǎn)品型號(hào)#125-3401)3毫克/毫升速度同前，劃線于反應(yīng)區(qū)上制作質(zhì)控線c線(第6區(qū))，得到劃線的對(duì)照區(qū)。劃線采用劃線儀進(jìn)行劃線，所述劃線儀的型號(hào)為biojet,biodotca,usa。劃線后，本發(fā)明將硝基纖維膜放在37℃環(huán)境下烘干25分鐘，得到標(biāo)記抗體層析膜。將樣品吸收條、過(guò)濾條、標(biāo)記層析條和吸水條粘貼在粘膠底板上，得到組裝的底板。組裝方法為先在底板由下而上依次粘帖樣品吸收區(qū)(第1區(qū))、過(guò)濾區(qū)(第2區(qū))、層析區(qū)(第3區(qū))、吸水區(qū)(第7區(qū))，粘帖在粘膠板上，粘貼時(shí)使所述各區(qū)的交疊1～1.5mm。得到組裝的底板后，將組裝的底板進(jìn)行切條，切條采用切條機(jī)切條，所述切條機(jī)型號(hào)為k：nematic2360ca，usa。所述切條的寬度為4mm。得到卵巢腫瘤特異抗原ca125的檢測(cè)條。2)卵巢腫瘤特異抗原ca125檢測(cè)裝置中定量檢測(cè)儀的設(shè)置：將乳房腫瘤ca-153標(biāo)準(zhǔn)樣品按下列濃度稀釋至陰性血清中，0、35、70、140、280、560(u/ml單位/毫升)。加入上述40ul微升(1滴)于檢測(cè)條加樣區(qū)中，隨即加入展開(kāi)劑40ul微升(pbs)，于15分鐘將檢測(cè)盒置于定量檢測(cè)儀讀數(shù)，讀數(shù)結(jié)果匯總表3儲(chǔ)存于檢測(cè)儀qiktech-4000(jajinternational，inc.sandiego，ca，usa)自帶軟件中備用，儀器通過(guò)下表2獲得沉淀線的顏色強(qiáng)度(od值)與血樣中乳房腫瘤ca-125抗原濃度分布曲線，并儲(chǔ)存在云端服務(wù)器中。表2不同抗原濃度ca-125的顏色強(qiáng)度檢測(cè)結(jié)果ca125濃度(u/ml單位/毫升)檢測(cè)值0.d00.02350.10700.211400.542800.925601.623)卵巢腫瘤特異抗原ca125檢測(cè)裝置中網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置的設(shè)置上述數(shù)據(jù)通過(guò)所述云端服務(wù)，數(shù)據(jù)接收端(例如檢測(cè)中心醫(yī)生)經(jīng)微信下載數(shù)據(jù)；或經(jīng)由檢測(cè)儀qiktech-4000輸出軟件，經(jīng)usb輸出數(shù)據(jù)；或者從微信或藍(lán)牙印刷機(jī)打印輸出；從所述檢測(cè)儀的讀數(shù)儀通過(guò)郵件方式發(fā)送。實(shí)施例2.卵巢腫瘤特異抗原ca153檢測(cè)裝置的配置1)卵巢腫瘤特異抗原ca153檢測(cè)條的設(shè)置：卵巢腫瘤特異抗原ca153檢測(cè)條的制備同實(shí)施例1(制備檢測(cè)條中使用的抗體濃度與噴涂速率是一樣)，僅將包被抗原與標(biāo)記抗原替換為#153-782與#153-678，2)卵巢腫瘤特異抗原ca153檢測(cè)裝置中定量檢測(cè)儀的設(shè)置：將乳房腫瘤ca-153標(biāo)準(zhǔn)樣品按下列濃度稀釋至陰性血清中，0，35，70，140，280，560，(u/ml單位/毫升)。加入上述40ul微升(1滴)于檢測(cè)條加樣區(qū)中，隨即加入展開(kāi)劑40ul微升(pbs)，于15分鐘將檢測(cè)盒置于定量檢測(cè)儀讀數(shù)，讀數(shù)結(jié)果匯總表3儲(chǔ)存于檢測(cè)儀qiktech-4000(jajinternational，inc.sandiego，ca，usa)自帶軟件中備用，儀器通過(guò)下表獲得沉淀線的顏色強(qiáng)度(od值)與血樣中乳房腫瘤ca-153抗原濃度分布曲線，并儲(chǔ)存在云端服務(wù)器中。表3不同濃度ca-153顏色強(qiáng)度檢測(cè)結(jié)果ca153濃度(u/ml單位/毫升)檢測(cè)值0.d00.08350.17700.311400.582800.945601.703)卵巢腫瘤特異抗原ca153檢測(cè)裝置中網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置的設(shè)置上述數(shù)據(jù)通過(guò)所述云端服務(wù)，數(shù)據(jù)接收端(例如檢測(cè)中心醫(yī)生)經(jīng)微信下載數(shù)據(jù)；或經(jīng)由檢測(cè)儀qiktech-4000輸出軟件，經(jīng)usb輸出數(shù)據(jù)；或者從微信或藍(lán)牙印刷機(jī)打印輸出；從所述檢測(cè)儀的讀數(shù)儀通過(guò)郵件方式發(fā)送。實(shí)施例31)卵巢腫瘤特異抗原ca199檢測(cè)條的設(shè)置：卵巢腫瘤特異抗原ca153檢測(cè)條的制備同實(shí)施例1(制備檢測(cè)條中使用的抗體濃度與噴涂速率是一樣)，僅將包被抗原與標(biāo)記抗原替換為#199-1033與#199-1214，2)卵巢腫瘤特異抗原ca199檢測(cè)裝置中定量檢測(cè)儀的設(shè)置：將乳房腫瘤ca199標(biāo)準(zhǔn)樣品按下列濃度稀釋至陰性血清中，0，35，70，140，280，560，(u/ml單位/毫升)。加入上述40ul微升(1滴)于檢測(cè)條加樣區(qū)中，隨即加入展開(kāi)劑(磷酸(pbs)緩沖液)40ul微升，于15分鐘將檢測(cè)盒置于定量檢測(cè)儀讀數(shù)，讀數(shù)結(jié)果匯總表3儲(chǔ)存于檢測(cè)儀qiktech-4000(jajinternational，inc.sandiego，ca，usa)自帶軟件中備用，儀器通過(guò)下表獲得沉淀線的顏色強(qiáng)度(od值)與血樣中乳房腫瘤ca-153抗原濃度分布曲線，并儲(chǔ)存在云端服務(wù)器中。表4不同濃度ca-199檢測(cè)結(jié)果ca199濃度(u/ml單位/毫升)檢測(cè)值0.d00.04350.12700.271400.512800.985601.813)卵巢腫瘤特異抗原ca199檢測(cè)裝置中網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置的設(shè)置上述數(shù)據(jù)通過(guò)所述云端服務(wù)，數(shù)據(jù)接收端(例如檢測(cè)中心醫(yī)生)經(jīng)微信下載數(shù)據(jù)；或經(jīng)由檢測(cè)儀qiktech-4000輸出軟件，經(jīng)usb輸出數(shù)據(jù)；或者從微信或藍(lán)牙印刷機(jī)打印輸出；從所述檢測(cè)儀的讀數(shù)儀通過(guò)郵件方式發(fā)送。實(shí)施例4小細(xì)胞肺癌特異性抗原progrp檢測(cè)裝置的設(shè)置1)小細(xì)胞肺癌特異性抗原progrp檢測(cè)條的設(shè)置：小細(xì)胞肺癌特異性抗原progrp檢測(cè)條的制備同實(shí)施例1，僅將包被抗原與標(biāo)記抗原替換為#grp-084與#grp-086，2)小細(xì)胞肺癌特異性抗原progrp檢測(cè)裝置中定量檢測(cè)儀的設(shè)置：將小細(xì)胞肺癌progrp標(biāo)準(zhǔn)樣品按下列濃度稀釋至陰性血清中，0，2.5，5.0，10，25，50，(ng/ml單位/毫升)。加入上述40ul微升(1滴)予檢測(cè)條加樣區(qū)中，隨即加入展開(kāi)劑40ul微升(pbs)，于15分鐘將檢測(cè)盒置定量?jī)x讀數(shù)，讀數(shù)結(jié)果匯，儲(chǔ)存于檢測(cè)儀軟件中備用。表5小細(xì)胞肺癌progrp定量檢測(cè)結(jié)果progrp(u/ml)顏色強(qiáng)度00.0612.50.2425.00.40110.00.81225.01.59450.02.6023)小細(xì)胞肺癌特異性抗原progrp檢測(cè)裝置中網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置的設(shè)置上述數(shù)據(jù)通過(guò)所述云端服務(wù)，數(shù)據(jù)接收端(例如檢測(cè)中心醫(yī)生)經(jīng)微信下載數(shù)據(jù)；或經(jīng)由檢測(cè)儀qiktech-4000輸出軟件，經(jīng)usb輸出數(shù)據(jù)；或者從微信或藍(lán)牙印刷機(jī)打印輸出；從所述檢測(cè)儀的讀數(shù)儀通過(guò)郵件方式發(fā)送。實(shí)施例4小細(xì)胞肺癌特異性抗原cyfra檢測(cè)裝置的設(shè)置1)小細(xì)胞肺癌特異性抗原progrp檢測(cè)條的設(shè)置：小細(xì)胞肺癌特異性抗原progrp檢測(cè)條的制備同實(shí)施例1，僅將包被抗原與標(biāo)記抗原替換為#cyf-124與#cyf-138，2)小細(xì)胞肺癌特異性抗原cyffa檢測(cè)裝置中定量檢測(cè)儀的設(shè)置：將非小細(xì)胞肺癌cyffa21-1標(biāo)準(zhǔn)樣品按下列濃度稀釋至陰性血清中，0，2.5，5.0，10，25，50，(ng/ml單位/毫升)。加入上述40ul微升(1滴)予檢測(cè)盒加樣孔中，隨即加入展開(kāi)劑40ul微升(pbs)，于15分鐘將檢測(cè)盒置定量?jī)x讀數(shù)，讀數(shù)結(jié)果匯總表6儲(chǔ)存于檢測(cè)儀軟件中備用。表6非小細(xì)胞肺癌cyfra21-1定量檢測(cè)結(jié)果cyfra12-1(u/ml)顏色強(qiáng)度00.0792.50.2575.00.41910.00.74525.01.61550.02.6703)小細(xì)胞肺癌特異性抗原cyfra21-1檢測(cè)裝置中網(wǎng)絡(luò)傳輸裝置的設(shè)置上述數(shù)據(jù)通過(guò)所述云端服務(wù)，數(shù)據(jù)接收端(例如檢測(cè)中心醫(yī)生)經(jīng)微信下載數(shù)據(jù)；或經(jīng)由檢測(cè)儀qiktech-4000輸出軟件，經(jīng)usb輸出數(shù)據(jù)；或者從微信或藍(lán)牙印刷機(jī)打印輸出；從所述檢測(cè)儀的讀數(shù)儀通過(guò)郵件方式發(fā)送。以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁(yè)12