本發(fā)明涉及一種評價方法，具體涉及一種食品添加劑過氧化氫酶酶活力評價方法。
背景技術(shù)：
食品添加劑是為改善食品色、香、味等品質(zhì)，以及為防腐和加工工藝的需要而加入食品中的人工合成或者天然物質(zhì)。目前我國食品添加劑有23個類別，2000多個品種，包括酸度調(diào)節(jié)劑、抗結(jié)劑、消泡劑、抗氧化劑、漂白劑、膨松劑、著色劑、護色劑、酶制劑、增味劑、營養(yǎng)強化劑、防腐劑、甜味劑、增稠劑、香料等。
過氧化氫酶，是催化過氧化氫分解成氧和水的酶，存在于細胞的過氧化物體內(nèi)。過氧化氫酶是過氧化物酶體的標志酶,約占過氧化物酶體酶總量的40%。過氧化氫酶存在于所有已知的動物的各個組織中，特別在肝臟中以高濃度存在。過氧化氫酶在食品工業(yè)中被用于除去用于制造奶酪的牛奶中的過氧化氫。過氧化氫酶也被用于食品包裝，防止食物被氧化，食品添加劑過氧化氫酶與其他酶制劑一樣，酶活力通常會隨儲存時間而降低。
但是，經(jīng)檢索，對食品添加劑過氧化氫酶酶活力的評價卻一直沒有一個統(tǒng)一的評價方法，不便于貿(mào)易雙方對產(chǎn)品使用性能進行測評，尤其對食品生產(chǎn)者，不能預(yù)測最佳使用量以達到使用預(yù)期，造成浪費。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，現(xiàn)提供一種操作簡單，評價結(jié)果準確性高的食品添加劑過氧化氫酶酶活力評價方法。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：一種食品添加劑過氧化氫酶酶活力評價方法，其創(chuàng)新點在于：經(jīng)過待測酶稀釋液的制備、測定試驗、空白試驗和結(jié)果計算四個步驟，完成食品添加劑過氧化氫酶酶活力評價方法；具體步驟如下：
（1）待測酶稀釋液的制備：準確量取過氧化氫酶1ml，放置于100ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至100ml刻度線，備用；
（2）測定試驗：用移液管準確加入25ml的過氧化氫溶液于250ml三角瓶中，然后將三角瓶放于25℃恒溫水浴鍋中至恒溫，然后用移液管向三角瓶中加入1ml過氧化氫酶稀釋液，同時開始準確計時5min，立即加入5ml濃度為10%的硫酸溶液，搖晃均勻，然后用0.1mol/l高錳酸鉀標準溶液滴定于三角瓶內(nèi)，直至出現(xiàn)粉紅色為止，記錄高錳酸鉀的滴定量v1；
（3）空白試驗：用移液管準確加入25ml的過氧化氫溶液于250ml三角瓶中，然后將三角瓶放于25℃恒溫水浴鍋中至恒溫，然后用移液管向三角瓶中加入1ml煮死的過氧化氫酶稀釋液，同時開始準確計時5min，立即加入5ml濃度為10%的硫酸溶液，搖晃均勻，然后用0.1mol/l高錳酸鉀標準溶液滴定于三角瓶內(nèi)，直至出現(xiàn)粉紅色為止，記錄高錳酸鉀的滴定量v0；
（4）結(jié)果計算：
式中，x表示過氧化氫酶酶活力，單位為u/ml；v0表示空白試驗中消耗的高錳酸鉀標準溶液體積，單位為ml；v1表示測試試驗中消耗的高錳酸鉀標準溶液體積，單位為ml；c表示高錳酸鉀標準溶液的濃度，單位為mol/l。
進一步的，所述步驟（2）中的過氧化氫溶液由3ml濃度為30%的過氧化氫經(jīng)過ph為7.0的磷酸鹽緩沖溶液稀釋至500ml而成。
進一步的，所述磷酸鹽緩沖溶液由十二水磷酸氫二鈉和二水磷酸氫二鈉混合而成，所述磷酸鹽緩沖溶液的具體制備方法為：分別稱取43g十二水磷酸氫二鈉和12.4g二水磷酸二氫鈉，加入蒸餾水溶解，然后選用蒸餾水定溶至1000ml，即完成了磷酸鹽緩沖溶液。
本發(fā)明的有益效果如下：本發(fā)明簡便易于實施，得出的結(jié)果較為精準，從而為食品添加劑過氧化氫酶的生產(chǎn)者及使用者評價該酶的當前活力高低提出了可選的解決方案。
具體實施方式
以下由特定的具體實施例說明本發(fā)明的實施方式，熟悉此技術(shù)的人士可由本說明書所揭露的內(nèi)容輕易地了解本發(fā)明的其他優(yōu)點及功效。
一種食品添加劑過氧化氫酶酶活力評價方法，經(jīng)過待測酶稀釋液的制備、測定試驗、空白試驗和結(jié)果計算四個步驟，完成食品添加劑過氧化氫酶酶活力評價方法；具體步驟如下：
（1）待測酶稀釋液的制備：準確量取過氧化氫酶1ml，放置于100ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至100ml刻度線，備用；
（2）測定試驗：用移液管準確加入25ml的過氧化氫溶液于250ml三角瓶中，然后將三角瓶放于25℃恒溫水浴鍋中至恒溫，然后用移液管向三角瓶中加入1ml過氧化氫酶稀釋液，同時開始準確計時5min，立即加入5ml濃度為10%的硫酸溶液，搖晃均勻，然后用0.1mol/l高錳酸鉀標準溶液滴定于三角瓶內(nèi)，直至出現(xiàn)粉紅色為止，記錄高錳酸鉀的滴定量v1；
（3）空白試驗：用移液管準確加入25ml的過氧化氫溶液于250ml三角瓶中，然后將三角瓶放于25℃恒溫水浴鍋中至恒溫，然后用移液管向三角瓶中加入1ml煮死的過氧化氫酶稀釋液，同時開始準確計時5min，立即加入5ml濃度為10%的硫酸溶液，搖晃均勻，然后用0.1mol/l高錳酸鉀標準溶液滴定于三角瓶內(nèi)，直至出現(xiàn)粉紅色為止，記錄高錳酸鉀的滴定量v0；
（4）結(jié)果計算：
式中，x表示過氧化氫酶酶活力，單位為u/ml；v0表示空白試驗中消耗的高錳酸鉀標準溶液體積，單位為ml；v1表示測試試驗中消耗的高錳酸鉀標準溶液體積，單位為ml；c表示高錳酸鉀標準溶液的濃度，單位為mol/l。
過氧化氫溶液由3ml濃度為30%的過氧化氫經(jīng)過ph為7.0的磷酸鹽緩沖溶液稀釋至500ml而成。
磷酸鹽緩沖溶液由十二水磷酸氫二鈉和二水磷酸氫二鈉混合而成，磷酸鹽緩沖溶液的具體制備方法為：分別稱取43g十二水磷酸氫二鈉和12.4g二水磷酸二氫鈉，加入蒸餾水溶解，然后選用蒸餾水定溶至1000ml，即完成了磷酸鹽緩沖溶液。
本發(fā)明簡便易于實施，得出的結(jié)果較為精準，從而為食品添加劑過氧化氫酶的生產(chǎn)者及使用者評價該酶的當前活力高低提出了可選的解決方案。
上述實施例只是本發(fā)明的較佳實施例，并不是對本發(fā)明技術(shù)方案的限制，只要是不經(jīng)過創(chuàng)造性勞動即可在上述實施例的基礎(chǔ)上實現(xiàn)的技術(shù)方案，均應(yīng)視為落入本發(fā)明專利的權(quán)利保護范圍內(nèi)。