本公開涉及精神疾病客觀診斷、精神分裂癥病程嚴(yán)重程度診斷、首發(fā)精神分裂癥與雙相情感障礙的鑒別診斷、客觀生物標(biāo)志物、外周血生物標(biāo)記物。

背景技術(shù)：

精神分裂癥(schizophrenia)是一種常見的精神疾病，全球人群中的患病率為0.3％-0.7％。精神分裂癥多起病于青壯年，常有感知、思維、情感、行為等多方面的障礙和精神活動的不協(xié)調(diào)，嚴(yán)重影響患者的身體功能和生活質(zhì)量。盡管一些患者可以通過治療得以康復(fù)，但大多數(shù)會經(jīng)歷長期反復(fù)發(fā)作，因此精神分裂癥不僅是個(gè)人的疾病，同時(shí)也是一個(gè)不可小覷的社會問題，對其家庭、衛(wèi)生保健系統(tǒng)和整個(gè)社會都會造成明顯的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

目前，臨床上對精神分裂癥的診斷主要是根據(jù)病人的詳細(xì)病史與精神癥狀，再參考其發(fā)病年齡、病期、病程等來做綜合判斷，因此總體上是一個(gè)依賴于醫(yī)生主觀經(jīng)驗(yàn)的過程，診斷結(jié)果常常因人而異。為了使精神分裂癥的診斷更加客觀化，提高診斷的一致性和準(zhǔn)確度，近年來，世界各地的科研工作者一直致力于尋找精神分裂癥的生物標(biāo)志物，建立有效的檢測方法。生物標(biāo)志物指可供客觀測定和評價(jià)的普通生理或病理或治療過程中的某種特征性的生化指標(biāo)，通過對它的測定可以獲知機(jī)體當(dāng)前所處的生物學(xué)過程中的進(jìn)程。生物標(biāo)志物的化學(xué)本質(zhì)可以是dna、rna、蛋白或代謝物，一般從體液獲得。將生物標(biāo)志物應(yīng)用于精神分裂癥，可以有效輔助當(dāng)前診斷中不確定的人為因素，減少錯(cuò)/誤診率并有助于指導(dǎo)用藥和康復(fù)過程。

因此，本領(lǐng)域急需可用于診斷首發(fā)精神分裂癥的生物標(biāo)志物，該標(biāo)志物應(yīng)該可靠，還應(yīng)具備良好的靈敏度和特異度。

精神病性癥狀是精神分裂癥的標(biāo)志性癥狀，雙相情感障礙患者在躁狂和抑郁發(fā)作期間也可以有這些癥狀，比如幻覺和妄想。而這兩者的治療方法相去甚遠(yuǎn)，精神分裂癥主要采用抗精神病藥物，而雙相情感障礙主要采用情感穩(wěn)定劑治療。另一方面，精神分裂癥患者常出現(xiàn)陰性癥狀，即寡言少語，行為減少，神情淡漠等，這與嚴(yán)重抑郁癥的表現(xiàn)很像，但治療方法完全不同，對于抑郁癥，主要采用抗抑郁藥。錯(cuò)誤診斷將導(dǎo)致患者得不到有效治療，同時(shí)也將極大打擊患者的治療信心和對醫(yī)生醫(yī)院的信任，降低依從性，進(jìn)一步造成各種嚴(yán)重的后果，因此迫切需要對精神分裂癥與上述兩種疾病進(jìn)行鑒別診斷。

目前檢測精神分裂癥的生物標(biāo)志物存在檢測靈敏度和準(zhǔn)確度不高，尚沒有能夠區(qū)分精神分裂癥和雙相精神障礙以及抑郁癥的檢測方法。

il-15是白介素家族之一，屬4α超螺旋細(xì)胞因子超家族，其受體是由α、β和γ亞基構(gòu)成的三聚體，α亞基可特異性的結(jié)合il-15。il-15/il-15rα廣泛分布于各種組織細(xì)胞，除了能促進(jìn)t細(xì)胞、nk細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等免疫細(xì)胞增殖分化以及功能成熟外，還可調(diào)節(jié)各種非免疫細(xì)胞功能，如促進(jìn)纖維母細(xì)胞、上皮細(xì)胞、肌細(xì)胞、肝細(xì)胞、角化細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等的增殖和分化，抑制凋亡。

本發(fā)明人通過檢測常見精神疾病患者及對照人群中的血清中游離il-15rα的水平提供了上述技術(shù)問題的解決方案。

本公開提供了一個(gè)用于診斷首發(fā)精神分裂癥的客觀檢測方法，即檢測外周血中的游離il-15rα的水平。有如下突出優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)：

1.對首發(fā)精神分裂癥的診斷有較高的特異性和靈敏度。

2.屬于外周血指標(biāo)，可方便獲取。

3.單指標(biāo)檢測方法，只需測一個(gè)指標(biāo)，方便將來推廣使用。也可方便聯(lián)合其它檢測方式得出更可靠的結(jié)果。

4.可以對首發(fā)精神分裂癥的發(fā)病嚴(yán)重程度進(jìn)行監(jiān)控。

5.可以對首發(fā)精神分裂癥和雙相情感障礙以及抑郁癥進(jìn)行區(qū)分或者鑒別診斷，為精確化治療奠定基礎(chǔ)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

在一方面，本公開涉及il15rα在制備用于診斷首發(fā)精神分裂癥患者的試劑盒中的用途。

在一方面，本公開涉及il15rα在制備用于診斷首發(fā)精神分裂癥患者預(yù)后的試劑盒中的用途。

在另一方面，本公開涉及il15rα在制備用于區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和雙相情感障礙患者的試劑盒中的用途。

在另一方面，本公開涉及il15rα在制備用于區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和抑郁癥患者的試劑盒中的用途。

在一方面，本公開涉及檢測il15rα的試劑在制備用于診斷首發(fā)精神分裂癥患者的試劑盒中的用途。

在一方面，本公開涉及檢測il15rα的試劑在制備用于診斷首發(fā)精神分裂癥患者預(yù)后的試劑盒中的用途。

在另一方面，本公開涉及檢測il15rα的試劑在制備用于區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和雙相情感障礙患者的試劑盒中的用途。

在另一方面，本公開涉及檢測il15rα的試劑在制備用于區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和抑郁癥患者的試劑盒中的用途。

在一方面，本公開涉及判斷首發(fā)精神分裂癥風(fēng)險(xiǎn)的方法，其中外周血中il15rα的含量相比正常對照水平下降，指示患有首發(fā)精神分裂癥的風(fēng)險(xiǎn)上升。

在一方面，本公開涉及區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和抑郁癥患者的方法，其中il15rα的含量相比正常對照水平下降指示患有首發(fā)精神分裂癥的風(fēng)險(xiǎn)上升。

在一方面，本公開涉及區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和雙相情感障礙患者的方法，其中il15rα的含量相比正常對照水平下降指示患有首發(fā)精神分裂癥的風(fēng)險(xiǎn)上升。

在一方面，本公開涉及區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和抑郁癥患者的方法，其中il15rα的含量相比正常對照水平無顯著性差異指示患有抑郁癥的風(fēng)險(xiǎn)上升。

在一方面，本公開涉及區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和雙相情感障礙患者的方法，其中il15rα的含量相比正常對照水平無顯著性差異指示患有雙相情感障礙的風(fēng)險(xiǎn)上升。

根據(jù)前述任一方面，所述檢測il15rα的試劑可以是il15或其抗體，il15rα的配體或其抗體，il15rα的抗體，顯色試劑，發(fā)光標(biāo)志物，染料，熒光標(biāo)志物等。

根據(jù)前述任一方面，本公開涉及檢測外周血、血漿、血清中il15rα的含量。

根據(jù)前述任一方面，本公開通過elisa、western-blot、質(zhì)譜分析、色譜分析、受體-配體親和實(shí)驗(yàn)等檢測il15rα的含量。

在一方面，本公開涉及用于診斷首發(fā)精神分裂癥、雙相情感障礙、或抑郁癥的試劑盒，其中試劑盒中含有檢測il15rα含量的試劑，任選地，所述試劑盒可以含有il15或其抗體，il15rα的配體或其抗體，il15rα的抗體，顯色試劑，發(fā)光標(biāo)志物，染料，熒光標(biāo)志物等。

在另一方面，本發(fā)明的試劑盒還含有其他檢測精神分裂癥、雙相情感障礙、或抑郁癥的標(biāo)志物檢測試劑。

附圖說明

下面參照附圖來描述本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，附圖中：

圖1是可溶性il15rα在正常對照，精分超高危人群，首發(fā)精神分裂癥患者人群中的血清含量。*，p<0.05；****，p<0.0001。

圖2是可溶性il15rα在正常對照，首發(fā)精神分裂癥患者,雙向情感障礙人群中的血清含量。*，p<0.05；****，p<0.0001。

圖3是可溶性il15rα在正常對照，首發(fā)精神分裂癥患者,抑郁癥人群中的血清含量。*，p<0.05；****，p<0.0001。

具體實(shí)施方式

使用il15rα制備用于診斷首發(fā)精神分裂癥患者的試劑盒可以包括表達(dá)純化il15rα多肽、突變體、片段、抗原表位、融合蛋白等，然后制備相應(yīng)的抗體或抗原結(jié)合片段用于檢測對應(yīng)的配體或抗原，也可以使用il15rα多肽、突變體、片段、抗原表位、融合蛋白在試劑盒中作為陽性對照或競爭性結(jié)合蛋白等。

使用il15rα制備用于診斷首發(fā)精神分裂癥患者預(yù)后的試劑盒可以包括表達(dá)純化il15rα多肽、突變體、片段、抗原表位、融合蛋白等，然后制備相應(yīng)的抗體或抗原結(jié)合片段用于檢測對應(yīng)的配體或抗原，也可以使用il15rα多肽、突變體、片段、抗原表位、融合蛋白在試劑盒中作為陽性對照或競爭性結(jié)合蛋白等。

使用il15rα制備用于區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和雙相情感障礙患者的試劑盒可以包括表達(dá)純化il15rα多肽、突變體、片段、抗原表位、融合蛋白等，然后制備相應(yīng)的抗體或抗原結(jié)合片段用于檢測對應(yīng)的配體或抗原，也可以使用il15rα多肽、突變體、片段、抗原表位、融合蛋白在試劑盒中作為陽性對照或競爭性結(jié)合蛋白等。

使用il15rα制備用于區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和抑郁癥患者的試劑盒可以包括表達(dá)純化il15rα多肽、突變體、片段、抗原表位、融合蛋白等，然后制備相應(yīng)的抗體或抗原結(jié)合片段用于檢測對應(yīng)的配體或抗原，也可以使用il15rα多肽、突變體、片段、抗原表位、融合蛋白在試劑盒中作為陽性對照或競爭性結(jié)合蛋白等。

檢測il15rα的試劑可以包括il15或其抗體，il15rα的配體或其抗體，il15rα的抗體，顯色試劑，發(fā)光標(biāo)志物，染料，熒光標(biāo)志物等。本領(lǐng)域技術(shù)人員明白，本公開的檢測外周血中的游離il-15rα的水平可以使用商品化的elisa試劑盒，也可以使用western-blot、質(zhì)譜分析、色譜分析、受體-配體親和實(shí)驗(yàn)等檢測il15rα的含量。根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)條件和需要，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以知道如何選擇常規(guī)檢測手段，只要該手段可以檢測外周血中的游離il-15rα的水平即可。本公開使用了市場銷售的商品化可溶性il-15rαelisa檢測試劑盒對外周血中il15rα的水平進(jìn)行了檢測，根據(jù)il15rα的水平高低比較可以進(jìn)行判斷。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，其他檢測方法，例如western-blot可以根據(jù)檢測條帶的粗細(xì)、深淺、發(fā)光強(qiáng)度等對il15rα的水平進(jìn)行比較，質(zhì)譜分析可以進(jìn)行定量比較、色譜分析可以根據(jù)外周血中il15rα的特征峰面積等進(jìn)行對應(yīng)的含量比較，受體配體親和實(shí)驗(yàn)可以采用il15rα的配體例如il15或il15rα的抗體作為特異性親和配體來檢測il15rα的水平。

本領(lǐng)域技術(shù)人員同樣可以理解，檢測il15rα在外周血中的水平可以檢測全血、血漿或血清中的il15rα的水平，根據(jù)具體情況可以檢測外周血全血中il15rα的水平，或者分離血漿后檢測il15rα的水平，或者分離血清后檢測il15rα的水平。

根據(jù)本公開的方法，當(dāng)使用現(xiàn)有的心理學(xué)評定量表或精神疾病診斷量表或手冊等無法判斷時(shí)，檢測外周血中il15rα的水平可以提供更客觀的判斷依據(jù)。例如，外周血中il15rα的含量相比正常對照水平下降，指示患有首發(fā)精神分裂癥的風(fēng)險(xiǎn)上升。

根據(jù)本公開涉及區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和抑郁癥患者的方法，其中il15rα的含量相比正常對照水平下降指示患有首發(fā)精神分裂癥的可能性增加。

根據(jù)本公開的區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和雙相情感障礙患者的方法，其中il15rα的含量相比正常對照水平下降指示患有首發(fā)精神分裂癥的可能性增加。

根據(jù)本公開的區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和抑郁癥患者的方法，其中il15rα的含量相比正常對照水平無顯著性差異指示患有抑郁癥的可能性增加。

根據(jù)本公開的區(qū)分首發(fā)精神分裂癥患者和雙相情感障礙患者的方法，其中il15rα的含量相比正常對照水平無顯著性差異指示患有雙相情感障礙的可能性。

本公開還涉及用于診斷精神分裂癥、雙相情感障礙、或抑郁癥的試劑盒，其中試劑盒中含有檢測il15rα含量的試劑，任選地，所述試劑盒可以含有il15或其抗體，il15rα的配體或其抗體，il15rα的抗體，顯色試劑，發(fā)光標(biāo)志物，染料，熒光標(biāo)志物等。

在另一方面，本發(fā)明的試劑盒還含有其他檢測精神分裂癥、雙相情感障礙、或抑郁癥的標(biāo)志物檢測試劑。

例如本發(fā)明的試劑盒可以同時(shí)包含檢測il15rα含量的試劑和精神分裂癥的其他生物標(biāo)志物檢測試劑，所述精神分裂癥的其他生物標(biāo)志物的檢測試劑例如檢測a)3-羥基丁酸或其類似物；b)甘油酸或其類似物；和c)半胱氨酸或其類似物的一種或多種的試劑；還例如檢測microrna分子標(biāo)志物的試劑，所述血液microrna分子標(biāo)志物是has-mir-132，mir-132成熟序列為：uaacagucuacagccauggucg；再例如檢測用于精神分裂癥診斷的lncrna標(biāo)志物的檢測試劑或者檢測精神分裂癥診斷的circrna標(biāo)志物的檢測試劑等。

如本發(fā)明的試劑盒可以同時(shí)包含檢測il15rα含量的試劑和抑郁癥的其他生物標(biāo)志物檢測試劑，所述抑郁癥的其他生物標(biāo)志物的檢測試劑例如檢測腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、皮質(zhì)醇、表皮生長因子、髓過氧化物酶、催乳素、抵抗素、可溶性腫瘤壞死因子α受體ii型的水平的試劑；還例如檢測microrna分子標(biāo)志物的試劑和檢測用于抑郁癥診斷的lncrna標(biāo)志物的檢測試劑或者檢測抑郁癥診斷的circrna標(biāo)志物的檢測試劑等。

如本發(fā)明的試劑盒可以同時(shí)包含檢測il15rα含量的試劑和雙相情感障礙的其他生物標(biāo)志物檢測試劑。

通過與其他生物標(biāo)志物的檢測試劑組合使用，本公開的試劑盒可以提供更客觀、準(zhǔn)確的診斷結(jié)果。

本公開所述的精神分裂癥超高?；蚓殖呶Ｖ妇穹至寻Y患者在首次發(fā)病前所處的精神分裂癥前驅(qū)期(prodromalstage)，有前驅(qū)期表現(xiàn)的人群發(fā)展為精神分裂癥的可能性較大，這類人群目前被稱為超高危人群(ultrahighriskforpsychosis,uhr)。

本公開所述的首發(fā)精神分裂癥是指患者處于首次精神病發(fā)作期，未用藥或發(fā)病以來連續(xù)用抗精神病藥不超過1個(gè)月的狀態(tài)。

實(shí)施例

方法：

所有參加實(shí)驗(yàn)的對象自愿簽署知情同意書，并能依從研究方案；右利手，年齡在16～40歲之間。各組間年齡、性別、教育程度匹配，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

出現(xiàn)以下情況之一者需排除此研究之外：

妊娠，哺乳期婦女；

極度興奮、沖動、不合作者；

有嚴(yán)重自殺企圖者；

頭部外傷史，意識喪失超過一小時(shí)者；

伴隨嚴(yán)重軀體疾病者或器質(zhì)性腦功能疾病，明顯影響精神疾病治療者；

排除繼發(fā)抑郁癥狀(軀體疾病、藥物或其它原因)；

近期3個(gè)月內(nèi)接受電痙攣(mect)治療者。

首發(fā)精神分裂癥組入組標(biāo)準(zhǔn)：符合美國精神疾病診斷與統(tǒng)計(jì)手冊第四版(dsm-iv)的精神分裂癥診斷標(biāo)準(zhǔn)；發(fā)病年齡15歲以上，處于首次精神病發(fā)作期，未用藥或發(fā)病以來連續(xù)用抗精神病藥不超過1個(gè)月。

精神分裂癥超高危組入組標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)精神病風(fēng)險(xiǎn)綜合征定式訪談(structuredinterviewforpsychosis-risksyndromes,sips)篩查符合精神病風(fēng)險(xiǎn)綜合征診斷。

雙向情感障礙入組標(biāo)準(zhǔn)：符合美國精神疾病診斷與統(tǒng)計(jì)手冊第四版(dsm-iv)的雙相情感障礙診斷標(biāo)準(zhǔn)。

抑郁癥入組標(biāo)準(zhǔn)：符合美國精神疾病診斷與統(tǒng)計(jì)手冊第四版(dsm-iv)的抑郁癥診斷標(biāo)準(zhǔn)。

健康對照組：與上述各組年齡、性別、受教育程度相匹配的健康人。

根據(jù)已通過的倫理審查實(shí)驗(yàn)方案，以及診斷標(biāo)準(zhǔn)，篩選出正常對照人群、首發(fā)精神分裂癥、超高危人群、雙相情感障礙和抑郁癥人群。受試者例數(shù)：首發(fā)精神分裂癥患者70例，抑郁患者98例，雙相患者86例，精分超高危64例，健康97例。共395例。抽取外周血5毫升，常溫下促凝管內(nèi)凝固，500g離心10分鐘，分離上層血清，并即刻分裝，儲藏于-80℃超低溫冰箱，備用。

購買市場銷售的商品化可溶性il-15rαelisa檢測試劑盒，按照使用說明，每名被試取100ul血清進(jìn)行檢測。本實(shí)驗(yàn)采用的試劑盒為武漢華美生物的人白介素15受體α亞基(il15ra)elisakit(貨號csb-el011594hu)。

實(shí)施例1：首發(fā)精神分裂癥的診斷以及首發(fā)精神分裂癥患病嚴(yán)重程度的判定

取精神分裂癥人群，精分超高危人群和健康對照人群的血清，用商品化可溶性il-15rαelisa檢測試劑盒檢測血清中的可溶性il15rα濃度。采用t檢驗(yàn)判斷不同組之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果如圖1中所示，首發(fā)精神分裂癥患者的可溶性il15rα濃度最低，并與健康對照組有極顯著差異，而超高危人群介于正常人與患者之間，表現(xiàn)出良好的量效關(guān)系。該結(jié)果表明可以利用可溶性il15rα濃度檢測來進(jìn)行首發(fā)精神分裂癥的診斷以及首發(fā)精神分裂癥患病嚴(yán)重程度的判定。

實(shí)施例2：首發(fā)精神分裂癥的診斷以及首發(fā)精神分裂癥與雙相情感障礙的鑒別診斷

取首發(fā)精神分裂癥人群，雙相情感障礙人群和健康對照人群的血清，用商品化可溶性il-15rαelisa檢測試劑盒檢測血清中的可溶性il15rα濃度。采用t檢驗(yàn)判斷不同組之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果如圖2中所示，首發(fā)精神分裂癥患者的可溶性il15rα濃度最低，并與健康對照組有極顯著差異，而雙相情感障礙人群與健康對照組類似而與首發(fā)精神分裂癥患者的可溶性il15rα濃度存在顯著性差異。該結(jié)果表明可以利用可溶性il15rα濃度檢測來進(jìn)行首發(fā)精神分裂癥的診斷以及首發(fā)精神分裂癥與雙相情感障礙的鑒別診斷。

實(shí)施例3：首發(fā)精神分裂癥的診斷以及首發(fā)精神分裂癥與抑郁癥的鑒別診斷

取首發(fā)精神分裂癥人群，抑郁癥人群和健康對照人群的血清，用商品化可溶性il-15rαelisa檢測試劑盒檢測血清中的可溶性il15rα濃度。采用t檢驗(yàn)判斷不同組之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)果如圖2中所示，首發(fā)精神分裂癥患者的可溶性il15rα濃度最低，并與健康對照組有極顯著差異，而抑郁癥人群與健康對照組類似而與首發(fā)精神分裂癥患者的可溶性il15rα濃度存在顯著性差異。該結(jié)果表明可以利用可溶性il15rα濃度檢測來進(jìn)行首發(fā)精神分裂癥的診斷以及首發(fā)精神分裂癥與抑郁癥的鑒別診斷。