本實用新型涉及蛋白質免疫印跡技術領域，尤其涉及一種用于蛋白質免疫印跡的裝置。

背景技術：

蛋白質免疫印跡技術(Western Blot，WB)是一種在生命科學領域被廣泛應用的蛋白質鑒定技術，傳統(tǒng)的WB主要由電泳、轉印和檢測三部分組成，電泳用于將蛋白質按照分子量的大小進行分離，轉印則是將前者分離后的蛋白質轉移到高分子膜上，檢測部分則是利用抗體的特異性識別技術，對轉移至高分子膜上的不同蛋白質進行檢測。

目前蛋白質免疫印跡技術過程為：第一步是做SDS-PAGE電泳，使待測樣品中的蛋白質按分子量大小在凝膠中分成條帶；第二步把凝膠中已分成條帶的蛋白質轉移到一種固相支持物上，用的最多的材料是硝酸纖維素膜(NC膜，nitrocellulose)和PVDF膜(Polyvinylidene fluoride，聚偏二氟乙烯膜)；第三步是用特異性的抗體檢測出已經(jīng)印跡在膜上的所要研究的相應抗原。免疫檢測的方法可以是直接的和間接的，現(xiàn)在多用間接免疫酶標的方法，在用特異性的第一抗體免疫雜交后，再用酶標的第二抗體(堿性磷酸酶(AP)或辣根過氧化物酶(HRP)標記的抗第一抗體的抗體)免疫雜交，再加酶的底物顯色或者通過膜上的顏色或X光底片上暴光的條帶來顯示抗原的存在。給膜加抗體時，通常是將膜修剪成不同大小的部分，然后將第一抗體溶液加在一次性手套、保鮮膜或封口膜等上，再將膜放于抗體溶液液面上，室溫下孵育一段時間后，用TBS清洗后準備二抗溶液并與膜接觸。

但是，上述方法操作起來很繁瑣，并且一次性手套、保鮮膜或封口膜只能使用一次，每換一次抗體就需要使用新的；還有這樣容易造成抗體溶液溢出或污染，造成抗體的浪費。

技術實現(xiàn)要素：

本實用新型提供了一種用于蛋白質免疫印跡的裝置，以解決目前蛋白質免疫印跡技術操作繁瑣、抗體易浪費的問題。

本實用新型提供了一種用于蛋白質免疫印跡的裝置，包括兩兩平行的透明頂板、支撐板、展臺和底板，其中：

所述支撐板位于所述透明頂板和底板之間，且所述透明頂板連接所述底板；

所述支撐板上均勻設置多個導向槽，所述導向槽沿所述支撐板的寬度方向設置；所述支撐板上、所述導向槽的兩側分別設置一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽，且所述一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽沿所述導向槽的延伸方向設置；所述展臺位于所述透明頂板和支撐板之間，所述展臺上設置滑桿，且所述滑桿垂直于所述展臺；所述滑桿與所述導向槽相匹配，且所述滑桿分別沿所述導向槽水平移動和豎直移動；

所述透明頂板上設置與所述一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽相對應的一抗入口、清洗液入口和二抗入口。

可選的，所述展臺的滑桿分別連接水平驅動電機和豎直驅動電機，所述水平驅動電機驅動所述滑桿沿所述導向槽水平移動，所述豎直驅動電機驅動所述滑桿沿所述導向槽豎直移動。

可選的，所述展臺的滑桿還連接旋轉機構，所述旋轉機構驅動所述滑桿繞所述導向槽轉動。

可選的，所述透明頂板上刻有刻度線，所述刻度線所在直線垂直于所述導向槽的中心軸線所在直線，且所述刻度線對應于所述一抗反應槽。

可選的，所述透明頂板和底板上分別設有相對應的通孔，所述透明頂板和底板通過所述通孔連接。

本實用新型提供的技術方案可以包括以下有益效果：

本實用新型提供的用于蛋白質免疫印跡的裝置包括兩兩平行的透明頂板、支撐板、展臺和底板，其中，支撐板位于透明頂板和底板之間，且透明頂板連接底板；支撐板上均勻設置多個導向槽，導向槽沿支撐板的寬度方向設置，支撐板上、導向槽的兩側分別設置一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽，且一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽沿導向槽的延伸方向設置。展臺位于透明頂板和支撐板之間，展臺上設置滑桿，且滑桿垂直于展臺；滑桿與導向槽相匹配，且滑桿分別沿導向槽水平移動和豎直移動。透明頂板上設置與一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽相對應的一抗入口、清洗液入口和二抗入口。本實用新型提供的用于蛋白質免疫印跡的裝置使用時，展臺上放置印跡好的膜，展臺移動至一抗反應槽，由一抗入口向一抗反應槽內(nèi)加入第一抗體溶液，展臺下降，展臺上的膜浸入第一抗體溶液內(nèi)，一段時間后，展臺移動至清洗槽，清洗槽內(nèi)的清洗液清洗膜，之后展臺移動至二抗反應槽，進行第二抗體的結合；抗體結合過程中避免將抗體加在一次性手套、保鮮膜或封口膜等上，支撐板可以清洗后進行下一次試驗，且操作過程簡單；還有不同分子量的蛋白質分開進行免疫雜交，避免了抗體之間相互影響或污染等問題。

應當理解的是，以上的一般描述和后文的細節(jié)描述僅是示例性和解釋性的，并不能限制本實用新型。

附圖說明

為了更清楚地說明本實用新型的技術方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，對于本領域普通技術人員而言，在不付出創(chuàng)造性勞動性的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本實用新型實施例提供的一種用于蛋白質免疫印跡裝置的結構示意圖；

圖2為本實用新型實施例提供的一種用于蛋白質免疫印跡裝置中支撐板和展臺的結構示意圖；

圖3為本實用新型實施例提供的一種用于蛋白質免疫印跡裝置中展臺的結構示意圖；

圖4為本實用新型實施例提供的一種用于蛋白質免疫印跡裝置中透明頂板的結構示意圖；

圖1-圖4符號表示：1-透明頂板，11-一抗入口，12-清洗液入口，13-二抗入口，14-刻度線，2-支撐板，21-一抗反應槽，22-清洗槽，23-二抗反應槽，24-導向槽，3-展臺，31-滑桿，4-底板，5-通孔。

具體實施方式

參見圖1，為本實用新型實施例提供的用于蛋白質免疫印跡的裝置的結構示意圖。

本實用新型實施例提供的用于蛋白質免疫印跡的裝置包括兩兩平行的透明頂板1、支撐板2、展臺3和底板4，其中：

支撐板2位于透明頂板1和底板4之間，且透明頂板1連接底板4，透明頂板1和底板4用于固定支撐板2，防止支撐板2活動，從而影響免疫雜交。

如圖2所示，支撐板2上均勻設置多個導向槽24，導向槽24沿支撐板2的寬度方向設置。支撐板2上、導向槽24的兩側分別設置一抗反應槽21、清洗槽22和二抗反應槽23，且一抗反應槽21、清洗槽22和二抗反應槽23沿導向槽24的延伸方向設置，沿導向槽24的延伸方向依次為一抗反應槽21、清洗槽22和二抗反應槽23。

一抗反應槽21用于進行蛋白質的抗血清(第一抗體)結合，印跡膜中只有待研究的蛋白質與一抗結合，而其他蛋白質不與一抗結合。清洗槽22用于清洗印跡膜，清洗液(TBST緩沖液)清洗去除未結合的一抗，使得印跡膜中只有待研究的蛋白質的位置上結合著一抗。二抗反應槽23用于帶標記的二抗與一抗結合，二抗是指一抗的抗體，如一抗是從鼠中獲得的，則二抗是抗鼠的抗體。處理后，帶有標記的二抗與一抗結合，可以指示一抗的位置，即是待研究蛋白質的位置。

展臺3位于透明頂板1和支撐板2之間，如圖3所示，展臺3上設置滑桿31，且滑桿31垂直于展臺3?；瑮U31與導向槽24相匹配，且滑桿31可分別沿導向槽24水平移動和豎直移動，實現(xiàn)展臺3的水平移動和豎直移動?；瑮U31沿導向槽24水平移動時，帶動展臺3依次移動至一抗反應槽21、清洗槽22和二抗反應槽23，逐步實現(xiàn)蛋白質的免疫雜交。滑桿31沿導向槽24豎直移動時，改變展臺3與支撐板2之間的距離，使得展臺3浸入反應槽的溶液內(nèi)，完成免疫雜交。

為實現(xiàn)展臺3自動化移動，展臺3的滑桿31分別連接水平驅動電機和豎直驅動電機，水平驅動電機驅動滑桿31沿導向槽24水平移動，豎直驅動電機驅動滑桿31沿導向槽24豎直移動，提高自動化水平。

一抗反應槽21、清洗槽22和二抗反應槽23形成一列，而導向槽24設置在兩列一抗反應槽21、清洗槽22和二抗反應槽23之間，因而展臺3需要能夠旋轉，根據(jù)不同分子量的待研究蛋白質朝向不同的一抗反應槽21，因此展臺3的滑桿31還連接旋轉機構，旋轉機構驅動滑桿31繞導向槽24轉動，實現(xiàn)不同分子量蛋白質的免疫雜交。

為提高雜交、清洗效果，展臺3的滑桿31還可以連接搖擺機構，搖擺機構驅動展臺3緩慢搖動，使得聚合物膜上的蛋白質分子與一抗、TBST緩沖液或二抗充分結合。

如圖4所示，為方便向支撐板2上的一抗反應槽21、清洗槽22和二抗反應槽23內(nèi)加入溶液，透明頂板1上設置與一抗反應槽21、清洗槽22和二抗反應槽23相對應的一抗入口11、清洗液入口12和二抗入口13。將一抗用TBST緩沖液稀釋至適當濃度，使用吸管或滴管等將適量一抗溶液注入一抗反應槽21，進行一抗與待研究蛋白質的結合，室溫下孵育1-2h。向清洗槽22內(nèi)注入TBST緩沖液，之后用TBST緩沖液在室溫下清洗兩次，每次10min，去除未結合的一抗。將二抗用TBST緩沖液稀釋至適當濃度，同樣加入二抗反應槽23內(nèi)，將帶標記的二抗與一抗進行結合，指示出待研究蛋白質的位置。

進一步地，為方便識別待研究蛋白質，在透明頂板1上刻有刻度線14，刻度線14所在直線垂直于導向槽24的中心軸線所在直線，且刻度線14對應于一抗反應槽21，刻度線14表示蛋白質分子量。以分子量為72與95之間的膜加抗體為例，假設分子量95對應在8000微升刻度線上，分子量72對應在6000微升刻度線上，則所需加抗體量為(8000-6000)*5/10＝1000微升。

為方便固定支撐板2，透明頂板1和底板4上分別設有相對應的通孔5，透明頂板1和底板4通過通孔5連接。開始之前，將展臺3通過滑桿31安裝在支撐板2上，再將支撐板2放于透明頂板1和底板4之間，保證支撐板2上的一抗反應槽21與刻度線14一一對應，最后夾緊固定。反應完成后，分離透明頂板1和底板4，取出支撐板2進行清洗。

本申請?zhí)峁┑挠糜诘鞍踪|免疫印跡的裝置在使用時，將印跡分離后蛋白質的聚合物膜平鋪于展臺3上，再將展臺3通過滑桿31安裝于支撐板2上，再將支撐板2放置于透明頂板1和底板4之間，保持支撐板2上的一抗反應槽21、清洗槽22和二抗反應槽23與透明頂板1上的一抗入口11、清洗液入口12和二抗入口13一一對應，然后將螺栓擰緊于透明頂板1和底板4上，以將兩者固定并夾緊支撐板2，并保證支撐板2上的一抗反應槽21與刻度線14對應。組裝完成后，分別向一抗反應槽21、清洗槽22和二抗反應槽23內(nèi)注入適量的一抗稀釋液、TBST緩沖液和二抗稀釋液，水平、豎直移動展臺3，使得展臺3上的聚合物膜分別浸入一抗反應槽21、清洗槽22和二抗反應槽23內(nèi)的溶液內(nèi)，完成免疫雜交。

從上述實施例可以看出，本實用新型實施例提供的用于蛋白質免疫印跡的裝置包括兩兩平行的透明頂板、支撐板、展臺和底板，其中，支撐板位于透明頂板和底板之間，且透明頂板連接底板，用于夾緊固定支撐板。支撐板上均勻設置多個導向槽，導向槽沿支撐板的寬度方向設置；支撐板上、導向槽的兩側分別設置一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽，且一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽沿導向槽的延伸方向設置，分別進行一抗、清洗和二抗反應。展臺位于透明頂板和支撐板之間，站臺上設置滑桿，且滑桿垂直于展臺；滑桿與導向槽相匹配，且滑桿分別沿導向槽水平移動和豎直移動，滑桿沿導向槽水平移動帶動展臺分別移動至一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽，滑桿沿導向槽豎直移動帶動展臺浸入一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽的溶液內(nèi)，完成免疫雜交。透明頂板上設置與一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽相對應的一抗入口、清洗液入口和二抗入口，分別向一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽內(nèi)注入一抗稀釋液、TBST緩沖液和二抗稀釋液。透明頂板上還刻有刻度線，刻度線所在直線垂直于導向槽的中心軸線所在直線，且刻度線對應于一抗反應槽，刻度線表示蛋白質分子量。本申請?zhí)峁┑挠糜诘鞍踪|免疫印跡的裝置根據(jù)支撐板上的一抗反應槽、清洗槽和二抗反應槽完成蛋白質的免疫雜交，反應完成后清洗支撐板后可進行下一次試驗，避免每次反應都要更換抗體膜。還有可同時進行不同分子量蛋白質的免疫雜交，相互之間不影響，避免了抗體之間相互影響或污染的問題。

本領域技術人員在考慮說明書及實踐這里實用新型的公開后，將容易想到本實用新型的其它實施方案。本申請旨在涵蓋本實用新型的任何變型、用途或者適應性變化，這些變型、用途或者適應性變化遵循本實用新型的一般性原理并包括本實用新型未公開的本技術領域中的公知常識或慣用技術手段。說明書和實施例僅被視為示例性的，本實用新型的真正范圍和精神由下面的權利要求指出。

以上所述的本實用新型實施方式并不構成對本實用新型保護范圍的限定。