本發(fā)明涉及一種茶多酚含量的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)：

1、茶多酚是茶葉中多酚類(lèi)物質(zhì)的總稱(chēng)，為白色不定形粉末，易溶于水，可溶于乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，不溶于氯仿。綠茶中茶多酚含量較高，占其質(zhì)量的15%～30%，茶多酚的主要成分為：黃烷酮類(lèi)，花色素類(lèi)，黃酮醇類(lèi)和花白素類(lèi)和酚酸及縮酚酸類(lèi)6類(lèi)化合物。其中以黃烷酮類(lèi)（主要是兒茶素類(lèi)化合物）最為重要，占茶多酚總量的60%～80%，其次是黃酮類(lèi)，其他酚類(lèi)物質(zhì)含量比較少。

2、茶多酚以其優(yōu)良的天然抗氧化性能，被廣泛應(yīng)用在醫(yī)藥、食品工業(yè)、化妝品和日用品中。

3、目前檢測(cè)茶多酚含量常用的方法有光譜分析法、電化學(xué)分析法、毛細(xì)管電泳法等。其中，光譜分析法只能測(cè)量總多酚的含量，不能同時(shí)定量分析不同種類(lèi)的茶多酚化合物，而且測(cè)試時(shí)容易受到其他酚類(lèi)化合物的干擾，造成測(cè)定結(jié)果偏高。電化學(xué)分析法也僅能定量測(cè)試總多含量，不能同時(shí)測(cè)定多種化合物，而且需要選擇合適的工作電極，才能得到可靠的結(jié)果。毛細(xì)管電泳法，重復(fù)性相對(duì)較差、分析精度不高、誤差大，儀器設(shè)備也不普及。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是為了克服現(xiàn)有技術(shù)中針對(duì)茶類(lèi)產(chǎn)品中多種茶多酚含量檢測(cè)技術(shù)較少的缺陷，提供了一種茶類(lèi)產(chǎn)品中茶多酚定量的檢測(cè)方法。本發(fā)明的檢測(cè)方法主要檢測(cè)茶類(lèi)原料中的茶多酚，其流動(dòng)相配制簡(jiǎn)單，避免使用管控的化學(xué)試劑；使用通用儀器設(shè)備，便于推廣；檢測(cè)效率高；25分鐘能夠完成檢測(cè)，精密度和準(zhǔn)確性高；且能夠同時(shí)檢測(cè)12種茶多酚的含量。本發(fā)明的檢測(cè)方法適用于檢測(cè)各種茶類(lèi)產(chǎn)品，具有較強(qiáng)的實(shí)用性。

2、本發(fā)明提供了一種茶多酚含量的檢測(cè)方法，其包含以下步驟：將茶類(lèi)產(chǎn)品通過(guò)高效液相色譜中進(jìn)行梯度漸變洗脫，即可；

3、所述高效液相色譜的固定相為c18；

4、所述的梯度漸變洗脫為多段式梯度漸變洗脫；所述高效液相色譜的流動(dòng)相為甲醇及0.01%磷酸水溶液，其中，磷酸水溶液的百分比是指磷酸體積占水體積的百分比。

5、其中，所述多段式梯度漸變洗脫，包括如下步驟，其中，

6、第一梯度中，甲醇的體積比例為15～25%，磷酸水溶液的體積比例為75～85%，優(yōu)選，甲醇的體積比例為20%，磷酸水溶液的體積比例為80%；洗脫時(shí)間為13～17min，優(yōu)選，洗脫時(shí)間為15min；

7、第二梯度中，甲醇的體積比例為25～35%，磷酸水溶液的體積比例為65～75%，優(yōu)選，甲醇的體積比例為30%，磷酸水溶液的體積比例為70%；洗脫時(shí)間為3～7min，優(yōu)選，洗脫時(shí)間為5min；

8、第三梯度中，甲醇的體積比例為35～45%，磷酸水溶液的體積比例為55～65%，優(yōu)選，甲醇的體積比例為40%，磷酸水溶液的體積比例為60%；洗脫時(shí)間為3～7min，優(yōu)選，洗脫時(shí)間為5min；

9、本發(fā)明中，所述茶的種類(lèi)可選自綠茶，紅茶，白茶，雪茶，烏龍茶、黃茶、白茶、黑茶、花茶，茉莉花，鐵觀音，素茶，普洱茶，苦丁茶、還有大紅袍、熊旦茶、參茶、普洱茶中的一種或多種。所述茶類(lèi)產(chǎn)品類(lèi)型可為茶葉，茶凍干粉，茶湯，茶類(lèi)提取物中的一種或多種，所述茶提取物包括且不限于水提，醇提，或其余方式提取出來(lái)的茶多酚類(lèi)的活性成分，優(yōu)選地，所述茶的種類(lèi)為綠茶，所述茶類(lèi)產(chǎn)品為茶葉，茶凍干粉，茶類(lèi)提取物中的一種或多種；更進(jìn)一步地，本發(fā)明還可以用來(lái)檢測(cè)含有茶多酚各類(lèi)飲品，護(hù)膚品。

10、本發(fā)明可檢測(cè)的茶多酚種類(lèi)為，沒(méi)食子酸（以下簡(jiǎn)稱(chēng)ga），(-)-棓兒茶酸/表兒茶素（以下簡(jiǎn)稱(chēng)gc），(-)-表沒(méi)食子酸兒茶素（以下簡(jiǎn)稱(chēng)egc），(-)-兒茶素（以下簡(jiǎn)稱(chēng)c），表兒茶素（以下簡(jiǎn)稱(chēng)ec），(-)-表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(以下簡(jiǎn)稱(chēng)egcg)，(-)-沒(méi)食子酸兒茶素沒(méi)食子酸酯(以下簡(jiǎn)稱(chēng)gcg)，(-)-表兒茶素沒(méi)食子酸酯（以下簡(jiǎn)稱(chēng)ecg），(-)-沒(méi)食子酸兒茶素酯（以下簡(jiǎn)稱(chēng)cg），?茶堿（以下簡(jiǎn)稱(chēng)tp），?可可堿(以下簡(jiǎn)稱(chēng)tb），?咖啡因（以下簡(jiǎn)稱(chēng)caf）中的一種或多種，優(yōu)選地，通過(guò)本發(fā)明的方法，能夠同時(shí)精準(zhǔn)檢測(cè)上述12種茶多酚的含量。

11、?較佳地，所述高效液相色譜的色譜柱為kromasil?100-5-c18?，4.6*250mm*5μm。

12、較佳地，所述高效液相色譜的柱溫可以為本領(lǐng)域常規(guī)柱溫，優(yōu)選為28～35℃，更優(yōu)選30℃。

13、較佳地，所述高效液相色譜的檢測(cè)波長(zhǎng)本領(lǐng)域常規(guī)的檢測(cè)波長(zhǎng)，優(yōu)選為270nm～280nm，更優(yōu)選278nm。

14、較佳地，所述高效液相色譜的流速可以為本領(lǐng)域常規(guī)流速，優(yōu)選為0.8ml/min～1.2ml/min，更優(yōu)選1.0ml/min。

15、較佳地，所述高效液相色譜的進(jìn)樣體積為5～15μl，優(yōu)選10μl。

16、符合本領(lǐng)域常識(shí)的基礎(chǔ)上，上述各優(yōu)選條件，可任意組合，即得本發(fā)明各較佳實(shí)例。

17、本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得。

18、本發(fā)明的積極進(jìn)步效果在于：本發(fā)明所述的一種茶多酚含量的檢測(cè)方法，其流動(dòng)相配制簡(jiǎn)單，避免使用管控的化學(xué)試劑；使用通用儀器設(shè)備，便于推廣；檢測(cè)效率高；精密度和準(zhǔn)確性高；能夠同時(shí)監(jiān)控12種茶多酚的含量。在本發(fā)明的某一較佳實(shí)施例中單次測(cè)定只需要25min，能夠同時(shí)監(jiān)控12種茶多酚；12種茶多酚的峰面積與質(zhì)量濃度呈良好的線性關(guān)系，方法定量限為定量限2.5~25mg/l，回收率94%~103%，rsd≤2.8%。本發(fā)明的檢測(cè)方法適用于檢測(cè)各種茶類(lèi)產(chǎn)品，具有較強(qiáng)的實(shí)用性。

技術(shù)特征：

1.一種茶多酚含量的檢測(cè)方法，其包含以下步驟：將茶類(lèi)產(chǎn)品通過(guò)高效液相色譜中進(jìn)行梯度漸變洗脫；

2.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其中，所述多段式梯度漸變洗脫包括如下步驟：

3.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，所述茶多酚可選自，沒(méi)食子酸（以下簡(jiǎn)稱(chēng)ga），(-)-棓兒茶酸/表兒茶素（以下簡(jiǎn)稱(chēng)gc），(-)-表沒(méi)食子酸兒茶素（以下簡(jiǎn)稱(chēng)egc），(-)-兒茶素（以下簡(jiǎn)稱(chēng)c），表兒茶素（以下簡(jiǎn)稱(chēng)ec），(-)-表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(以下簡(jiǎn)稱(chēng)egcg)，(-)-沒(méi)食子酸兒茶素沒(méi)食子酸酯(以下簡(jiǎn)稱(chēng)gcg)，(-)-表兒茶素沒(méi)食子酸酯（以下簡(jiǎn)稱(chēng)ecg），(-)-沒(méi)食子酸兒茶素酯（以下簡(jiǎn)稱(chēng)cg），?茶堿（以下簡(jiǎn)稱(chēng)tp），?可可堿(以下簡(jiǎn)稱(chēng)tb），?咖啡因（以下簡(jiǎn)稱(chēng)caf）中的一種或多種，優(yōu)選，同時(shí)測(cè)試上述12種茶多酚的含量。

4.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，所述高效液相色譜的色譜柱為kromasil100-5-c184.6*250mm*5μm。

5.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，所述高效液相色譜的柱溫為28～35℃，優(yōu)選30℃。

6.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，所述高效液相色譜的檢測(cè)波長(zhǎng)本領(lǐng)域常規(guī)的檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm～280nm，優(yōu)選278nm。

7.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，所述高效液相色譜的流速為0.8ml/min～1.2ml/min，優(yōu)選1.0ml/min。

8.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，所述高效液相色譜的進(jìn)樣體積為5～15μl，優(yōu)選10μl。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種茶多酚含量的檢測(cè)方法。該檢測(cè)方法能同時(shí)檢測(cè)茶類(lèi)產(chǎn)品中12種茶多酚的含量，其流動(dòng)相配制簡(jiǎn)單，避免使用管控的化學(xué)試劑；使用通用儀器設(shè)備，便于推廣；檢測(cè)效率高；精密度和準(zhǔn)確性高；能夠同時(shí)監(jiān)控一種或多種茶多酚。本發(fā)明的檢測(cè)方法適用于檢測(cè)各類(lèi)樣品包括原料和成品等，具有較強(qiáng)的實(shí)用性。

技術(shù)研發(fā)人員：劉昕,吳建銘
受保護(hù)的技術(shù)使用者：上海伽科高科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9