本公開(kāi)涉及體外診斷領(lǐng)域，特別涉及用于受試者感染相關(guān)的一種血液分析儀，血液分析方法以及細(xì)胞分析試劑及其用途。

背景技術(shù)：

1、感染性疾病是臨床上常見(jiàn)的疾病。其中，膿毒癥(sepsis)屬于嚴(yán)重的感染性疾病。膿毒癥發(fā)生率高，全球每年有超過(guò)1800萬(wàn)嚴(yán)重膿毒癥病例。并且膿毒癥的病情兇險(xiǎn)，病死率高，全球每天約14,000人死于其并發(fā)癥。據(jù)國(guó)外流行病學(xué)調(diào)查顯示，膿毒癥的病死率已經(jīng)超過(guò)心肌梗死，成為重癥監(jiān)護(hù)病房?jī)?nèi)非心臟病患者死亡的主要原因。近年來(lái)，盡管抗感染治療和器官功能支持技術(shù)取得了進(jìn)步，但膿毒癥的病死率仍高達(dá)30％～70％。膿毒癥治療花費(fèi)高，醫(yī)療資源消耗大，嚴(yán)重影響人類的生活質(zhì)量，已經(jīng)對(duì)人類健康造成巨大威脅。

2、針對(duì)感染性疾病的快速鑒別，業(yè)界現(xiàn)有解決方案包括：微生物培養(yǎng)，c反應(yīng)蛋白(c-reactive?protein,crp)、降鈣素原(procalcitonin,pct)和血清淀粉樣蛋白a(serumamyloid?a,saa)等炎癥標(biāo)志物的檢查，血清抗原抗體檢測(cè)和血常規(guī)檢測(cè)。

3、微生物培養(yǎng)被認(rèn)為是最可靠的金標(biāo)準(zhǔn)，。但該方法報(bào)告周期長(zhǎng)、標(biāo)本易受污染且假陰性率高，不能很好的滿足臨床快速準(zhǔn)確出結(jié)果的要求。

4、炎癥因子如crp、pct和saa等的檢查有較好的靈敏度，被廣泛應(yīng)用。但這些檢測(cè)對(duì)感染性疾病的特異性較弱，通常需要進(jìn)行crp、pct和saa這三項(xiàng)的聯(lián)合檢測(cè)，增加了患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。并且crp和pct受特定疾病干擾，因而有時(shí)不能正確反映患者的感染狀態(tài)。例如，crp生成于肝臟，肝損傷的感染患者crp水平正常，會(huì)在感染性疾病的診斷中出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

5、血清抗原抗體檢測(cè)能確認(rèn)特定的病毒類型，但對(duì)病原體種類不明確的情境下，作用有限，且檢測(cè)費(fèi)用高，增加了患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

6、血常規(guī)檢測(cè)能夠在一定程度上提示感染發(fā)生和感染類型。但血常規(guī)結(jié)果中的白細(xì)胞(wbc)\中性粒細(xì)胞(neu)占比容易受其他非感染性炎癥反應(yīng)、機(jī)體正常生理波動(dòng)等影響

7、目前常采用染色劑對(duì)血細(xì)胞進(jìn)行熒光染色，然后利用血液分析儀根據(jù)熒光強(qiáng)度的差異對(duì)不同血細(xì)胞進(jìn)行區(qū)分。常用的熒光染料為核酸染料，它們能與細(xì)胞內(nèi)dna和rna的發(fā)生特異性結(jié)合，從而改變?nèi)玖系臒晒鈴?qiáng)度。利用核酸染料進(jìn)行血液分析靈敏度高、響應(yīng)快，因而被廣泛采用。

8、但多數(shù)基于對(duì)核酸物質(zhì)染色的分析方法存在一定局限性。例如，許多血液異常細(xì)胞會(huì)發(fā)生細(xì)胞器狀態(tài)的改變，而核酸染料難以識(shí)別這種變化。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本公開(kāi)的目的在于提供一種血液分析儀。所述血液分析儀利用感染，尤其是重度感染造成血液細(xì)胞中溶酶體的改變，用含有溶酶體染料的試劑處理樣本，能夠快速獲得受試者感染相關(guān)的參數(shù)，進(jìn)而能夠?qū)κ茉囌叩母腥緺顟B(tài)進(jìn)行快速評(píng)估。本公開(kāi)還提供血液分析方法、含有溶酶體染料的細(xì)胞分析試劑的用途和所述細(xì)胞分析試劑。

2、為此，本公開(kāi)第一方面提供一種血液分析儀，包括吸樣裝置、樣本制備裝置、光源、流動(dòng)室、光學(xué)檢測(cè)器、處理器和編程有計(jì)算機(jī)應(yīng)用程序的非暫時(shí)性計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)介質(zhì)，其中，

3、所述吸樣裝置配置為吸取待測(cè)血液樣本的至少一部分并輸送至所述樣本制備裝置；

4、所述樣本制備裝置包括試劑供應(yīng)部和至少一個(gè)反應(yīng)池，其中所述試劑供應(yīng)部配置為提供第一試劑到第一反應(yīng)池，所述第一反應(yīng)池配置為使所述第一試劑與所述待測(cè)血液樣本的至少一部分在其中混合以制備第一試樣，并將所述第一試樣輸送到所述流動(dòng)室，其中所述第一試劑包括第一溶血?jiǎng)┖秃腥苊阁w染料的溶酶體染色劑，所述溶酶體染料對(duì)所述待測(cè)血液樣本中細(xì)胞的溶酶體進(jìn)行熒光染色；

5、所述光源配置為將光束對(duì)準(zhǔn)與所述反應(yīng)池相連通的所述流動(dòng)室的檢測(cè)孔；

6、所述流動(dòng)室配置為使所述第一試樣中的粒子逐個(gè)通過(guò)所述流動(dòng)室；

7、所述光學(xué)檢測(cè)器被裝配于所述流動(dòng)室周圍，并配置為檢測(cè)通過(guò)所述流動(dòng)室的檢測(cè)孔的所述第一試樣中的粒子的第一光信號(hào)；

8、所述處理器與所述光學(xué)檢測(cè)器可操作地連接，當(dāng)所述非暫時(shí)性計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)介質(zhì)中的計(jì)算機(jī)應(yīng)用程序被所述處理器執(zhí)行時(shí)，使所述處理器執(zhí)行以下步驟：

9、處理所述第一光信號(hào)獲得第一白細(xì)胞信息；

10、提取所述第一白細(xì)胞信息的至少一個(gè)第一白細(xì)胞參數(shù)；

11、基于所述至少一個(gè)第一白細(xì)胞參數(shù)獲得感染標(biāo)志參數(shù)。

12、第二方面提供一種血液分析方法，所述方法包括：

13、獲取受試者的待測(cè)血液樣本；

14、制備第一試樣，所述第一試樣含有所述待測(cè)血液樣本的至少一部分和第一試劑，其中所述第一試劑包括第一溶血?jiǎng)┖秃腥苊阁w染料的溶酶體染色劑，所述溶酶體染料對(duì)所述待測(cè)血液樣本中細(xì)胞的溶酶體進(jìn)行熒光染色；

15、使所述第一試樣中的粒子逐個(gè)通過(guò)被光照射的光學(xué)檢測(cè)區(qū)以獲得所述第一試樣中的粒子在被光照射后產(chǎn)生的第一光信號(hào)；

16、處理所述第一光信號(hào)獲得第一白細(xì)胞信息；

17、提取所述第一白細(xì)胞信息的至少一個(gè)第一白細(xì)胞參數(shù)；

18、基于所述至少一個(gè)第一白細(xì)胞參數(shù)獲得感染標(biāo)志參數(shù)。

19、第三方面提供一種細(xì)胞分析試劑在分析來(lái)自受試者的血液樣本的感染標(biāo)志參數(shù)中的用途，其中，所述細(xì)胞分析試劑包括溶血?jiǎng)┖腿苊阁w染色劑，其中所述溶酶體染色劑包括靶向細(xì)胞溶酶體的溶酶體染料。

20、第四方面提供還一種細(xì)胞分析試劑。

21、所述細(xì)胞分析試劑與上述第一試劑相同。

22、根據(jù)本公開(kāi)的各實(shí)施方式，所述血液分析儀利用感染，特別是諸如膿毒癥等重度感染，造成血細(xì)胞中溶酶體的改變，用溶酶體染料對(duì)細(xì)胞溶酶體染色并進(jìn)行檢測(cè)，從而獲得相對(duì)于正常受試者的血液樣本中的血細(xì)胞改變的細(xì)胞光學(xué)參數(shù)，并由此獲得感染標(biāo)志參數(shù)，從而能夠快速、準(zhǔn)確地對(duì)受試者的感染狀態(tài)進(jìn)行評(píng)估。此外，所述血液分析儀可對(duì)同一樣本利用傳統(tǒng)核酸染料進(jìn)行處理并檢測(cè)，將獲得的光學(xué)參數(shù)與利用溶酶體染料處理樣本后進(jìn)行檢測(cè)所獲得的細(xì)胞光學(xué)參數(shù)相結(jié)合，并由此獲得可靠性和靈敏度進(jìn)一步提升的感染標(biāo)志參數(shù)，從而對(duì)感染狀態(tài)進(jìn)行更準(zhǔn)確的評(píng)估。所述血液分析儀在獲取感染標(biāo)志參數(shù)的同時(shí)，并不影響血常規(guī)檢測(cè)中傳統(tǒng)的血液分析項(xiàng)目的檢測(cè)，節(jié)約了檢測(cè)成本。

技術(shù)特征：

1.一種血液分析儀，包括吸樣裝置、樣本制備裝置、光源、流動(dòng)室、光學(xué)檢測(cè)器、處理器和編程有計(jì)算機(jī)應(yīng)用程序的非暫時(shí)性計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)介質(zhì)，

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血液分析儀，其中，所述第一白細(xì)胞信息包括第一白細(xì)胞分群粒子團(tuán)信息和第一白細(xì)胞粒子團(tuán)信息中的至少一個(gè)，其中所述第一白細(xì)胞分群粒子團(tuán)信息包括第一淋巴細(xì)胞粒子團(tuán)信息和第一中性粒細(xì)胞粒子團(tuán)信息；

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的血液分析儀，其中，所述至少一個(gè)白細(xì)胞參數(shù)包括如下參數(shù)中的一個(gè)或多個(gè)：第一白細(xì)胞分群粒子團(tuán)和第一白細(xì)胞粒子團(tuán)中至少一個(gè)的前向散射光強(qiáng)度分布寬度、前向散射光強(qiáng)度分布重心、前向散射光強(qiáng)度分布變異系數(shù)、側(cè)向散射光強(qiáng)度分布寬度、側(cè)向散射光強(qiáng)度分布重心、側(cè)向散射光強(qiáng)度分布變異系數(shù)、溶酶體熒光強(qiáng)度分布寬度、溶酶體熒光強(qiáng)度分布重心、溶酶體熒光強(qiáng)度分布變異系數(shù)，所述第一白細(xì)胞分群粒子團(tuán)和所述第一白細(xì)胞粒子團(tuán)中至少一個(gè)在由前向散射光強(qiáng)度、側(cè)向散射光強(qiáng)度和溶酶體熒光強(qiáng)度中的兩種光強(qiáng)度生成的二維散點(diǎn)圖中的分布區(qū)域的面積，和所述第一白細(xì)胞分群粒子團(tuán)和所述第一白細(xì)胞粒子團(tuán)中至少一個(gè)在由前向散射光強(qiáng)度、側(cè)向散射光強(qiáng)度和溶酶體熒光強(qiáng)度生成的三維散點(diǎn)圖中的分布區(qū)域的體積；

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的血液分析儀，其中，

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的血液分析儀，其中，所述第二白細(xì)胞信息包括至少一個(gè)第二白細(xì)胞分群粒子團(tuán)信息，

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的血液分析儀，其中所述至少一個(gè)第二白細(xì)胞參數(shù)包括如下參數(shù)中的一個(gè)或多個(gè)：至少一個(gè)第二白細(xì)胞分群粒子團(tuán)的前向散射光強(qiáng)度分布寬度、前向散射光強(qiáng)度分布重心、前向散射光強(qiáng)度分布變異系數(shù)、側(cè)向散射光強(qiáng)度分布寬度、側(cè)向散射光強(qiáng)度分布重心、側(cè)向散射光強(qiáng)度分布變異系數(shù)、核酸熒光強(qiáng)度分布寬度、核酸熒光強(qiáng)度分布重心、核酸熒光強(qiáng)度分布變異系數(shù)，所述至少一個(gè)第二白細(xì)胞分群粒子團(tuán)在由前向散射光強(qiáng)度、側(cè)向散射光強(qiáng)度和核酸熒光強(qiáng)度中的兩種光強(qiáng)度生成的二維散點(diǎn)圖中的分布區(qū)域的面積，和所述至少一個(gè)第二白細(xì)胞分群粒子團(tuán)在由前向散射光強(qiáng)度、側(cè)向散射光強(qiáng)度和核酸熒光強(qiáng)度生成的三維散點(diǎn)圖中的分布區(qū)域的體積；

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的血液分析儀，其中，所述基于所述至少一個(gè)第一白細(xì)胞參數(shù)和所述至少一個(gè)第二白細(xì)胞參數(shù)獲得感染標(biāo)志參數(shù)包括：

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血液分析儀，其中，當(dāng)所述非暫時(shí)性計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)介質(zhì)中的計(jì)算機(jī)應(yīng)用程序被所述處理器執(zhí)行時(shí)，使所述處理器進(jìn)一步執(zhí)行以下步驟：

9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的血液分析儀，其中，當(dāng)所述非暫時(shí)性計(jì)算機(jī)可讀存儲(chǔ)介質(zhì)中的計(jì)算機(jī)應(yīng)用程序被所述處理器執(zhí)行時(shí)，使所述處理器進(jìn)一步執(zhí)行以下步驟：

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血液分析儀，其中，所述溶酶體染料選自紅光可激發(fā)或藍(lán)光可激發(fā)的溶酶體染料。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的血液分析儀，其中，所述溶酶體染料為選自以下通式i和通式ii所示的化合物中的至少一種：

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的血液分析儀，其中，所述溶酶體熒光染料為選自以下化合物1～8中的至少一種：

13.根據(jù)權(quán)利要求10-12中任一項(xiàng)所述的血液分析儀，其中，所述溶酶體染色劑為含有10-100mg/l，優(yōu)選40-60mg/l所述溶酶體熒光染料的溶液，其中溶劑為選自甲醇、乙醇、甘油、甘醇和二甘醇中的一種或多種。

14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血液分析儀，其中，所述第一溶血?jiǎng)┌ū砻婊钚詣┖途彌_劑，其中所述表面活性劑用于溶解紅細(xì)胞且選自陽(yáng)離子表面活性劑、陰離子表面活性劑和非離子表面活性劑的至少一種，優(yōu)選所述第一溶血?jiǎng)┑膒h值為3.0-3.5。

15.根據(jù)權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)所述的血液分析儀，進(jìn)一步包括用戶交互界面，所述用戶交互界面配置為顯示檢測(cè)結(jié)果和/或向所述血液分析儀輸入指令。

16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的血液分析儀，其中，所述用戶交互界面配置為輸出所述感染標(biāo)志參數(shù)和/或基于所述感染標(biāo)志參數(shù)輸出指示受試者的感染狀態(tài)的提示信息。

17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血液分析儀，其中，所述感染標(biāo)志參數(shù)用于對(duì)受試者進(jìn)行感染狀態(tài)評(píng)估。

18.根據(jù)權(quán)利要求17述的血液分析儀，其中，所述感染狀態(tài)評(píng)估包括膿毒癥早期預(yù)測(cè)、膿毒癥診斷、普通感染與重癥感染的鑒別、感染病情監(jiān)控、膿毒癥預(yù)后分析、細(xì)菌感染和病毒感染的鑒別、非感染性炎癥和感染性炎癥的鑒別和膿毒癥療效的評(píng)估中的一種或多種。

19.一種血液分析方法，所述方法包括：

20.一種細(xì)胞分析試劑在分析來(lái)自受試者的血液樣本的感染標(biāo)志參數(shù)中的用途，其中，所述細(xì)胞分析試劑包括溶血?jiǎng)┖腿苊阁w染色劑，其中所述溶酶體染色劑包括靶向細(xì)胞溶酶體的溶酶體染料。

21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的用途，其中所述溶酶體染料為選自紅光可激發(fā)或藍(lán)光可激發(fā)的溶酶體染料，

22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的用途，其中，所述溶酶體染料為選自以下化合物1～8中的至少一種：

23.根據(jù)權(quán)利要求21或22所述的用途，其中，所述染色劑為含有10-100mg/l所述溶酶體染料的溶液，其中溶劑為選自甲醇、乙醇、甘油、甘醇和二甘醇中的一種或多種。

24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的用途，其中，所述溶血?jiǎng)┌ū砻婊钚詣?，其中所述表面活性劑用于溶解紅細(xì)胞且選自陽(yáng)離子表面活性劑、陰離子表面活性劑和非離子表面活性劑的至少一種。

25.根據(jù)權(quán)利要求24所述的用途，其中所述陽(yáng)離子表面活性劑選自以下通式iii所示的季銨鹽：

26.根據(jù)權(quán)利要求24或25所述的用途，其中所述溶血?jiǎng)┻M(jìn)一步包括緩沖劑，且所述溶血?jiǎng)┑膒h值為3.0～3.5。

27.根據(jù)權(quán)利要求20所述的用途，其中，所述感染標(biāo)志參數(shù)用于對(duì)所述受試者進(jìn)行感染狀態(tài)評(píng)估，

28.一種細(xì)胞分析試劑，其中，所述細(xì)胞分析試劑根據(jù)權(quán)利要求20-27中任一項(xiàng)所定義。

29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的試劑，其中溶血?jiǎng)┖腿旧珓┓謩e為單獨(dú)的試劑，或者所述溶血?jiǎng)┖退鋈旧珓┗旌蠟橐粋€(gè)試劑。

30.根據(jù)權(quán)利要求29所述試劑，其中所述試劑由溶血?jiǎng)┖腿苊阁w染色劑組成。

技術(shù)總結(jié)
本公開(kāi)提供血液分析儀、血液分析方法及細(xì)胞分析試劑和用途。所述血液分析儀包括：用于吸取待測(cè)血液樣本的吸樣裝置；用于制備第一試樣的樣本制備裝置，包括用于將待測(cè)血液樣本的至少一部分和包括第一溶血?jiǎng)┖秃腥苊阁w染料的溶酶體染色劑的第一試劑混合的反應(yīng)池；用于檢測(cè)第一試樣以獲得第一光信號(hào)的光學(xué)檢測(cè)器和處理器。所述處理器執(zhí)行以下步驟：處理所述第一光信號(hào)獲得第一白細(xì)胞信息；提取所述第一白細(xì)胞信息的至少一個(gè)第一白細(xì)胞參數(shù)；基于所述至少一個(gè)第一白細(xì)胞參數(shù)獲得感染標(biāo)志參數(shù)。

技術(shù)研發(fā)人員：劉宗俊,陳庚文,高飛,阮楚良
受保護(hù)的技術(shù)使用者：深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2