本發(fā)明屬于薄荷醇含量檢測(cè)，尤其涉及一種基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法。

背景技術(shù)：

1、薄荷醇，別名薄荷腦，iupac命名為5-甲基-2-異丙基-1-環(huán)己醇，薄荷醇被廣泛應(yīng)用在日化香精、食用香精和醫(yī)藥衛(wèi)生產(chǎn)品等；起初，薄荷醇是從植物薄荷的葉片或莖部中所提取的，天然薄荷醇其來(lái)源主要分為歐洲薄荷油和亞洲薄荷油。

2、由于薄荷醇的應(yīng)用范圍較廣，不僅被用于香精香料和食品行業(yè)，更多作為藥物與化工產(chǎn)品的原材料被大量消耗，故而單靠從天然薄荷植物中提取所獲得的薄荷醇已經(jīng)不能滿足日益增長(zhǎng)的工業(yè)需求，而且天然薄荷植物成熟周期較長(zhǎng)，因而更多的生產(chǎn)廠家越來(lái)越依賴于化學(xué)合成的薄荷醇來(lái)滿足市場(chǎng)需求，一是化學(xué)合成時(shí)間短，而且不受氣候和地理因素限制，故而化學(xué)合成的薄荷醇更受薄荷醇生產(chǎn)廠家接納；同時(shí)，也需要對(duì)天然提取與化學(xué)合成所生產(chǎn)的薄荷醇產(chǎn)品的含量做出檢測(cè)工作，以做進(jìn)一步優(yōu)化薄荷醇生產(chǎn)提取工藝。

3、而現(xiàn)已報(bào)道的許多薄荷醇的檢測(cè)、分析方法，包括用氣相火焰離子檢測(cè)器、氣相色譜技術(shù)、使用液相折射檢測(cè)器、液質(zhì)聯(lián)用和液相熒光檢測(cè)器來(lái)對(duì)薄荷醇進(jìn)行定性定量分析；同時(shí)，由于薄荷醇本身在200-800nm光范圍內(nèi)并無(wú)有吸收峰信號(hào)，故須在液相檢測(cè)前對(duì)薄荷醇進(jìn)行衍生化反應(yīng)，借助衍生化試劑原有的吸光基團(tuán)使得薄荷醇衍生物在近紫外至可見光區(qū)吸收區(qū)有光學(xué)響應(yīng)，作為高效液相色譜檢測(cè)介質(zhì)，以用于產(chǎn)品薄荷醇含量檢測(cè)樣品試驗(yàn)，但通常的衍生化反應(yīng)須通過(guò)添加催化劑、也須進(jìn)一步純化處理；因此，以上的檢測(cè)、分析方法多有昂貴、高污染、須純化處理等缺點(diǎn)，不利于薄荷醇樣品大量檢測(cè)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)上述背景技術(shù)的問(wèn)題，本發(fā)明的目的是提供一種基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法，通過(guò)該方法可獲悉所測(cè)含薄荷醇產(chǎn)品中的薄荷醇有效成分的確切含量。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

3、一種基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法，包括以下步驟：

4、步驟1)分別制備薄荷醇乙腈溶液、含薄荷醇產(chǎn)品的乙腈溶液、芳香酰氯或芳香磺酰氯乙腈溶液；

5、步驟2)在10ml容量瓶中依次加入上述制得的薄荷醇乙腈溶液與芳香酰氯或芳香磺酰氯乙腈溶液各1000μl，加入乙腈稀釋至總體積10ml，蓋上容量瓶蓋，于55-70℃加熱3h，進(jìn)行柱前親核取代酯化反應(yīng)衍生化，后將反應(yīng)體系冷卻至室溫，并將反應(yīng)溶液定容至10ml，得到含具有在近紫外至可見光區(qū)吸收的薄荷醇衍生物的反應(yīng)溶液一；

6、步驟3)按上述步驟2)在另一10ml容量瓶中依次加入上述制得的含薄荷醇產(chǎn)品的乙腈溶液與芳香酰氯或芳香磺酰氯乙腈溶液各1000μl，進(jìn)行同樣的實(shí)驗(yàn)操作，得到含具有在近紫外至可見光區(qū)吸收的薄荷醇衍生物的反應(yīng)溶液二；

7、步驟4)采用乙腈將上述制得的芳香酰氯或芳香磺酰氯乙腈溶液、含薄荷醇衍生物的反應(yīng)溶液一、含薄荷醇衍生物的反應(yīng)溶液二分別配置為供試品溶液，然后使用高效液相色譜儀，以市售常規(guī)c-18柱為色譜柱，對(duì)上述每個(gè)供試品溶液進(jìn)行檢測(cè)分析，從而對(duì)反應(yīng)溶液中的薄荷醇衍生物進(jìn)行定性和定量，進(jìn)而得到所測(cè)含薄荷醇產(chǎn)品中衍生化反應(yīng)前的薄荷醇有效成分的確切含量。

8、更優(yōu)選地，所述步驟1)包括以下步驟：

9、步驟11)稱取純品薄荷醇0.25g溶于含有50ml乙腈溶液的容量瓶中，配置成5mg/ml的薄荷醇乙腈溶液，備用；

10、步驟12)稱取含薄荷醇產(chǎn)品0.75g溶于含有50ml乙腈溶液的容量瓶中，配置成含薄荷醇產(chǎn)品的乙腈溶液，備用；

11、步驟13)稱取芳香酰氯或芳香磺酰氯0.30-0.44g溶于含有50ml乙腈溶液的容量瓶中，配置成6-8.8mg/ml的芳香酰氯或芳香磺酰氯乙腈溶液，備用。

12、優(yōu)選地，所用的芳香酰氯或芳香磺酰氯、純品薄荷醇的量，按摩爾比計(jì)算，芳香酰氯或芳香磺酰氯：純品薄荷醇為1.2：1。

13、優(yōu)選地，所用的芳香酰氯或芳香磺酰氯的種類為2-萘甲酰氯、2-萘甲磺酰氯、4-甲基-3-硝基苯甲酰氯、3-甲氧基-4-甲基苯甲酰氯、4-硝基苯磺酰氯、4-氯苯甲酰氯、4-溴苯甲酰氯、肉桂酰氯。

14、優(yōu)選地，上述步驟4)中，使用高效液相色譜儀時(shí)，其液相條件為：反相流動(dòng)相系統(tǒng)為由乙腈與水組成的混合液或由甲醇與磷酸鉀鹽水組成的混合液，控制流速為0.7-1.0ml/min，進(jìn)樣量為5-20μl，檢測(cè)波長(zhǎng)為270-320nm，色譜柱柱溫為25-30℃。

15、優(yōu)選地，所述反相流動(dòng)相系統(tǒng)是由水相與有機(jī)相組成的。

16、優(yōu)選地，所述反相流動(dòng)相系統(tǒng)為由乙腈與水組成的混合液，按體積百分比計(jì)算，即乙腈：水＝70-100％：0-30％。

17、優(yōu)選地，所述反相流動(dòng)相系統(tǒng)為由乙腈與水組成的混合液，按體積百分比計(jì)算，即乙腈：水＝80％：20％。

18、優(yōu)選地，上述步驟4)中，所述的市售常規(guī)c-18柱為c18?5μm250mm*4.6mm。

19、優(yōu)選地，上述步驟4)中，所用的高效液相色譜儀為agilent?lc1260、waterse2695、ichrom?5100、agress1100、eclassical?3200、nexera?lc-40中的其中一種。

20、本發(fā)明的有益效果在于：

21、(1)本發(fā)明的基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法，具體先將純品薄荷醇和含有薄荷醇產(chǎn)品進(jìn)行柱前親核取代酯化反應(yīng)衍生化，使之得到含具有在近紫外至可見光區(qū)吸收的薄荷醇衍生物的反應(yīng)溶液，再利用高效液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)分析，從而對(duì)反應(yīng)溶液中的薄荷醇衍生物進(jìn)行定性和定量，進(jìn)而得到所測(cè)含薄荷醇產(chǎn)品中衍生化反應(yīng)前的薄荷醇有效成分的確切含量。

22、(2)本發(fā)明的基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法，相對(duì)于傳統(tǒng)的分析方法，能夠有效獲得衍生化的薄荷醇酯含量，其具有廉價(jià)、實(shí)用、快捷、靈敏度高、反應(yīng)無(wú)需純化處理，無(wú)反應(yīng)催化劑添加，無(wú)其他雜質(zhì)峰出現(xiàn)等優(yōu)點(diǎn)；反應(yīng)過(guò)程中去掉分離純化環(huán)節(jié)，可縮短整個(gè)測(cè)試環(huán)節(jié)時(shí)間，同時(shí)也避免出現(xiàn)因衍生物轉(zhuǎn)移損失等不必要的檢測(cè)誤差，提高了檢測(cè)準(zhǔn)確度和檢測(cè)效率。

技術(shù)特征：

1.一種基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法的制備方法，其特征在于，所述步驟1)包括以下步驟：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法，其特征在于，所用的芳香酰氯或芳香磺酰氯、純品薄荷醇的量，按摩爾比計(jì)算，芳香酰氯或芳香磺酰氯：純品薄荷醇為1.2：1。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法，其特征在于，所用的芳香酰氯或芳香磺酰氯的種類為2-萘甲酰氯、2-萘甲磺酰氯、4-甲基-3-硝基苯甲酰氯、3-甲氧基-4-甲基苯甲酰氯、4-硝基苯磺酰氯、4-氯苯甲酰氯、4-溴苯甲酰氯、肉桂酰氯。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法的制備方法，其特征在于，上述步驟4)中，使用高效液相色譜儀時(shí)，其液相條件為：反相流動(dòng)相系統(tǒng)為由乙腈與水組成的混合液或由甲醇與磷酸鉀鹽水組成的混合液，控制流速為0.7-1.0ml/min，進(jìn)樣量為5-20μl，檢測(cè)波長(zhǎng)為270-320nm，色譜柱柱溫為25-30℃。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法的制備方法，其特征在于，所述反相流動(dòng)相系統(tǒng)為由乙腈與水組成的混合液，按體積百分比計(jì)算，即乙腈：水＝70-100％：0-30％。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法的制備方法，其特征在于，所述反相流動(dòng)相系統(tǒng)為由乙腈與水組成的混合液，按體積百分比計(jì)算，即乙腈：水＝80％：20％。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法的制備方法，其特征在于，上述步驟4)中，所述的市售常規(guī)c-18柱為c18?5μm?250mm*4.6mm。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法的制備方法，其特征在于，上述步驟4)中，所用的高效液相色譜儀為agilentlc1260、waters?e2695、ichrom?5100、agress1100、eclassical?3200、nexera?lc-40中的其中一種。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種基于快捷、無(wú)催化劑柱前衍生物的液相色譜檢測(cè)薄荷醇含量的方法，具體先將純品薄荷醇和含薄荷醇產(chǎn)品進(jìn)行柱前親核取代酯化反應(yīng)衍生化，使之得到具有近紫外至可見光區(qū)吸收的薄荷醇衍生物的反應(yīng)溶液，再利用高效液相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)分析，從而對(duì)反應(yīng)溶液中的薄荷醇衍生物進(jìn)行定性和定量，進(jìn)而得到所測(cè)含薄荷醇產(chǎn)品中衍生化反應(yīng)前的薄荷醇有效成分的確切含量；該方法相對(duì)于傳統(tǒng)的分析方法，具有廉價(jià)、實(shí)用、快捷、靈敏度高、反應(yīng)無(wú)需純化處理，無(wú)反應(yīng)催化劑添加，無(wú)其他雜質(zhì)峰出現(xiàn)等優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)研發(fā)人員：林映才,林悅?cè)?br/>受保護(hù)的技術(shù)使用者：廣東超聚和生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9