本發(fā)明涉及臨床醫(yī)學(xué)，更具體涉及一組用于判斷肌肉損傷程度的新型蛋白標(biāo)志物。

背景技術(shù)：

1、骨科創(chuàng)傷往往伴隨著肌肉軟組織損傷，嚴(yán)重的骨骼肌損傷通常會(huì)導(dǎo)致再生不完全，從而導(dǎo)致功能障礙。在臨床實(shí)踐中，了解肢體創(chuàng)傷患者骨骼肌損傷的程度對于選擇治療方式和評估預(yù)后至關(guān)重要。

2、目前，缺乏評估機(jī)械性骨骼肌損傷嚴(yán)重程度的具體指標(biāo)。現(xiàn)有的與肌肉組織分解和纖維損傷相關(guān)的經(jīng)典血液蛋白標(biāo)志物包括肌酸激酶、乳酸脫氫酶、肌紅蛋白、醛縮酶和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶，其中肌酸激酶是肌肉損傷最常用的血清標(biāo)志物。然而，這些已建立的酶缺乏高診斷可靠性，它們也無法有效區(qū)分損傷的嚴(yán)重程度。

3、因此，亟需提供一組用于判斷肌肉損傷程度的新型蛋白標(biāo)志物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題是提供一組用于判斷肌肉損傷程度的新型蛋白標(biāo)志物及其獲得方法與應(yīng)用，以解決背景技術(shù)中的問題。

2、為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案如下。

3、用于判斷肌肉損傷程度的新型蛋白標(biāo)志物，所述新型蛋白標(biāo)志物為troponin?t3,fast?skeletal?type；alpha-1,4glucanphosphorylase；four?and?ahalflim?domains1；pdz?and?lim?domain?3；phosphoglucomutase?1；adenylosuccinate?synthetase?isozyme1；hormone-sensitive?lipase；dnatopoisomerase?i；lim?and?cysteine-rich?domains1；glucose-6-phosphate?isomerase；triosephosphate?isomerase；regulator?ofchromosome?condensation?1；glycerol-3-phosphate?dehydrogenase[nad(+)],cytoplasmic；nicotinamide?phosphoribosyltransferase；malate?dehydrogenase；phosphoglycerate?kinase?1；sugarphosphate?phosphatase；fumarylacetoacetatehydrolase?domain?containing?2a；exportin-2；dnaj?heat?shockprotein?family(hsp40)member?b4；elongation?factor?1-gamma；phosphoethanolamine/phosphocholinephosphatase?1；adenylosuccinate?lyase；5'-3'exoribonuclease；small?nuclearribonucleoprotein?sm?d2；smproteinf；lactoylglutathione?lyase；

4、adenosylhomocysteinase；dna(cytosine-5)-methyltransferase；eukaryotictranslation?initiation?factor?3subunit?b；myg1?exonuclease；smallnuclearribonucleoprotein?sm?d3；valine--trnaligase；alcohol?dehydrogenaseclass-3；tumornecrosis?factor?receptor?superfamily?member?11b；bpi?fold-containing?familyamember?2中的至少一種。

5、本發(fā)明還提供了一種用于判斷肌肉損傷程度的新型蛋白標(biāo)志物的獲得方法，包括以下步驟：

6、s1、建立具有不同肌肉損傷程度的實(shí)驗(yàn)大鼠模型：通過自制氣囊袖帶加壓裝置制造大鼠小腿不同程度的機(jī)械性擠壓損傷；

7、s2、大鼠受傷3小時(shí)后，通過心臟穿刺收集實(shí)驗(yàn)大鼠模型中大鼠的血漿，采用lc-ms/ms-4d-dia定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)檢測大鼠血漿蛋白表達(dá)譜，通過差異分析，獲得候選蛋白標(biāo)志物；

8、s3、利用elisa方法檢測36種候選蛋白標(biāo)志物在臨床不同程度肌肉損傷患者血液中的濃度。

9、進(jìn)一步優(yōu)化技術(shù)方案，所述步驟s1中的實(shí)驗(yàn)大鼠模型包括對照組、輕度損傷組和重度損傷組；所述步驟s1中對對照組大鼠的操作為：麻醉并將大鼠的右后小腿固定在無壓力的自制氣囊袖帶加壓裝置中；對輕度損傷組大鼠的操作為：麻醉并將大鼠的右后小腿固定于自制氣囊袖帶加壓裝置中在300mmhg下加壓2h；對重度損傷組大鼠的操作為：麻醉并將大鼠的右后小腿固定于自制氣囊袖帶加壓裝置中在300mmhg壓力下加壓6h；在受傷后3小時(shí)和3天分別獲取三組大鼠脛骨前肌進(jìn)行蘇木精和伊紅染色以評估損傷程度；在受傷后28天進(jìn)行masson三色染色以評估肌肉纖維化程度。

10、本發(fā)明還提供了用于判斷肌肉損傷程度的新型蛋白標(biāo)志物的應(yīng)用，利用新型蛋白標(biāo)志物制作試劑盒或通過質(zhì)譜方法或其他任何方法用于檢測來判斷受試者的肌肉損傷程度。

11、由于采用了以上技術(shù)方案，本發(fā)明所取得技術(shù)進(jìn)步如下。

12、本發(fā)明提供的一組新型蛋白標(biāo)志物，可用于判斷肌肉損傷程度，有助于臨床醫(yī)生為患者制定個(gè)體化的治療方案，提高患者的治療效果和生活質(zhì)量。

技術(shù)特征：

1.用于判斷肌肉損傷程度的新型蛋白標(biāo)志物，其特征在于：所述新型蛋白標(biāo)志物為troponin?t3,fast?skeletal?type；alpha-1,4glucanphosphorylase；four?and?ahalflim?domains?1；pdz?and?lim?domain?3；phosphoglucomutase?1；

2.一種如權(quán)利要求1所述的用于判斷肌肉損傷程度的新型蛋白標(biāo)志物的獲得方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的判斷肌肉損傷程度的新型蛋白標(biāo)志物的獲得方法，其特征在于：所述步驟s1中的實(shí)驗(yàn)大鼠模型包括對照組、輕度損傷組和重度損傷組；所述步驟s1中對對照組大鼠的操作為：麻醉并將大鼠的右后小腿固定在無壓力的自制氣囊袖帶加壓裝置中；對輕度損傷組大鼠的操作為：麻醉并將大鼠的右后小腿固定于自制氣囊袖帶加壓裝置中在300mmhg下加壓2h；對重度損傷組大鼠的操作為：麻醉并將大鼠的右后小腿固定于自制氣囊袖帶加壓裝置中在300mmhg壓力下加壓6h；在受傷后3小時(shí)和3天分別獲取三組大鼠脛骨前肌進(jìn)行蘇木精和伊紅染色以評估損傷程度；在受傷后28天進(jìn)行masson三色染色以評估肌肉纖維化程度。

4.用于判斷肌肉損傷程度的新型蛋白標(biāo)志物的應(yīng)用，其特征在于：利用新型蛋白標(biāo)志物制作試劑盒或通過質(zhì)譜方法用于檢測來判斷受試者的肌肉損傷程度。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了用于判斷肌肉損傷程度的新型蛋白標(biāo)志物及其獲得方法與應(yīng)用，新型蛋白標(biāo)志物包括三十六種蛋白中至少一種；新型蛋白標(biāo)志物的獲得方法，具體包括：建立具有不同肌肉損傷程度的實(shí)驗(yàn)大鼠模型、收集各組大鼠血漿進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)檢測并對比差異得到候選蛋白標(biāo)志物、利用臨床不同程度肌肉損傷患者的血液進(jìn)行候選蛋白標(biāo)志物驗(yàn)證并確定其診斷參考區(qū)間范圍的步驟；蛋白組學(xué)標(biāo)志物的應(yīng)用為：利用新型蛋白標(biāo)志物制作試劑盒或通過質(zhì)譜方法或其他任何方法用于檢測判斷肌肉損傷程度。本發(fā)明為判斷肌肉損傷程度提供了新的依據(jù)，便于將肌肉損傷程度進(jìn)行量化。

技術(shù)研發(fā)人員：侯志勇,柳林,賈會(huì)揚(yáng),張英澤
受保護(hù)的技術(shù)使用者：河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30