本發(fā)明屬于藥物分析化學(xué)領(lǐng)域，涉及齊拉西酮的質(zhì)量進(jìn)行檢測的方法，具體涉及采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（lc-ms）分離測定齊拉西酮中警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)的檢測方法。

背景技術(shù)：

1、齊拉西酮是一種新的非典型抗精神病藥。體外研究顯示，齊拉西酮對多巴胺d2、d3、5-羥色胺5ht2a、5ht2c、5ht1a、5ht1d、α1-腎上腺素能受體具有較高的親和力，對組胺h1受體具有中等親和力，對包括m膽堿受體在內(nèi)的其他受試受體/結(jié)合位點(diǎn)未見親和力。齊拉西酮對d2、5ht2a、5ht1d受體具有拮抗作用，對5ht1a受體具有激動(dòng)作用。齊拉西酮能抑制突觸對5-羥色胺和去甲腎上腺素的再攝取。研究認(rèn)為其抗精神分裂癥作用可能是通過對d2和5ht2受體的拮抗作用來發(fā)揮的。

2、齊拉西酮專利文獻(xiàn)cn1635892a的合成路線為：

3、

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、根據(jù)齊拉西酮合成路線分析，齊拉西酮中可能存在警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)a，以及警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)b-zz1。雜質(zhì)a由中間產(chǎn)品殘留引入，雜質(zhì)b-zz1由中間產(chǎn)品b反應(yīng)的副產(chǎn)物引入。

2、

3、目前暫無對齊拉西酮中警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)檢測方法相關(guān)報(bào)道，為確保生產(chǎn)的齊拉西酮產(chǎn)品安全、有效、質(zhì)量可控，建立檢測方法對齊拉西酮中警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)a、雜質(zhì)b-zz1進(jìn)行定量控制。

4、本發(fā)明提供了一種可用于檢測齊拉西酮中警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)a和雜質(zhì)b-zz1的有效方法。齊拉西酮中警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)控制存在以下兩點(diǎn)問題：1、齊拉西酮及其警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)溶解性差，據(jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道，齊拉西酮僅在二甲基亞砜和n,n-二甲基甲酰胺中微溶，雜質(zhì)a與雜質(zhì)b-zz1與齊拉西酮具有相似的溶解性，無法通過液液萃取或固相萃取等方式富集供試品中雜質(zhì)水平；2、警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)限度較低，紫外檢測方法無法滿足專屬性和靈敏度要求。

5、為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種齊拉西酮中警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)的檢測方法，所述檢測方法采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法，所述檢測方法包括以下步驟：

6、（1）使用中性至弱堿性緩沖鹽溶液和甲醇體系分離齊拉西酮和雜質(zhì)a、雜質(zhì)b-zz1；

7、（2）制備供試品溶液：稱取齊拉西酮樣品，用n,n-二甲基乙酰胺溶解樣品，用水稀釋，樣品析出，濾過，取濾液作為供試品溶液，待用；

8、（3）制備混合對照品溶液：分別稱取雜質(zhì)a對照品、雜質(zhì)b-zz1對照品適量，用n,n-二甲基乙酰胺溶解，用50體積%～70體積%到的n,n-二甲基乙酰胺水溶液稀釋配制成混合對照品溶液，待用；

9、（4）分別吸取上述等量的供試品溶液和混合對照品溶液，注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行定量測定。

10、優(yōu)化地，步驟（1）中，所述中性或弱堿性緩沖鹽溶液可以是甲酸銨、乙酸銨或碳酸銨的水溶液；任選地，所述中性或弱堿性緩沖鹽溶液的ph為6-9；任選地，分別可以用甲酸、乙酸調(diào)節(jié)ph至酸性，也可以用氨水調(diào)節(jié)ph至堿性；所述中性或弱堿性緩沖鹽溶液的濃度為2mm～20mm，優(yōu)選的為5mm；更優(yōu)選地，為5mm乙酸銨溶液。

11、優(yōu)化地，步驟（1）中，所述中性或弱堿性緩沖鹽溶液（5mm乙酸銨溶液）作為流動(dòng)相a，甲醇作為流動(dòng)相b；優(yōu)選地，進(jìn)行梯度洗脫；優(yōu)選地，梯度洗脫的程序?yàn)椋?/p>

12、

13、優(yōu)化地，步驟（2）中，所述供試品溶液的濃度為5mg/ml～20mg/ml，任選地，為10mg/ml。

14、優(yōu)化地，步驟（2）中，所述供試品溶液的配制，使用50體積%~70體積%的n,n-二甲基乙酰胺溶解樣品，使用30體積%~50體積%的水稀釋樣品溶液使樣品析出，優(yōu)選的，分別為50%體積n,n-二甲基乙酰胺和50%體積水。

15、優(yōu)化地，步驟（3）中，所述混合對照品溶液中各雜質(zhì)的濃度為40ng/ml～160ng/ml，任選地，為80ng/ml。

16、優(yōu)化地，步驟（4）中，其中供試品溶液和混合對照品溶液各2μl～50μl，任選地，各20μl；注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。

17、優(yōu)化地，步驟（4）中，定量檢測方法條件為：色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；流速為0.4ml/min~0.6ml/min；柱溫為35℃~45℃；質(zhì)譜條件為：esi負(fù)離子源；選擇離子檢測模式；毛細(xì)管電壓為3000v；碎裂電壓為70v；分別選擇m/z=208離子檢測雜質(zhì)b-zz1，選擇m/z=242離子檢測雜質(zhì)a。

18、優(yōu)化地，雜質(zhì)a檢測限為0.12ppm，定量限為0.38ppm；雜質(zhì)b-zz1檢測限為0.58ppm，定量限為1.77ppm。

19、本發(fā)明具有操作簡單，檢測速度快，分析時(shí)間斷，檢測結(jié)果準(zhǔn)確性高，克服現(xiàn)有分析技術(shù)不能對齊拉西酮中警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)含量進(jìn)行檢測的難題。

技術(shù)特征：

1.一種齊拉西酮中警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)的檢測方法，其特征在于：所述檢測方法采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法，所述檢測方法包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：在所述的步驟（1）中，所述中性或弱堿性緩沖鹽溶液可以是甲酸銨、乙酸銨或碳酸銨水溶液；任選地，所述中性或弱堿性緩沖鹽溶液的ph為6-9；任選地，分別用甲酸或乙酸調(diào)節(jié)ph至酸性，也可以用氨水調(diào)節(jié)ph至堿性；所述中性或弱堿性緩沖鹽溶液的濃度為2mm～20mm，優(yōu)選的為5mm；更優(yōu)選地，為5mm乙酸銨溶液；

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述的步驟（2）中，所述供試品溶液的濃度為5mg/ml～20mg/ml，任選地，為10mg/ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述的步驟（2）中，所述供試品溶液的配制，使用50體積%~70體積%的n,n-二甲基乙酰胺溶解樣品，使用30體積%~50體積%水稀釋樣品溶液使樣品析出，優(yōu)選的，為50%體積n,n-二甲基乙酰胺和50體積%水。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述的步驟（3）中，所述混合對照品溶液中各雜質(zhì)的濃度為40ng/ml～160ng/ml，任選地，為80ng/ml。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：在所述的步驟（4）中，其中供試品溶液和混合對照品溶液各2μl～50μl，任選地，各20μl；注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。

7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的檢測方法，其特征在于：在所述的步驟（4）中，定量檢測方法條件為：分別選擇m/z=208離子檢測雜質(zhì)b-zz1，選擇m/z=242離子檢測雜質(zhì)a。

8.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的檢測方法，其特征在于：在所述的步驟（4）中，定量檢測方法條件為：色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；流速為0.4ml/min~0.6ml/min；柱溫為35℃~45℃；質(zhì)譜條件為：esi負(fù)離子源；選擇離子檢測模式；毛細(xì)管電壓為3000v；碎裂電壓為70v。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的檢測方法，其特征在于：雜質(zhì)a檢測限為0.12ppm，定量限為0.38ppm。

10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)所述的檢測方法，其特征在于：雜質(zhì)b-zz1檢測限為0.58ppm，定量限為1.77ppm。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及齊拉西酮中警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)的檢測方法，所述的檢測方法包括使用高效液相色譜?質(zhì)譜聯(lián)用法（LC?MS）并使用甲醇?中性至弱堿性緩沖鹽溶液作為流動(dòng)相對齊拉西酮中2個(gè)警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)進(jìn)行檢測。該檢測方法能定量檢測出齊拉西酮中高于0.38ppm的雜質(zhì)A和高于1.77ppm的雜質(zhì)B?ZZ1，實(shí)用性強(qiáng)，檢測過程簡單、快捷。

技術(shù)研發(fā)人員：彭洪,余劍,匡敏,譚瑤,楊雨寒,楊梅
受保護(hù)的技術(shù)使用者：重慶銳恩醫(yī)藥有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2