本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，涉及ceacam6的新用途，具體涉及基于ceacam6的去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型的診斷與預(yù)后試劑盒中的用途。

背景技術(shù)：

1、ceacam6，全稱癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子6(carcinoembryonic?antigen-related?celladhesion?molecule?6)，是一種橫跨細(xì)胞膜的糖蛋白分子，歸屬于重要的癌胚抗原(cea)家族。該分子由其基因編碼而成，特征在于擁有一個(gè)細(xì)胞外區(qū)域及一個(gè)參與細(xì)胞黏連和信號(hào)傳遞的結(jié)構(gòu)域，這一結(jié)構(gòu)對(duì)于維持細(xì)胞間互動(dòng)至關(guān)重要。研究表明，ceacam6及其抗體參與了結(jié)直腸癌、胰腺癌和乳腺癌的發(fā)生發(fā)展。

2、前列腺癌作為一種常見的男性惡性腫瘤，在我國正呈現(xiàn)發(fā)病及死亡率逐年上升的趨勢(shì)。該病的發(fā)展很大程度上依賴于雄激素受體引導(dǎo)的信號(hào)傳遞途徑，因而在晚期前列腺癌的治療中，抑制雄激素作用的療法(即雄激素剝奪治療，adt)成為了核心手段。然而，隨著時(shí)間推移，部分前列腺癌細(xì)胞能夠適應(yīng)低雄激素環(huán)境，通過恢復(fù)雄激素受體信號(hào)傳導(dǎo)路徑實(shí)現(xiàn)再生，進(jìn)而演變成去勢(shì)抵抗性前列腺癌(crpc)。在此過程中，一種特殊類型的crpc——神經(jīng)內(nèi)分泌型crpc(nepc)尤為引人關(guān)注，其特征包括雄激素受體表達(dá)下降甚至消失、不再依賴雄激素受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，并展現(xiàn)出神經(jīng)內(nèi)分泌特性。

3、關(guān)于ceacam6與去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌轉(zhuǎn)化亞型(nepc)之間的關(guān)聯(lián)及其作用機(jī)制，目前尚未有公開的研究報(bào)告。本發(fā)明通過臨床數(shù)據(jù)和基礎(chǔ)生物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來研究ceacam6與去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型之間的關(guān)系，本發(fā)明的成果可以為臨床診斷去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型提供新的方法

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)于去勢(shì)抵抗性前列腺癌(crpc)神經(jīng)內(nèi)分泌亞型的診斷和預(yù)后判斷所面臨的挑戰(zhàn)，特別是在缺乏對(duì)ceacam6與crpc神經(jīng)內(nèi)分泌亞型之間關(guān)聯(lián)的深入理解和技術(shù)手段的情況下。

2、本發(fā)明提供了一種基于ceacam6指標(biāo)的去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型診斷與預(yù)后判斷試劑及其試劑盒，填補(bǔ)了這一研究的空白。通過整合臨床案例資料與深入的基礎(chǔ)生物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，本發(fā)明探討了ceacam6與去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌轉(zhuǎn)化亞型(nepc)之間的關(guān)系。通過本發(fā)明的試劑盒，可以定量或定性測(cè)定樣本中ceacam6的表達(dá)水平，從而為臨床診斷和預(yù)后評(píng)估提供依據(jù)。本發(fā)明的目的是提供一種基于ceacam6的生物標(biāo)志物，用于制備診斷crpc神經(jīng)內(nèi)分泌亞型和判斷患者預(yù)后的試劑中的應(yīng)用。通過本發(fā)明，我們旨在解決現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)ceacam6在crpc神經(jīng)內(nèi)分泌亞型中的角色和作用機(jī)理的研究不足的問題，并提供一種新的技術(shù)方案，以輔助診斷crpc的神經(jīng)內(nèi)分泌亞型，同時(shí)用于判斷患者預(yù)后。預(yù)期的研究成果將填補(bǔ)這一領(lǐng)域的研究空白，為臨床醫(yī)生提供一種新的診斷工具，用以準(zhǔn)確識(shí)別crpc的神經(jīng)內(nèi)分泌亞型，并可能助力于評(píng)估該亞型病患的預(yù)后情況，從而對(duì)治療策略產(chǎn)生重要指導(dǎo)意義。

3、本發(fā)明的技術(shù)方案：

4、本發(fā)明首先提供了基于ceacam6指標(biāo)的去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型診斷與預(yù)后判斷試劑及其應(yīng)用。

5、所述試劑包括ceacam6抗體、包被液、抗體稀釋液、封閉液、洗滌液、顯色液、終止液和酶標(biāo)二抗。

6、①包被液：0.05mol/l碳酸鹽緩沖液(ph＝9.6)。0.75g碳酸鈉,1.46g碳酸氫鈉,加去離子水定容至500ml。

7、②抗體稀釋液：0.02mol/lpbs(ph＝7.4)+0.2％bsa。0.2gbsa加配好的0.02mol/l磷酸鹽緩沖液溶解定量至100g。0.02mol/l磷酸鹽緩沖液(ph＝7.4)。0.2g磷酸二氫鉀，2.90g磷酸氫二鈉，8g氯化鈉，加去離子水定容到1000ml。

8、③封閉液：0.05mol/l碳酸鹽緩沖液(ph＝9.6)+2.0％質(zhì)量比的bsa。2.0gbsa加配好的0.05mol/l碳酸鹽緩沖液溶解定量至100g。

9、④洗滌液：0.02mol/lpbs(ph＝7.4)+0.05％tween-20。將50ultween-20溶入100ml0.02mol/l磷酸鹽緩沖液中，震蕩混勻。

10、⑤顯色液：tmb-過氧化氫尿素溶液。a液(3，3’，5，5’-四甲基聯(lián)苯胺，tmb):稱取tmb20mg溶于10ml無水乙醇中，完全溶解后，加雙蒸水至100ml。b液(0.1mol/l檸檬酸-0.2mol/l磷酸氫二鈉緩沖液，ph＝5.0～5.4):稱取na2hpo4·12h2o14.34g，檸檬酸1.87g溶于180ml雙蒸水，加0.75％過氧化氫尿素1.28ml，定容至200ml，調(diào)ph至5.0～5.4。將a液和b液按1：l體積混合后即成tmb-過氧化氫尿素(應(yīng)用)溶液。

11、⑥終止液：2mol/lh2so4溶液。10ml98％濃硫酸加入60ml雙蒸水中，定容至100ml，室溫保存。

12、⑦酶標(biāo)二抗：hrp標(biāo)記的兔抗人igg，應(yīng)用時(shí)用抗體稀釋液稀釋3000倍。

13、所述試劑可以用于檢測(cè)患者血清中ceacam6的含量。本發(fā)明采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)檢測(cè)ceacam6。

14、本發(fā)明同時(shí)提供了一種基于ceacam6指標(biāo)的去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型診斷與預(yù)后判斷的試劑盒，該試劑盒包含以上所述的試劑。所述的試劑盒用于樣本處理和試劑分配的輔助工具以及用于穩(wěn)定性和質(zhì)量控制的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品。

15、在本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案中，所述試劑中抗體是elisa實(shí)驗(yàn)中使用的現(xiàn)有的ceacam6抗體。

16、根據(jù)本發(fā)明的一些具體實(shí)施方案，當(dāng)血清中ceacam6水平高于正常人均水平，亦即高于診斷閾值時(shí)，則診斷接受檢測(cè)的去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型患者為去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型患者；當(dāng)血清中ceacam6水平高于正常人均水平時(shí)，高于預(yù)后閾值，則診斷接受檢測(cè)的去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型患者的預(yù)后差。

17、本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和有益效果：

18、利用本發(fā)明的試劑盒，依據(jù)前期研究的臨床數(shù)據(jù)和基礎(chǔ)生物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中ceacam6與去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型之間的強(qiáng)相關(guān)性?；赾eacam6蛋白的表達(dá)量與去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型的這種相關(guān)性，以該蛋白作為分子標(biāo)記對(duì)其表達(dá)量進(jìn)行檢測(cè)可以用于快速指導(dǎo)診斷去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型病人的判斷。

技術(shù)特征：

1.一種基于ceacam6指標(biāo)的去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型診斷與預(yù)后判斷試劑，其特征在于，所述試劑包括ceacam6抗體、包被液、抗體稀釋液、封閉液、洗滌液、顯色液、終止液和酶標(biāo)二抗。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑，其特征在于，該試劑可用于檢測(cè)患者血清中ceacam6的含量。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑，其特征在于，該試劑采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)檢測(cè)ceacam6。

4.一種基于ceacam6指標(biāo)的去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型診斷與預(yù)后判斷的試劑盒，其特征在于，該試劑盒包含權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的試劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于，用于樣本處理和試劑分配的輔助工具以及用于穩(wěn)定性和質(zhì)量控制的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品。

技術(shù)總結(jié)
一種基于CEACAM6指標(biāo)的去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型診斷與預(yù)后判斷的試劑盒。所述試劑包括CEACAM6抗體、包被液、抗體稀釋液、封閉液、洗滌液、顯色液、終止液和酶標(biāo)二抗。通過檢測(cè)血清中CEACAM6的水平，結(jié)合生物學(xué)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，確立了CEACAM6與去勢(shì)抵抗性前列腺癌神經(jīng)內(nèi)分泌亞型的強(qiáng)相關(guān)性。本發(fā)明提供了一種創(chuàng)新的診斷工具，有助于臨床醫(yī)生識(shí)別去勢(shì)抵抗性前列腺癌的神經(jīng)內(nèi)分泌亞型，從而為患者提供更精準(zhǔn)的治療方案和預(yù)后評(píng)估。

技術(shù)研發(fā)人員：蔣寧,王佑之,何彬,許陽陽,錢濤,郭濤,郭嘉寧,李俊波,曹騫,關(guān)趙凱
受保護(hù)的技術(shù)使用者：天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2