本發(fā)明涉及藥物分析，尤其涉及一種唑來膦酸原料藥、制劑中主成分唑來膦酸的檢測方法。

背景技術(shù)：

1、唑來膦酸（zoledronic?acid）是第三代雙膦酸鹽藥物，化學(xué)名稱為1-羥基-2-(咪唑-1-基)-亞乙基-1,1-二磷酸。唑來膦酸的主要藥理作用是抑制骨吸收，在體外可抑制破骨細(xì)胞活動，誘導(dǎo)破骨細(xì)胞凋亡，還可以通過與骨的結(jié)合阻斷破骨細(xì)胞對礦化骨和軟骨的吸收。唑來膦酸還可抑制因腫瘤產(chǎn)生的多種刺激因子誘發(fā)的破骨細(xì)胞活性增加和骨鈣的釋放。注射用唑來膦酸與標(biāo)準(zhǔn)抗腫瘤藥物治療合用，可用于治療實(shí)體腫瘤骨轉(zhuǎn)移患者和多發(fā)性骨髓瘤患者的骨骼損害，以及惡性腫瘤引起的高鈣血癥的治療。在現(xiàn)有唑來膦酸生產(chǎn)過程中，可能會引入一些有關(guān)物質(zhì)，這些物質(zhì)會影響藥物活性成分的純度，難以保障藥效及用藥安全。因此，迫切需要開發(fā)一種能夠?qū)崿F(xiàn)對唑來膦酸原料藥、制劑中主成分唑來膦酸的檢測方法，這對唑來膦酸的質(zhì)量控制具有重要的意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明針對唑來膦酸原料藥、制劑中主成分唑來膦酸的檢測，提出了一種具有優(yōu)異的靈敏度、精密度和線性關(guān)系的檢測方法，具體技術(shù)方案如下：

2、一種唑來膦酸原料藥、制劑中主成分唑來膦酸的檢測方法，所述檢測方法是采用高效液相色譜法進(jìn)行檢測，其中高效液相色譜法的色譜條件為：采用kromasil?100-5-c18色譜柱，以乙腈：緩沖液=4：96?v/v為流動相進(jìn)行等度洗脫，其中所述緩沖液每1l中含2?ml三乙胺，并用磷酸調(diào)ph至4.0；流動相的流速為0.6~1.0?ml/min，柱溫為20~30?℃，進(jìn)樣量為5~15?ml，使用紫外檢測器進(jìn)行檢測，檢測波長為210~220?nm。

3、所述主成分唑來膦酸的結(jié)構(gòu)如式i所示：

4、（i）。

5、在一些實(shí)施例中，所述主成分的檢測限為75.15?ng/ml、定量限為250.50?ng/ml。

6、在一些實(shí)施例中，所述色譜柱的規(guī)格為250?mm×4.6?mm，5?μm。

7、在一些實(shí)施例中，所述的檢測方法，至少滿足以下條件之一：

8、流動相的流速為0.8?ml/min；

9、色譜柱的柱溫為25?℃；

10、進(jìn)樣量為10?ml；

11、檢測波長為215?nm。

12、進(jìn)一步地，在一些實(shí)施例中，所述色譜柱kromasil?100-5-c18，規(guī)格為250?mm×4.6?mm×5?μm，流動相為乙腈：緩沖液=4：96v/v進(jìn)行等度洗脫，流速為0.8?ml/min，柱溫為25?℃，進(jìn)樣量為10?μl，檢測波長為215?nm。

13、在一些實(shí)施例中，所述緩沖液的制備方法包括：精密移取三乙胺，置于容量瓶中，加超純水至刻度，用磷酸調(diào)ph至4.0，作為緩沖液。

14、在一些實(shí)施例中，在進(jìn)行檢測之前，還包括制備原料藥供試品溶液，所述原料藥供試品溶液的制備方法包括：用流動相稀釋唑來膦酸原料藥，得原料藥供試品溶液。

15、進(jìn)一步地，在一些實(shí)施例中，所述原料藥供試品溶液中唑來膦酸的濃度為1.0?mg/ml。

16、在一些實(shí)施例中，在進(jìn)行檢測之前，還包括制備制劑供試品溶液，所述制劑供試品溶液的制備方法包括：用流動相稀釋唑來膦酸制劑，得制劑供試品溶液。

17、進(jìn)一步地，在一些實(shí)施例中，所述制劑供試品溶液中唑來膦酸的濃度為1.0mg/ml。

18、在一些實(shí)施例中，在進(jìn)行檢測之前，還包括制備唑來膦酸對照品溶液，所述唑來膦酸對照品溶液的制備方法包括：取唑來膦酸對照品，用流動相稀釋制得每1?ml中含唑來膦酸1?mg的唑來膦酸對照品溶液。

19、另一方面，本發(fā)明還提供所述的檢測方法在唑來膦酸原料藥、制劑質(zhì)量控制中的應(yīng)用。

20、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有的有益效果如下：

21、本申請?zhí)峁┑倪騺盱⑺嵩纤?、制劑中主成分唑來膦酸的檢測方法，實(shí)現(xiàn)對唑來膦酸原料藥制劑中主成分的定性和定量分析，該方法專屬性強(qiáng)，檢測限低，主成分的檢測限為75.15?ng/ml、定量限為250.50?ng/ml。滿足唑來膦酸原料藥制劑中主成分唑來膦酸的檢測要求，且主成分線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)大于0.99。本發(fā)明采用高效液相色譜法對唑來膦酸原料藥制劑中主成分進(jìn)行檢測，該方法操作簡便、快速、精密度好，能夠快速、準(zhǔn)確地對唑來膦酸原料藥制劑中主成分進(jìn)行檢測，整個過程操作可靠、可控，適于實(shí)際應(yīng)用和推廣，具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.?一種唑來膦酸原料藥、制劑中主成分唑來膦酸的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法是采用高效液相色譜法進(jìn)行檢測，其中高效液相色譜法的色譜條件為：采用kromasil100-5-c18色譜柱，以乙腈：緩沖液=4：96?v/v為流動相進(jìn)行等度洗脫，其中所述緩沖液每1l中含2?ml三乙胺，并用磷酸調(diào)ph至4.0；流動相的流速為0.6~1.0?ml/min，柱溫為20~30?℃，進(jìn)樣量為5~15?ml，使用紫外檢測器進(jìn)行檢測，檢測波長為210~220?nm。

2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述色譜柱的規(guī)格為250?mm×4.6mm，5?μm。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，至少滿足以下條件之一：

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述緩沖液的制備方法包括：

5.?根據(jù)權(quán)利要求1至4所述的檢測方法，其特征在于，所述主成分唑來膦酸的檢測限為75.15?ng·ml-1、定量限為250.50?ng·ml-1。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，在進(jìn)行檢測之前，還包括制備原料藥供試品溶液，所述原料藥供試品溶液的制備方法包括：用流動相稀釋唑來膦酸原料藥，得原料藥供試品溶液。

7.?根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測方法，其特征在于，所述原料藥供試品溶液中唑來膦酸的濃度為1.0?mg/ml。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，在進(jìn)行檢測之前，還包括制備制劑供試品溶液，所述制劑供試品溶液的制備方法包括：用流動相稀釋唑來膦酸制劑，得制劑供試品溶液。

9.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，在進(jìn)行檢測之前，還包括制備唑來膦酸對照品溶液，所述唑來膦酸對照品溶液的制備方法包括：取唑來膦酸對照品，用流動相稀釋制得每1?ml中含唑來膦酸1?mg的唑來膦酸對照品溶液。

10.根據(jù)權(quán)利要求1至9任一項(xiàng)所述的檢測方法在唑來膦酸原料藥、制劑質(zhì)量控制中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種唑來膦酸原料藥、制劑中主成分唑來膦酸的檢測方法，采用高效液相色譜法進(jìn)行檢測，其中液相色譜法的色譜條件為：采用Kromasil?100?5?C18色譜柱，流動相為乙腈：緩沖液=4：96（v/v）進(jìn)行等度洗脫，流速為0.8?mL/min，柱溫為20℃，進(jìn)樣量為10μL。本發(fā)明提供的檢測方法能夠有效分離唑來膦酸原料藥和制劑中的主成分，具有良好的精密度和線性關(guān)系，方法簡便快速，能夠快速并準(zhǔn)確地對唑來膦酸原料藥和制劑中的主成分進(jìn)行檢測，符合相關(guān)規(guī)定。

技術(shù)研發(fā)人員：王洪森,高珣,張燕,張敏,王辰
受保護(hù)的技術(shù)使用者：江蘇原創(chuàng)藥物研發(fā)有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6