本發(fā)明涉及分析檢測，尤其是涉及一種南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒hplc含量測定構(gòu)建方法。

背景技術(shù)：

1、南瓜蒂為葫蘆科植物南瓜cucurbita?moschata(duch.ex?lam.)duch.ex?poir.的干燥瓜蒂。瓜熟后摘取，干燥。具有和中，益氣，安胎，解毒，斂瘡。用于胃虛氣逆，胎動不安，癰瘡的功效。標(biāo)準(zhǔn)湯劑是由藥材經(jīng)炮制后按固定的制備工藝而成的凍干粉。

2、為了確保南瓜蒂藥材、飲片及其標(biāo)準(zhǔn)湯劑質(zhì)量的均一、穩(wěn)定，本文建立一種新的含量測定方法對其質(zhì)量進行把控。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒hplc含量測定構(gòu)建方法，本發(fā)明構(gòu)建的南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒hplc含量測定方法穩(wěn)定，可靠，可以對南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒的香草酸質(zhì)量進行控制。

2、本發(fā)明提供了一種南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒hplc含量測定構(gòu)建方法，包括：

3、a)將南瓜蒂原料采用溶劑提取，得到待測液；

4、取香草酸對照品，采用70％乙醇溶解，得到參照物溶液；

5、b)將待測液和參照物溶液采用高效液相色譜法測定，分別得到待測液和參照物溶液的色譜圖；并根據(jù)參照物的色譜圖對南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒hplc含量測定的成分進行定性定量測定；

6、所述高效液相色譜法色譜條件為：色譜柱為c18柱；流動相為甲醇-0.2％醋酸。

7、本發(fā)明提供的一種南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒hplc含量測定構(gòu)建方法首先取南瓜蒂原料，溶劑提取，得到待測液。

8、按照本發(fā)明，所述南瓜蒂原料為南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒。

9、當(dāng)南瓜蒂原料為南瓜蒂標(biāo)準(zhǔn)湯劑或配方顆粒時，待測液制備具體包括：將南瓜蒂標(biāo)準(zhǔn)湯劑或配方顆粒與水混合，超聲處理，放冷，搖勻，濾過，即得。

10、所述南瓜蒂原料與水混合的質(zhì)量比為0.5g：20ml；超聲功率為600w，頻率為40khz，超聲時間為30min。

11、上述提取方式和時間下可以對香草酸進行充分提取，同時本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，水作為溶劑相對于其余有機溶劑提取效果更高。在上述配比下，目標(biāo)成分提取更完全當(dāng)南瓜蒂原料為南瓜蒂藥材或飲片時，待測液制備具體包括：將南瓜蒂藥材或飲片與水混合，加熱水流，放冷，搖勻，濾過，即得。

12、所述南瓜蒂原料與水混合的質(zhì)量比為2g：20ml；所述加熱回流的時間為30min。

13、本發(fā)明采用上述提取方式色譜峰分離效果好，相對于超聲提取，回流提取的香草酸含量更高。

14、所述南瓜蒂原料為南瓜蒂藥材、南瓜蒂飲片或湯劑。本發(fā)明對其不進行限定，上述原料皆可通過本發(fā)明的方法進行質(zhì)量控制和定性檢測。

15、取香草酸對照品，采用70％乙醇溶解，得到參照物溶液。

16、本發(fā)明所述香草酸對照品的進樣濃度范圍在0.3514956～351.4956μg/ml時，線性關(guān)系為y＝38549x+78.516，r2＝1。

17、本發(fā)明所述香草酸的最低檢出限為0.3514956ug/ml，定量限為0.3514956～351.4956μg/ml。

18、將待測液和參照物溶液采用高效液相色譜法測定，分別得到待測液和參照物溶液的色譜圖；并根據(jù)參照物的色譜圖對南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒hplc含量測定的成分進行定性定量測定；

19、所述高效液相色譜法色譜條件為：色譜柱為c18柱；流動相為甲醇-0.2％醋酸。

20、本發(fā)明流動相為甲醇-0.2％醋酸。所述甲醇和0.2％醋酸的體積比為15:85。

21、本發(fā)明在上述流動相下基線分離好，色譜峰信息大，分離度好，出峰時間適中，基線平穩(wěn)。

22、c18柱，規(guī)格為5μm，4.6×250mm；柱溫30℃。

23、本發(fā)明的色譜柱優(yōu)選為：agilent?c18?4.6×250mm，5μm、島津c18?4.6×250mm，5μm、waters?c184.6×250mm，5μm。

24、本發(fā)明色譜柱在上述30℃條件下色譜峰對稱、分離度好，出峰時間適中。

25、流動相流速優(yōu)選為1.0ml/min。

26、本發(fā)明發(fā)現(xiàn)流速1.0ml/min下各色譜峰分離較好，峰形較對稱，分離度適中，同時根據(jù)綜合理論塔板數(shù)、分離度峰型，采用流速1.0作為最優(yōu)選方案。

27、本發(fā)明檢測波長優(yōu)選為260nm。

28、本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在260nm處色譜信息豐富，色譜峰信息量大，香草酸有較好吸收，響應(yīng)值適中，分離度較好，基線平穩(wěn)。

29、本發(fā)明進樣量優(yōu)選為10μl。

30、本發(fā)明提供了一種南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒hplc含量測定構(gòu)建方法，包括：a)將南瓜蒂原料采用溶劑提取，得到待測液；取香草酸對照品，采用70％乙醇溶解，得到參照物溶液；b)將待測液和參照物溶液采用高效液相色譜法測定，分別得到待測液和參照物溶液的色譜圖；并根據(jù)參照物的色譜圖對南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒hplc含量測定的成分進行定性定量測定；所述高效液相色譜法色譜條件為：色譜柱為c18柱；流動相為甲醇-0.2％醋酸。本發(fā)明采用高效液相色譜法，選用甲醇-0.2％醋酸為流動相進行洗脫，對南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒hplc中香草酸含量進行了測定，重復(fù)性、精密度好，方法穩(wěn)定，可靠。

技術(shù)特征：

1.一種南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒hplc含量測定構(gòu)建方法，包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述甲醇和0.2％醋酸的體積比為15:85。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述色譜柱為c18柱，規(guī)格為5μm，4.6×250mm；柱溫30℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述流動相流速為1.0ml/min；檢測波長為260nm；進樣量為10μl。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，當(dāng)南瓜蒂原料為南瓜蒂標(biāo)準(zhǔn)湯劑或配方顆粒時，待測液制備具體包括：將南瓜蒂標(biāo)準(zhǔn)湯劑或配方顆粒與水混合，超聲處理，放冷，搖勻，濾過，即得。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述南瓜蒂原料與水混合的質(zhì)量比為0.5g：20ml；超聲功率為600w，頻率為40khz，超聲時間為30min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，當(dāng)南瓜蒂原料為南瓜蒂藥材或飲片時，待測液制備具體包括：將南瓜蒂藥材或飲片與水混合，加熱回流，放冷，搖勻，濾過，即得。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述南瓜蒂原料與水混合的質(zhì)量比為2g：20ml；所述加熱回流的時間為30min。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述香草酸對照品的進樣濃度范圍在0.3514956～351.4956μg/ml時，線性關(guān)系為y＝38549x+78.516，r2＝1。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述香草酸的最低檢出限為0.3514956ug/ml，定量限為0.3514956～351.4956μg/ml。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒HPLC含量測定構(gòu)建方法，包括：A)將南瓜蒂原料采用溶劑提取，得到待測液；取香草酸對照品，采用70％乙醇溶解，得到參照物溶液；B)將待測液和參照物溶液采用高效液相色譜法測定，分別得到待測液和參照物溶液的色譜圖；并根據(jù)參照物的色譜圖對南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒HPLC含量測定的成分進行定性定量測定；所述高效液相色譜法色譜條件為：色譜柱為C18柱；流動相為甲醇?0.2％醋酸。本發(fā)明采用高效液相色譜法，選用甲醇?0.2％醋酸為流動相進行洗脫，對南瓜蒂藥材、飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑及其配方顆粒HPLC中香草酸含量進行了測定，重復(fù)性、精密度好，方法穩(wěn)定，可靠。

技術(shù)研發(fā)人員：周厚成,周良云,周靖惟,姚必軍,劉珂,劉璐,鄢宇梅,鐘磊,費文波,陳玉梅
受保護的技術(shù)使用者：四川新綠色藥業(yè)科技發(fā)展有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2