本發(fā)明設(shè)計(jì)一種利用氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ)熒光探針現(xiàn)場(chǎng)可視化檢測(cè)sn4+的方法,具體涉及的檢測(cè)試劑具有制備簡(jiǎn)單、檢測(cè)溫和、操作簡(jiǎn)便的特點(diǎn)。對(duì)錫離子(ⅳ)具有高特異性識(shí)別能力,可拓展應(yīng)用于錫離子(ⅳ)的現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、錫(sn)是古代發(fā)現(xiàn)較早的金屬之一,有sn4+和sn2+兩種氧化態(tài)在自然界中存在廣泛,被應(yīng)用于包括食品容器和牙膏、肥皂、等日化品行業(yè)、制藥工業(yè)、馬口鐵、軍工和輕工業(yè)等各個(gè)行業(yè)。
2、錫(sn)也是生物體必需的微量礦物,在人體內(nèi)約有17mg,適量的錫能促進(jìn)機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育,但當(dāng)其含量過(guò)高過(guò)低都會(huì)產(chǎn)生一定的危害。當(dāng)其含量過(guò)高時(shí),會(huì)導(dǎo)致免疫系統(tǒng)故障、染色體損傷、肝衰竭、呼吸困難等,且錫對(duì)人類(lèi)胚胎腎細(xì)胞毒性更強(qiáng)。缺錫則會(huì)增加與生長(zhǎng)不良和癌癥預(yù)防相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)因素,會(huì)造成聽(tīng)力損失、呼吸系統(tǒng)問(wèn)題、血紅蛋白生成減少和dna損傷等問(wèn)題。
3、同時(shí),錫在細(xì)胞水平上也參與了許多生物化學(xué)過(guò)程。比如錫能促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成,與黃霉素的活性有關(guān),且對(duì)維持蛋白質(zhì)、核酸等大分子的三維空間結(jié)構(gòu)有著重要作用。近年來(lái),有學(xué)者發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞對(duì)錫的吸收量顯著高于正常細(xì)胞。除此之外,錫在胸腺中可以產(chǎn)生一個(gè)或多個(gè)包含類(lèi)固醇及肽的化合物(甾族類(lèi)及肽類(lèi)錫化合物),參與胸腺的免疫功能,這些甾族類(lèi)及肽類(lèi)錫化合物具有直接或間接的抑制癌細(xì)胞的作用。
4、關(guān)于錫的檢測(cè)已經(jīng)有許多的報(bào)道,如原子吸收法/x發(fā)射光譜法(mining,metallurgy&exploration,2005,22,2),電感耦合等離子體質(zhì)譜法(icp-ms)(rchaeometry,1997,39,2),液相色譜法(journal?of?liquid?chromatography&related?technologies,2003,26,18),電化學(xué)分析法(the?analyst,2021,146,20),電位膜傳感(analyticachimica?acta,2006,579,1),電感耦合等離子體光發(fā)射光譜法(food?chemistry,2012,134,1)等。但這些方法往往需昂貴復(fù)雜的大型儀器、嚴(yán)格的樣品制備、專(zhuān)業(yè)的技術(shù)人員和危險(xiǎn)溶劑的使用,這使得它們?cè)趯?shí)際應(yīng)用中有些許困難。在過(guò)去的十幾年里,由于熒光化學(xué)傳感器的低成本、易用性、響應(yīng)性、可靠性、高選擇性和可視化,很多人基于這些傳感方法對(duì)新型的比色和熒光化學(xué)傳感器進(jìn)行了設(shè)計(jì)和研究。因此,迫切需要開(kāi)發(fā)高效、快速、痕量和可視化的方法實(shí)現(xiàn)生物中錫的檢測(cè)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明目的在于,提供一種利用氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ)熒光探針現(xiàn)場(chǎng)可視化檢測(cè)sn4+的方法,該方法利用氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ)溶液與錫離子發(fā)生自組裝和電荷轉(zhuǎn)移,以及疏水基底的限域作用,生成錫氯六配陰離子([sncl6]2-)后,[sncl6]2-與氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ)反應(yīng)發(fā)生聚集誘導(dǎo)自組裝生成黃綠色一維發(fā)光聚集體實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。本發(fā)明所述的方法具有操作簡(jiǎn)單、特異性強(qiáng)、可視化等特點(diǎn),可為sn4+的檢測(cè)提供良好的研究基礎(chǔ),具有廣闊的研究背景。
2、本發(fā)明所述的一種利用氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ)熒光探針現(xiàn)場(chǎng)可視化檢測(cè)sn4+的方法,按下列步驟進(jìn)行:
3、制備檢測(cè)探針:
4、a、稱(chēng)取氯亞鉑酸鉀1g溶解在20ml水中,加入24ml醋酸和1ml?1,5-環(huán)辛二烯,加熱溫度為80℃,反應(yīng)30分鐘,有淡黃色的單晶沉淀,將沉淀依次用50ml水、50ml乙醇和50ml乙醚進(jìn)行清洗,去除未反應(yīng)的原料,然后在溫度為60℃下干燥1小時(shí),得到的二氯·(1,5-環(huán)辛二烯)合鉑(ⅱ);
5、b、將步驟a得到的二氯·(1,5-環(huán)辛二烯)合鉑(ⅱ)0.15g置于10ml水中,加入0.094g三聯(lián)吡啶,溫度40-50℃恒溫加熱15分鐘,固體溶解,過(guò)濾未反應(yīng)的二氯·(1,5-環(huán)辛二烯)合鉑(ⅱ),濾液通過(guò)旋蒸后獲得固體為氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ),再用50ml乙醚洗滌3次,置于空氣中干燥得到氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ)熒光探針;
6、基底選?。?/p>
7、c、基底:疏水玻璃片或醫(yī)用級(jí)聚苯乙烯材質(zhì)培養(yǎng)皿;
8、制備探針溶液:
9、d、稱(chēng)取步驟b得到的氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ)0.0012g溶解于10ml純水、甲醇、乙醇、四氫呋喃或二氯甲烷中,獲得濃度為2.4056μm/ml的探針溶液,即為檢測(cè)試劑;
10、熒光檢測(cè)sn4+:
11、e、取30μl?2.4056μm/ml步驟b得到的檢測(cè)試劑滴加至步驟c中的疏水玻璃片或醫(yī)用級(jí)聚苯乙烯材質(zhì)培養(yǎng)皿上,并在檢測(cè)試劑中滴加75μl?27.24μm/ml的待測(cè)物樣品sn4+,待完全揮發(fā)后,形成具有黃綠色熒光的單晶,并在365nm的紫外燈照射下觀測(cè)單晶呈現(xiàn)出黃綠色熒光,確定有sn4+的存在。
12、本發(fā)明所述的一種利用氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ)熒光探針現(xiàn)場(chǎng)可視化檢測(cè)sn4+的方法,該方法利用氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ)溶液與錫離子發(fā)生自組裝和電荷轉(zhuǎn)移,基于金屬錫(ⅳ)的錫氯六配陰離子([sncl6]2-)和三聯(lián)吡啶鉑(ⅱ)陽(yáng)離子自組裝聚集在液滴的氣液表面形成一維發(fā)光聚集體,且在液滴蒸發(fā)過(guò)程中有效的抑制了常規(guī)的咖啡環(huán)效應(yīng)。該方法制備簡(jiǎn)單、成本低廉、反應(yīng)溫和、顯色清晰穩(wěn)定、特異性強(qiáng)且可視化,為sn4+的檢測(cè)提供了更多的技術(shù)手段。
13、本發(fā)明所述的一種利用氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ)熒光探針現(xiàn)場(chǎng)可視化檢測(cè)sn4+的方法,該方法探針化學(xué)名稱(chēng)為氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ),其結(jié)構(gòu)式(ⅰ)為:
14、
1.一種利用氯化氯·(三聯(lián)吡啶)合鉑(ⅱ)熒光探針現(xiàn)場(chǎng)可視化檢測(cè)sn4+的方法,其特征在于按下列步驟進(jìn)行: