本發(fā)明屬于藥物分析，具體涉及一種頭孢唑林鈉中殘留溶劑的檢測方法及應用。

背景技術(shù)：

1、頭孢唑林鈉的化學名為(6r,7r)-3-[[(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)硫]甲基]-7-[(1h-四唑-1-基)乙酰氨基]-8-氧代-5-硫雜-1-氮雜雙環(huán)[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸鈉鹽，其為第一代頭孢菌素，抗菌譜廣，用于治療多種細菌感染。上市的臨床適應癥為：1.適用于治療敏感細菌所致的中耳炎、支氣管炎、肺炎等呼吸道感染、尿路感染、皮膚軟組織感染、骨和關(guān)節(jié)感染、敗血癥、感染性心內(nèi)膜炎、肝膽系統(tǒng)感染及眼、耳、鼻、喉科等感染。2.本品也可作為外科手術(shù)前的預防用藥。3.本品不宜用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染。對慢性尿路感染，尤其伴有尿路解剖異常者的療效較差。本品不宜用于治療淋病和梅毒。

2、頭孢唑林鈉原料藥生產(chǎn)時會使用有機溶劑如丙酮、甲醇、二氯甲烷、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基苯胺等。由于殘留溶劑是藥品中對人體有害的雜質(zhì)，在生產(chǎn)過程中應控制其含量在限度的范圍內(nèi)。

3、目前美國藥典、中國藥典(2020年版)等只收載了頭孢唑林鈉的質(zhì)量標準，但均未收載頭孢唑林鈉中針對殘留溶劑的檢測方法及標準。為了更全面地檢測頭孢唑林鈉中的殘留溶劑的含量，需要建立頭孢唑林鈉中關(guān)于丙酮、甲醇、二氯甲烷、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺的殘留溶劑的檢測方法。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是為了克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺少頭孢唑林鈉中殘留溶劑的檢測方法的缺陷，而提供一種頭孢唑林鈉中殘留溶劑的檢測方法及應用。本發(fā)明的檢測方法可實現(xiàn)頭孢唑林鈉中殘留溶劑的檢測，經(jīng)方法學驗證表明，本發(fā)明所述的檢測方法，其具有良好的專屬性和系統(tǒng)適應性、良好的進樣精密度、極低的檢測限和定量限、良好的耐用性、良好的線性和良好的準確度，以及方法具有很高的靈敏度，可廣泛應用于頭孢唑林鈉制品的質(zhì)量控制。

2、本發(fā)明提供了一種頭孢唑林鈉中殘留溶劑的檢測方法，其特征在于，其采用以頂空進樣的方式進行氣相色譜法檢測，記錄色譜圖，采用外標法對圖譜進行定量分析；

3、其中，色譜的檢測條件為：

4、儀器：氣相色譜儀；

5、色譜柱：以聚乙二醇(或極性相近)為固定相的毛細管柱為色譜柱或效能相當?shù)臍庀嗝毠苌V柱；

6、檢測器：氫火焰離子化檢測器(fid)；載氣：氮氣；

7、進樣口溫度：200℃；檢測器溫度：250℃；

8、升溫程序：起始溫度為在30℃～40℃范圍，維持5分鐘，以每分鐘10℃的速率升溫至200℃，維持2分鐘；

9、進樣量：1μl。

10、(1)溶液配制：(a)溶劑：二甲基亞砜；(b)供試品溶液：取本品約1.0g，精密稱定，置10ml量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；(c)對照品溶液：精密稱取甲醇、乙腈、丙酮、二氯甲烷、n,n-二甲基甲酰胺各適量，加溶劑溶解并稀釋制成每1ml中約含甲醇300μg、乙腈41μg、丙酮500μg、二氯甲烷60μg、n,n-二甲基甲酰胺88μg的混合溶液，作為對照品溶液；

11、(2)測定方法：取對照品溶液1μl，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，出峰順序依次為丙酮、甲醇、二氯甲烷、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺，各峰間的分離度均應符合規(guī)定。

12、按外標法以峰面積計算，根據(jù)外標法以峰面積分別計算丙酮、甲醇、二氯甲烷、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺殘留溶劑的含量。

13、按外標法以峰面積計算，含甲醇應不得過0.3％、丙酮應不得過0.5％、乙腈應不得過0.041％、二氯甲烷應不得過0.06％、n,n-二甲基甲酰胺應不得過0.088％。

14、外標法計算公式為：

15、

16、式中：as為供試品溶液中相應殘留溶劑的峰面積；

17、wr為對照品的重量，mg；

18、ar為對照品溶液中相應對照溶劑的峰面積；

19、ws為供試品的重量，mg；

20、sr為對照品溶液的稀釋倍數(shù)；

21、ss為供試品溶液的稀釋倍數(shù)。

22、在本發(fā)明的某一方案中，所述的色譜柱的規(guī)格優(yōu)選db-wax,30m×0.32mm×1.0μm、或效能相當?shù)臍庀嗝毠苌V柱。

23、在本發(fā)明的某一方案中，所述柱流量的變化范圍在1.8ml/min～2.2ml/min之間，優(yōu)選例如2ml/min。

24、在本發(fā)明的某一方案中，所述分流比為5:1。

25、在本發(fā)明的某一方案中，所述起始柱溫度的變化范圍在30℃～40℃之間，優(yōu)選例如35℃。

26、在本發(fā)明的某一方案中，所述檢測器為氫火焰離子化檢測器。

27、本發(fā)明所述的檢測方法，其方法驗證的結(jié)果表明：

28、(1)專屬性：空白溶劑不干擾殘留溶劑測定；各峰的分離度均大于1.5；此方法專屬性良好。

29、(2)耐用性：改變柱流量1.8ml/min、2.2ml/min；起始柱溫30℃、40℃試驗時，空白溶劑均不干擾測定；對照品溶液中，各峰的分離度均大于1.5，按外標法計算，供試品溶液中檢出殘留溶劑個數(shù)一致，各殘留溶劑含量極差均小于0.02％，表明柱流量在1.8ml/min～2.2ml/min；起始柱溫在30℃～40℃范圍內(nèi)，方法耐用性良好。

30、(3)線性與范圍：丙酮：y＝1,517,540x-10,918,390，r＝0.9999，范圍：51.320μg/ml～769.800μg/ml，比值：1.43；甲醇：y＝977998x+386382，r＝0.9998，范圍：32.340μg/ml～485.100μg/ml，比值：0.12；二氯甲烷：y＝400,351x+2,471,419，r＝0.9968，范圍：6.290μg/ml～94.350μg/ml，比值：9.11；乙腈：y＝1,593,381x+2,290,489，r＝0.9997，范圍：4.440μg/ml～66.600μg/ml，比值：3.12；n,n-二甲基甲酰胺：y＝838,234x+1,310,689，r＝0.9998，范圍：11.270μg/ml～169.050μg/ml，比值：1.36；結(jié)論：各溶劑的相關(guān)系數(shù)r均大于0.990，比值均小于25％，各溶劑在供試品溶液濃度限度的10％～150％范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

31、(4)定量限與檢測限：丙酮定量限：2.005ng，相當于供試品溶液濃度的0.0020％；甲醇定量限：1.992ng，相當于供試品溶液濃度的0.0020％；二氯甲烷定量限：3.050ng，相當于供試品溶液濃度的0.0031％；乙腈定量限：0.623ng，相當于供試品溶液濃度的0.0006％；n,n-二甲基甲酰胺定量限：1.824ng，相當于供試品溶液濃度的0.0018％。丙酮檢測限：0.827ng，相當于供試品溶液濃度的0.0008％；甲醇檢測限：0.560ng，相當于供試品溶液濃度的0.0006％；二氯甲烷檢測限：0.915ng，相當于供試品溶液濃度的0.0009％；乙腈檢測限：0.208ng，相當于供試品溶液濃度的0.0002％；n,n-二甲基甲酰胺檢測限：1.368ng，相當于供試品溶液濃度的0.0014％。各溶劑的檢測限在0.208ng～1.368ng之間，相當于供試品濃度的0.0002％～0.0014％可有效檢出。各溶劑檢測限濃度均小于限度濃度1/5；各溶劑的定量限在0.623ng～1.824ng之間，相當于供試品濃度的0.0006％～0.0031％可有效定量。各溶劑定量限濃度均小于限度濃度1/2。

32、(5)準確度：高(120％)、中(100％)、低(80％)三個不同濃度回收率均在80％～120％范圍內(nèi)，按外標法計算：各溶劑回收率在92.55％～116.13％范圍內(nèi)；rsd均小于10.0％(n＝9)。此方法準確度良好。

33、(6)精密度：1)進樣精密度：連續(xù)測定6次，各溶劑峰面積的rsd均小于10.0％；2)重復性：各溶劑檢出量rsd均小于10.0％；3)中間精密度：各溶劑檢出量rsd均小于10.0％。結(jié)果表明此方法精密度良好。

34、本發(fā)明還提供了一種如上所述的頭孢唑林鈉中溶劑殘留的檢測方法在檢測頭孢唑林鈉原料藥或制劑中溶劑殘留含量的應用。

35、本發(fā)明中，術(shù)語“外標法”是指用待測組分的純品作對照物質(zhì)，以對照物質(zhì)和樣品中待測組分的響應信號相比較進行定量的方法。

36、在不違背本領(lǐng)域常識的基礎(chǔ)上，上述各優(yōu)選條件，可任意組合，即得本發(fā)明各較佳實例。

37、本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得。

38、本發(fā)明的積極進步效果在于：

39、(1)本發(fā)明所述的方法能夠簡便、快速、準確地檢測頭孢唑林鈉中的丙酮、甲醇、二氯甲烷、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺的殘留量，此方法各溶劑分離度良好，出峰時間適宜，峰型良好。

40、(2)本發(fā)明具有良好的專屬性，空白溶劑不干擾殘留溶劑測定；各峰的分離度均大于1.5。

41、(3)本發(fā)明所述的方法靈敏度高，具有極低的檢測限和定量限。各溶劑的檢測限在0.208ng～1.368ng之間，相當于供試品濃度的0.0002％～0.0014％可有效檢出。各溶劑檢測限濃度均小于限度濃度1/5；各溶劑的定量限在0.623ng～1.824ng之間，相當于供試品濃度的0.0006％～0.0031％可有效定量。

42、(4)本發(fā)明所述的方法具有良好的線性、良好的精密度和耐用性。

43、(5)本發(fā)明所述的方法具有良好的準確度，高(120％)、中(100％)、低(80％)三個不同濃度回收率均在80％～120％范圍內(nèi)，按外標法計算：各溶劑回收率在92.55％～116.13％范圍內(nèi)；rsd均小于10.0％(n＝9)。