本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)，具體涉及fen1作為靶點(diǎn)在治療宮頸小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、在婦女發(fā)病率和死亡率方面，宮頸癌是第四大常見(jiàn)癌癥，宮頸小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌(scnecc)是宮頸癌的一種罕見(jiàn)亞型，占所有宮頸癌的不到1.0％，但是對(duì)比其他類型的宮頸癌，它具有較高的侵襲性表型和快速轉(zhuǎn)移的能力，預(yù)后更差。在scnecc患者中，高危hpv感染是很普遍的，特別是hpv?18和16例感染，這提示hpv感染可能是scnecc發(fā)生的重要原因。但是也有研究表明hpv陽(yáng)性的神經(jīng)內(nèi)分泌宮頸癌細(xì)胞依賴于myc，而不是hpv?e6/e7病毒致癌基因。其次，多位科學(xué)家通過(guò)現(xiàn)代測(cè)序技術(shù)發(fā)現(xiàn)基因突變也是scnecc發(fā)病的一個(gè)重要原因，特別是pik3ca?and?tp53突變頻率最高。但是，到目前為止，scnecc的發(fā)病原因尚不清楚，所以scnecc的治療還沒(méi)有可用的指南。由于缺乏關(guān)于分子病因?qū)W的信息及組織病理學(xué)上與小細(xì)胞肺癌的相似性，目前的治療方案是模擬用于肺神經(jīng)內(nèi)分泌癌的治療方案。手術(shù)與ib3-iia2期癌癥患者更好的預(yù)后相關(guān)，但是由于其頻繁的復(fù)發(fā)和較高的轉(zhuǎn)移負(fù)擔(dān)，其scnecc的預(yù)后仍然較差，3年和5年的生存率分別為36.2％和30.6％。

2、所以，進(jìn)一步探究scnecc的分子病理原因及尋找合適的治療靶點(diǎn)或藥物，對(duì)于理解scnecc的發(fā)病原因及改善scnecc治療結(jié)局具有極其重要的意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明以皮瓣結(jié)構(gòu)特異性內(nèi)切酶1(fen1)為研究的靶基因，fen1是一種45kda的二價(jià)金屬依賴蛋白，具有外切酶和內(nèi)切酶活性，是堿基切除修復(fù)(ber)通路的核心蛋白，參與dna復(fù)制過(guò)程中岡崎片段的成熟。本發(fā)明通過(guò)體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了fen1在scnecc細(xì)胞增殖、克隆形成、遷移、侵襲及細(xì)胞凋亡等方面的功能，并且通過(guò)分子生物學(xué)手段初步探討了其分子機(jī)制。此外，我們也驗(yàn)證了fen1的抑制劑sc13對(duì)scnecc細(xì)胞增殖、克隆形成、遷移、侵襲及細(xì)胞凋亡等細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。本發(fā)明的結(jié)果將為scnecc的分子病理原因提供新的科學(xué)依據(jù)，為fen1作為其新的治療靶點(diǎn)提供科學(xué)證據(jù)。

2、為達(dá)到上述目的本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案：

3、第一方面，本發(fā)明提供了fen1作為靶點(diǎn)在制備治療宮頸小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌的藥物中的應(yīng)用。

4、進(jìn)一步，所述藥物用于敲低fen1。

5、進(jìn)一步，所述敲低fen1通過(guò)pcna抑制癌細(xì)胞增殖、克隆形成、侵襲、遷移能力及促進(jìn)細(xì)胞凋亡。

6、第二方面，本發(fā)明提供了fen1的sirna在制備治療宮頸小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌的藥物中的應(yīng)用。

7、進(jìn)一步，所述sirna抑制fen1表達(dá)，fen1的sirna的核苷酸序列為：s：gcccguguaugucuuugautt；as：aucaaagacauacacgggctt。

8、第三方面，本發(fā)明提供了一種治療宮頸小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌的藥物，包括fen1的抑制劑或fen1的sirna。

9、進(jìn)一步，所述fen1的抑制劑為sc13。

10、進(jìn)一步，所述藥物還包括藥學(xué)上可接受的載體。

11、與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：

12、本發(fā)明利用6對(duì)癌和癌旁組織進(jìn)行蛋白組學(xué)分析篩選差異表達(dá)蛋白，獲得顯著上調(diào)的蛋白為2169個(gè)，顯著下調(diào)的蛋白為162個(gè)，經(jīng)過(guò)go、kegg及string分析差異上調(diào)蛋白，確定fen1為目標(biāo)蛋白。免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)鑒定fen1在scnecc的癌組織中表達(dá)量明顯高于癌旁組織。在scnecc細(xì)胞系tc-yik中，fen1能夠調(diào)控pcna的表達(dá)，并且敲低fen1/pcna及fen1抑制劑sc13處理均能夠顯著抑制tc-yik細(xì)胞活力、克隆形成、遷移及侵襲，而促進(jìn)細(xì)胞凋亡。裸鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)也證明了敲低fen1能夠顯著抑制scnecc腫瘤的生長(zhǎng)。體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)均證明敲低fen1能顯著降低fen1、bcl-2、rb1、pcna和pik3ca的mrna及蛋白的表達(dá)水平，而增高caspase-9的mrna及蛋白的表達(dá)水平?？偟膩?lái)說(shuō)，在scnecc中，fen1高表達(dá)并且能夠通過(guò)pcna顯著影響癌細(xì)胞的生物學(xué)行為促進(jìn)疾病的發(fā)生發(fā)展。fen1是scnecc的潛在治療靶點(diǎn)。

技術(shù)特征：

1.fen1作為靶點(diǎn)在制備治療宮頸小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌的藥物中的應(yīng)用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物用于敲低fen1。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述敲低fen1通過(guò)pcna抑制癌細(xì)胞增殖、克隆形成、侵襲、遷移能力及促進(jìn)細(xì)胞凋亡。

4.fen1的sirna在制備治療宮頸小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌的藥物中的應(yīng)用。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述sirna抑制fen1表達(dá)。

6.一種治療宮頸小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌的藥物，其特征在于，包括fen1的抑制劑或fen1的sirna。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種治療宮頸小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌的藥物，其特征在于，所述fen1的抑制劑為sc13。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種治療宮頸小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌的藥物，其特征在于，還包括藥學(xué)上可接受的載體。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及FEN1作為靶點(diǎn)在治療宮頸小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌中的應(yīng)用。為進(jìn)一步探究SCNECC的分子病理原因及尋找合適的治療靶點(diǎn)或藥物，本發(fā)明以皮瓣結(jié)構(gòu)特異性內(nèi)切酶1(FEN1)為研究的靶基因，通過(guò)體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了FEN1在SCNECC細(xì)胞增殖、克隆形成、遷移、侵襲及細(xì)胞凋亡等方面的功能，并且通過(guò)分子生物學(xué)手段初步探討了其分子機(jī)制。此外，我們也驗(yàn)證了FEN1的抑制劑SC13對(duì)SCNECC細(xì)胞增殖、克隆形成、遷移、侵襲及細(xì)胞凋亡等細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。本發(fā)明的結(jié)果將為SCNECC的分子病理原因提供新的科學(xué)依據(jù)，為FEN1作為其新的治療靶點(diǎn)提供科學(xué)證據(jù)。

技術(shù)研發(fā)人員：劉建兵,馬海霞,楊愷,王偉,孫琳,劉玲玲,李莉,崔小華,許晶,郝建卿,鐘美瀅
受保護(hù)的技術(shù)使用者：山西醫(yī)科大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/23