本發(fā)明屬于檢驗檢測領域，特別涉及一種穿刺組織的包埋方法與應用。

背景技術：

1、活組織檢查是確診疾病的重要方法。開放性創(chuàng)口較大的方法可獲得較多的活組織，有利于檢測的開展，但是患者恢復期長，感染風險系數(shù)大。穿刺活檢的方法創(chuàng)口小，獲得的活組織較小，對于檢測的難度加大，但是有利于患者恢復，安全系數(shù)更高。

2、術中冰凍病理診斷是外科醫(yī)生在實施手術過程中，與手術方案有關的疾病診斷問題請病理醫(yī)師快速進行的緊急會診。術中冰凍病理診斷報告的發(fā)出，需要經歷取材、冰凍包埋、冰凍切片、冰凍he染色及顯微鏡下觀察；其中，常規(guī)組織冰凍取材厚度為3-4mm，其冰凍包埋時只要按所需切面包埋，略微不平整可以通過深切將組織切全或者將病灶切全即可；但穿刺組織的直徑小，包埋不平整會導致切不全，可能導致漏診。因此，常規(guī)的冰凍包埋方式并不適用于穿刺組織。

3、目前，對于穿刺組織的冰凍包埋，僅僅有兩種包埋方式，為了便于區(qū)分，分別稱為穿刺組織包埋操作1和穿刺組織包埋操作2。穿刺組織包埋操作1是將樣品頭加冷凍包埋膠冷凍，待冷凍包埋膠完全凝固，放入冰凍切片機內修整出一個平面，平面的作用是提供給穿刺條一個平整的承托，標記樣品頭的相對位置，取出樣品頭，再將穿刺組織一條條鋪在其平面上，隨后在穿刺條上添加冷凍包埋膠，待其凝固，將樣品頭裝回標記的位置，然后粗修細修和出片。穿刺組織包埋操作2是將樣品頭加冷凍包埋膠冷凍，待冷凍包埋膠處于半透明的半凝固狀態(tài)，利用冷凍錘壓在冷凍包埋膠上面，冷凍包埋膠受壓冷凍出一個平面，再將穿刺組織一條條鋪在平面上，隨后在穿刺條上均勻涂抹一層冷凍包埋膠,至全部覆蓋標本，并用冷凍錘輕輕壓平成型，然后進行切片。這兩種包埋方式都有比較明顯的缺陷：第一個缺陷就是包埋過程中，穿刺組織放置于樣品頭上的冰凍切片包埋劑形成的低溫平面時，新鮮穿刺組織與低溫平面接觸時接觸部位會瞬間凝固而無法挪動，可能導致穿刺組織包埋不平整，例如“拱橋”狀，兩端固定住了，中間拱起來，切片時會導致拱起部分被修掉而無法制片；第二個缺陷就是由于樣品頭上凝固的包埋膠提供的平面用于承托穿刺組織，而穿刺組織的直徑并非均一的，這就導致穿刺組織底面平整而切面凹凸不平，如果要將穿刺組織切全，需要損耗不少組織；第三個缺陷就是這兩種包埋方法平鋪穿刺組織后需盡快在穿刺組織上添加冷凍包埋膠，不然會導致穿刺組織凝固后無法與后續(xù)添加的包埋膠融合，穿刺組織與后續(xù)包埋膠分離將無法制片。

4、因此，有必要開發(fā)一種更有利于穿刺組織制片的包埋技術。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的首要目的在于克服現(xiàn)有技術的缺點與不足，提供一種穿刺組織的包埋方法。

2、本發(fā)明的另一目的在于上述穿刺組織的包埋方法在冰凍切片中的應用。

3、本發(fā)明的目的通過下述技術方案實現(xiàn)：一種穿刺組織的包埋方法，包括以下步驟：

4、(1)將冰凍包埋儀預冷至-20℃以下，將包埋槽清理干凈；

5、(2)取穿刺組織放置在平臺上，在穿刺組織表面覆上oct包埋膠，翻動穿刺組織至其完全被oct包埋膠完全包裹；接著將包裹有oct包埋膠的穿刺組織夾出，放置于沒有oct包埋膠的平臺，減少包裹在穿刺組織的oct包埋膠；

6、(3)再將步驟(2)最終得到的穿刺組織平鋪在墊片紙上，按壓，保證穿刺組織與墊片紙完全貼合，用oct包埋膠覆蓋在穿刺組織表面；

7、(4)將步驟(3)得到的墊有穿刺組織的墊片紙放置于包埋槽內，輕壓墊片紙四周，使墊片紙與包埋槽底部貼合；擠出oct包埋膠將包埋槽填滿，放置于預冷的冰凍包埋儀中；蓋上冰凍托，壓上吸熱錘，計時；

8、(5)計時結束，取出冰凍托，包埋完成。

9、步驟(1)中所述的預冷的溫度優(yōu)選為-30℃～-40℃；更優(yōu)選為-35℃。

10、步驟(2)中所述的穿刺組織包括粗針穿刺得到的穿刺組織和細針穿刺得到的穿刺組織。

11、步驟(2)中所述的平臺為定位鏟、拍照板、或其他干凈平面。

12、步驟(3)中所述的墊片紙是具有光透性且柔軟的薄片紙，從而有利于觀察，切片時不傷刀片；優(yōu)選為直徑是3cm的墊片紙。

13、步驟(3)中所述的按壓優(yōu)選為使用鑷子操作。

14、步驟(3)中所述的oct包埋膠的用量優(yōu)選為剛好覆蓋住穿刺組織。

15、步驟(4)中所述的計時的時長優(yōu)選為25～35s；更優(yōu)選為30s。

16、上述穿刺組織的包埋方法在制備冰凍組織切片中的應用。

17、本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術具有如下的優(yōu)點及效果：

18、(1)本發(fā)明由于使用冰凍包埋儀，可以減少組織冰晶的形成，提高切片質量。

19、(2)本發(fā)明由于預先將穿刺組織包裹上冷凍包埋膠，避免了穿刺組織與冷凍包埋膠分離而無法制片。

20、(3)本發(fā)明使用小樣品紙作為承托，可以隨意擺放穿刺組織的位置。

21、(4)本發(fā)明使用小樣品墊片紙找平，可以將穿刺組織切面包埋平整，避免切不全而導致漏診。

22、(5)本發(fā)明包埋出來的組織切面平整，減少了穿刺組織的浪費，給冰凍后石蠟做最后診斷留存更多的組織。

技術特征：

1.一種穿刺組織的包埋方法，其特征在于包括以下步驟：

2.根據(jù)權利要求1所述的穿刺組織的包埋方法，其特征在于：

3.根據(jù)權利要求2所述的穿刺組織的包埋方法，其特征在于：

4.根據(jù)權利要求1所述的穿刺組織的包埋方法，其特征在于：

5.根據(jù)權利要求1所述的穿刺組織的包埋方法，其特征在于：

6.根據(jù)權利要求1所述的穿刺組織的包埋方法，其特征在于：

7.根據(jù)權利要求1所述的穿刺組織的包埋方法，其特征在于：

8.根據(jù)權利要求7所述的穿刺組織的包埋方法，其特征在于：

9.權利要求1～8任一項所述的穿刺組織的包埋方法在制備冰凍組織切片中的應用。

技術總結
本發(fā)明公開了一種穿刺組織的包埋方法與應用。該包埋方法包含如下步驟：在穿刺組織表面覆上OCT包埋膠，翻動穿刺組織至其完全被OCT包埋膠完全包裹；接著將包裹有OCT包埋膠的穿刺組織夾出，放置于沒有OCT包埋膠的平臺；再將穿刺組織平鋪在墊片紙上，按壓，保證穿刺組織與墊片紙完全貼合，用OCT包埋膠覆蓋在穿刺組織表面；將墊有穿刺組織的墊片紙放置于干凈的包埋槽內，輕壓墊片紙四周，使墊片紙與包埋槽底部貼合；擠出OCT包埋膠將包埋槽填滿，放入預冷的冰凍包埋儀中，蓋上冰凍托，壓上吸熱錘，計時；計時結束，取出冰凍托，包埋完成。該方法操作簡單，包埋好之后可以明顯看到穿刺組織，方便將組織切全，有利于冰凍切片的進行。

技術研發(fā)人員：廖華東
受保護的技術使用者：中山大學腫瘤防治中心（中山大學附屬腫瘤醫(yī)院、中山大學腫瘤研究所）
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/1/2