本發(fā)明屬于藥物檢測(cè)，具體涉及一種用于檢測(cè)酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中油酸的方法。

背景技術(shù)：

1、公開(kāi)該背景技術(shù)部分的信息僅僅旨在增加對(duì)本發(fā)明的總體背景的理解，而不必然被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已經(jīng)成為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。

2、酒石酸左沙丁胺醇(r-as)，化學(xué)名稱(chēng)為(r)-4-(2-(叔丁基氨基)-1-羥基乙基)-2-(羥甲基)苯酚(2r,3r)-2,3-二羥基琥珀酸酯，結(jié)構(gòu)式為：

3、

4、r-as能夠激活呼吸道平滑肌中β-2腎上腺素能受體，可使腺苷酸環(huán)化酶活化和細(xì)胞內(nèi)環(huán)磷腺苷的濃度升高，繼而使蛋白激酶a活化，從而抑制肌球蛋白磷酸化和降低鈣離子濃度，使平滑肌舒張。

5、酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑用于預(yù)防或治療可逆性阻塞性氣道疾病患者的支氣管痙攣癥狀。酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中的藥用輔料油酸對(duì)藥品的質(zhì)量影響較大，其作為穩(wěn)定劑，具有穩(wěn)定藥物粒子的作用，確保藥物粒子不會(huì)因?yàn)橥饨绛h(huán)境的變化而聚集或結(jié)晶，從而保持藥物的穩(wěn)定性和有效性。油酸還有其他一些相關(guān)的應(yīng)用和影響。例如，在某些情況下，油酸的注入可能會(huì)導(dǎo)致肺部的損傷，包括肺泡上皮細(xì)胞損傷、巨噬細(xì)胞活化、炎癥反應(yīng)加劇、肺水腫和通氣血流比例失調(diào)等。因此，需要嚴(yán)格控制酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中油酸的含量。

6、藥用輔料油酸含量的檢測(cè)方法在國(guó)內(nèi)外藥典和相關(guān)報(bào)道文獻(xiàn)中多為滴定法和氣相色譜法。滴定法存在人員操作誤差且難以準(zhǔn)確定量。酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中輔料油酸作為表面活性劑，使用量較少，氣霧劑中其他成分干擾較大，且檢測(cè)成本較高，不宜采用氣相色譜法。

7、目前采用uplc法對(duì)油酸含量的測(cè)定未曾有報(bào)道，尤其是含油酸輔料成分的氣霧劑中的油酸含量分析與測(cè)定。故非常有必要建立一套專(zhuān)屬性強(qiáng)、定量準(zhǔn)確、重復(fù)性好的油酸含量測(cè)定分析方法，為該藥品的質(zhì)量控制提供參考。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是提供一種用于檢測(cè)酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中油酸的方法，本發(fā)明提供的采用超高效液相色譜檢測(cè)酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中的油酸，具有靈敏、專(zhuān)屬、準(zhǔn)確、高效、便捷、低成本等優(yōu)勢(shì)，檢測(cè)過(guò)程在3分鐘內(nèi)完成，效率高。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為：

3、本發(fā)明的第一個(gè)方面，提供一種用于檢測(cè)酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中油酸的方法，包括如下步驟：

4、將酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑去除拋射劑后，用甲醇稀釋?zhuān)玫焦┰嚻啡芤海?/p>

5、采用超高效液相色譜對(duì)所述供試品溶液進(jìn)行分析，通過(guò)色譜圖識(shí)別酒石酸左沙丁胺醇及油酸的存在；

6、色譜條件包括：

7、色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；

8、以ph?2.0酸性水溶液為流動(dòng)相a，乙腈為流動(dòng)相b，等度洗脫。

9、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，流動(dòng)相a與流動(dòng)相b的體積比為(18～22):(82～78)，優(yōu)選為20:80。

10、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述ph?2.0酸性水溶液為ph?2.0甲酸水溶液、ph?2.0乙酸水溶液和ph?2.0三氟乙酸水溶液中的一種，優(yōu)選為ph?2.0三氟乙酸水溶液。

11、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，色譜柱為thermo?hypersil?gold?c18(50mm×2.1mm，3μm)或waters?acquity?beh?c18(50mm×2.1mm，1.7μm)。

12、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述色譜條件還包括：柱溫為25～35℃，優(yōu)選為30℃；流速為0.4～0.6ml/min，優(yōu)選為0.5ml/min；進(jìn)樣量為4.5～5.5μl，優(yōu)選為5μl；檢測(cè)波長(zhǎng)為201～205nm，優(yōu)選為203nm。

13、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述色譜條件為：

14、色譜柱為thermo?hypersil?gold?c18(50mm×2.1mm，3μm)；

15、流動(dòng)相a為ph2.0三氟乙酸水溶液，流動(dòng)相b為乙腈，流動(dòng)相a與流動(dòng)相b的體積比為20:80；等度洗脫；

16、檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm，柱溫30℃，流速0.5ml/min，進(jìn)樣量為5μl。

17、本發(fā)明的第二個(gè)方面，提供一種用于定量檢測(cè)酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中油酸的方法，包括如下步驟：

18、將酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑去除拋射劑后，用甲醇稀釋?zhuān)玫焦┰嚻啡芤?；將所述供試品溶液采用上述的方法進(jìn)行超高效液相色譜分析，得到供試品溶液的色譜圖；

19、將油酸甲醇溶液采用上述的方法進(jìn)行超高效相色譜分析，得到油酸甲醇溶液的色譜圖；

20、通過(guò)色譜圖中的峰面積，計(jì)算油酸的含量。

21、在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述供試品溶液的濃度為0.9-1.1％，體積百分?jǐn)?shù)。

22、本發(fā)明的第三個(gè)方面，提供一種酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑的質(zhì)量評(píng)估方法，采用上述的方法。

23、本發(fā)明的第四個(gè)方面，提供檢測(cè)油酸在酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑質(zhì)量控制中的應(yīng)用。

24、本發(fā)明的有益效果為：

25、本發(fā)明提供了一種用于檢測(cè)酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中油酸的方法，采用超高效液相色譜方法進(jìn)行檢測(cè)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以ph?2.0酸性水溶液為流動(dòng)相a，乙腈為流動(dòng)相b，等度洗脫，在3min內(nèi)即可完成檢測(cè)，分析效率高；通過(guò)外標(biāo)法測(cè)定油酸含量，具有靈敏、專(zhuān)屬、準(zhǔn)確、高效、便捷、快速、低成本等優(yōu)點(diǎn)，為酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑質(zhì)量控制提供依據(jù)。

26、本發(fā)明在定量檢測(cè)酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中油酸時(shí)，采用的供試品溶液和油酸甲醇溶液均不干擾油酸測(cè)定，專(zhuān)屬性良好；驗(yàn)證了6份樣品的重復(fù)性，油酸含量的rsd小于2.0％，精密度良好；還驗(yàn)證了油酸在濃度1μg/ml～15μg/ml(10％～150％)范圍的線(xiàn)性及準(zhǔn)確度，油酸在上述范圍內(nèi)r>0.999，回收率在98％～102％之間，線(xiàn)性及準(zhǔn)確度良好。此外，本發(fā)明在不同色譜條件下仍可準(zhǔn)確檢測(cè)，表明本發(fā)明提供的方法耐用性良好。

技術(shù)特征：

1.一種用于檢測(cè)酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中油酸的方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，流動(dòng)相a與流動(dòng)相b的體積比為(18～22):(82～78)，優(yōu)選為20:80。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述ph?2.0酸性水溶液為ph?2.0甲酸水溶液、ph?2.0乙酸水溶液和ph?2.0三氟乙酸水溶液中的一種，優(yōu)選為ph?2.0三氟乙酸水溶液。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，色譜柱為thermo?hypersil?gold?c18(50mm×2.1mm，3μm)或waters?acquity?beh?c18(50mm×2.1mm，1.7μm)。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述色譜條件還包括：柱溫為25～35℃，優(yōu)選為30℃；流速為0.4～0.6ml/min，優(yōu)選為0.5ml/min；進(jìn)樣量為4.5～5.5μl，優(yōu)選為5μl；檢測(cè)波長(zhǎng)為201～205nm，優(yōu)選為203nm。

6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述色譜條件為：

7.一種用于定量檢測(cè)酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中油酸的方法，其特征在于，包括如下步驟：

8.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述供試品溶液的濃度為0.9-1.1％，體積百分?jǐn)?shù)。

9.一種酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑的質(zhì)量評(píng)估方法，其特征在于，采用權(quán)利要求1-8任一所述的方法。

10.檢測(cè)油酸在酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑質(zhì)量控制中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種用于檢測(cè)酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑中油酸的方法，屬于藥物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。該方法包括：將酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑去除拋射劑后，用甲醇稀釋?zhuān)玫焦┰嚻啡芤?；采用超高效液相色譜對(duì)所述供試品溶液進(jìn)行分析，通過(guò)色譜圖識(shí)別酒石酸左沙丁胺醇及油酸的存在；色譜條件包括：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以pH?2.0酸性水溶液為流動(dòng)相A，乙腈為流動(dòng)相B，等度洗脫。該方法在3min內(nèi)即可完成檢測(cè)，分析效率高；通過(guò)外標(biāo)法測(cè)定油酸含量，具有靈敏、專(zhuān)屬、準(zhǔn)確、高效、便捷、快速、低成本等優(yōu)點(diǎn)，為酒石酸左沙丁胺醇吸入氣霧劑質(zhì)量控制提供依據(jù)。

技術(shù)研發(fā)人員：習(xí)雪娥,肖超強(qiáng),羅翔艷,楊秀云,安揚(yáng),何淑旺,胡醒
受保護(hù)的技術(shù)使用者：山東達(dá)因海洋生物制藥股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9