本發(fā)明屬于化學(xué)分析，具體涉及一種利用高效液相色譜法（hplc）測定功能性飲料中?；撬岷康姆椒?。

背景技術(shù)：

1、?；撬嶙鳛橐环N重要的氨基酸，在增強免疫力和抗疲勞方面具有顯著作用，且其還能夠促進智力與腦發(fā)育、保護心臟與血管、增強免疫力、促進糖類與脂類代謝、保護視力與促進視覺發(fā)育、維持正常生殖功能以及抗氧化與抗衰老，在食品、藥品及功能性飲料中有廣泛應(yīng)用。因此，產(chǎn)品中?；撬岷康臏?zhǔn)確測定對于質(zhì)量控制和產(chǎn)品研發(fā)至關(guān)重要。

2、目前，?；撬岬臏y量方法包括中和滴定法、分光光度法、液相色譜法等。其中，高效液相色譜法（hplc）因其高靈敏度和準(zhǔn)確性而受到青睞。但現(xiàn)有的高效液相色譜法在測量牛磺酸時通常需要對樣品進行衍生化處理，以增加檢測的靈敏度和特異性，然而衍生化方法操作復(fù)雜，且可能引入誤差，無法滿足高效、準(zhǔn)確的檢測需求。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種利用hplc測定功能性飲料中?；撬岷康姆椒ā?/p>

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

3、一種hplc測定功能性飲料中牛磺酸含量的方法，其包括如下步驟：

4、1）標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備：精密稱取?；撬釋φ掌酚谌萘科恐校铀芙獠⑾♂屩量潭?，搖勻，得到濃度為1.000mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品母液；臨用前將其進一步稀釋成0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml的系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液；

5、2）樣品溶液的制備：精密量取待測樣品于50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，得適當(dāng)濃度的樣品溶液；

6、3）衍生劑的制備：精密稱取適量9-氯甲酸芴甲酯溶解于乙腈中，配成1.0mg/ml的衍生劑；

7、4）衍生化反應(yīng)：取配制好的系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液與樣品溶液各2ml，于5ml容量瓶中，加入1ml衍生劑混勻，并加乙腈定容至刻度，震蕩反應(yīng)5min；

8、5）高效液相色譜檢測：將衍生化后的系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后，采用高效液相色譜儀進行檢測，之后以系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為橫坐標(biāo)、所得色譜峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計算待測樣品中牛磺酸的含量。

9、進一步地，步驟4）衍生化反應(yīng)過程中還可加入0.5ml、2wt%碳酸氫鈉溶液。

10、進一步地，步驟5）所用高效液相色譜的條件為：色譜柱：kromasil?c18色譜柱（200mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈-0.05mol/l磷酸二氫鉀緩沖液（ph=7.5）等度洗脫，兩者的體積比為28:72；流速：1.0ml·min-1；柱溫：40℃；進樣體積：20μl；檢測波長：265?nm。

11、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具備如下優(yōu)異效果：

12、（1）本發(fā)明提供了一種操作簡便、準(zhǔn)確度高且靈敏度高的牛磺酸含量測定方法，其通過優(yōu)化衍生化試劑和色譜條件，可實現(xiàn)?；撬岬母咝Х蛛x和準(zhǔn)確檢測，滿足了行業(yè)內(nèi)對牛磺酸含量精確測量的需求。

13、（2）本發(fā)明方法適用于食品、藥品、功能性飲料等行業(yè)中牛磺酸含量的精確測量，對于產(chǎn)品質(zhì)量控制、新品研發(fā)以及市場監(jiān)管具有重要意義。

技術(shù)特征：

1.一種hplc測定功能性飲料中牛磺酸含量的方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的hplc測定功能性飲料中牛磺酸含量的方法，其特征在于，步驟4）衍生化反應(yīng)過程中還加入0.5ml、2wt%碳酸氫鈉溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的hplc測定功能性飲料中?；撬岷康姆椒ǎ涮卣髟谟?，步驟5）所用高效液相色譜的條件為：色譜柱：kromasil?c18色譜柱；流動相：乙腈-0.05mol/l磷酸二氫鉀緩沖液（ph=7.5）等度洗脫，兩者體積比為28:72；流速：1.0ml·min-1；柱溫：40℃；進樣體積：20μl；檢測波長：265?nm。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種利用高效液相色譜法（HPLC）測定功能性飲料中牛磺酸含量的方法，其采用9?氯甲酸芴甲酯為衍生劑，通過在衍生化反應(yīng)過程中加入碳酸氫鈉溶液促進衍生物的生成，再采用高效液相色譜進行檢測，可快速、準(zhǔn)確地得到不同功能性飲料中牛磺酸的含量。

技術(shù)研發(fā)人員：朱恒冰,陳文鈺,楊亞勇,華正根,熊爽,康浩,鐘曉茜
受保護的技術(shù)使用者：泉州圣元生物科學(xué)研究院有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6