本發(fā)明屬于藥物檢測(cè)，具體涉及一種同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法。

背景技術(shù)：

1、lxh-2103，化學(xué)名稱為(±)-3-[(1 rs,2 rs)-2-[( n, n-二甲基氨基)亞甲基]-1-羥基環(huán)己基]苯酚鹽酸鹽，分子式：c15h23no2?hcl，分子量：285.81，其結(jié)構(gòu)式為：。

2、lxh-2103為白色固體，屬于弱阿片類，用于治療各種疼痛。

3、目前，臨床上最常用的鎮(zhèn)痛藥為非甾體抗炎鎮(zhèn)痛藥和強(qiáng)阿片類鎮(zhèn)痛藥，雖然在臨床上都取得了較好的療效，但由于非甾體抗炎鎮(zhèn)痛藥作用機(jī)制的局限性，其鎮(zhèn)痛作用弱，且均有不同程度的不良反應(yīng)，如胃腸道反應(yīng)、胃潰瘍、胃出血和變態(tài)反應(yīng)等；強(qiáng)阿片類藥物則由于成癮性、濫用、耐受性和戒斷反應(yīng)等不良反應(yīng)，使得它們?cè)谂R床上的應(yīng)用均受到了很大的限制。

4、lxh-2103無需經(jīng)過生物代謝即可產(chǎn)生鎮(zhèn)痛作用，能克服非甾體抗炎鎮(zhèn)痛藥鎮(zhèn)痛作用弱和強(qiáng)阿片類鎮(zhèn)痛藥不良反應(yīng)大的問題，具有極高的臨床應(yīng)用價(jià)值。

5、lxh-2103的合成制備過程中，存在多種工藝雜質(zhì)，對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)量優(yōu)劣起關(guān)鍵作用，因此質(zhì)量控制尤其重要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提供一種同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法，主峰與各雜質(zhì)峰間的分離度好，精密度高，穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性好，為lxh-2103質(zhì)量控制提供分析手段。

2、本發(fā)明所述的同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法是配制供試品溶液、雜質(zhì)對(duì)照品溶液和對(duì)照溶液，將空白溶液、供試品溶液、雜質(zhì)對(duì)照品溶液和對(duì)照溶液分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按峰面積歸一化法計(jì)算得到供試品溶液中l(wèi)xh-2103的含量，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算得到供試品溶液中雜質(zhì)的含量；其中，雜質(zhì)為lxh-zz1、lxh-zz2、lxh-zz3、lxh-zz4或lxh-zz5中的一種或幾種；

3、lxh-2103的結(jié)構(gòu)式如下：

4、

5、lxh-zz1的結(jié)構(gòu)式如下：

6、

7、lxh-zz2的結(jié)構(gòu)式如下：

8、

9、lxh-zz3的結(jié)構(gòu)式如下：

10、

11、lxh-zz4的結(jié)構(gòu)式如下：

12、

13、lxh-zz5的結(jié)構(gòu)式如下：

14、。

15、供試品溶液的配制方法是稱取lxh-2103樣品，用溶劑溶解并稀釋，制成供試品溶液；供試品溶液中l(wèi)xh-2103的濃度為1.6-2.4mg/ml。

16、雜質(zhì)對(duì)照品溶液的配制方法是lxh-zz1雜質(zhì)貯備液、lxh-zz2雜質(zhì)貯備液、lxh-zz3雜質(zhì)貯備液、lxh-zz4雜質(zhì)貯備液和lxh-zz5雜質(zhì)貯備液混合后用溶劑稀釋，制成雜質(zhì)對(duì)照品溶液；雜質(zhì)對(duì)照品溶液中l(wèi)xh-zz1的濃度為3.2-4.8μg/ml，lxh-zz2、lxh-zz3、lxh-zz4與lxh-zz5的濃度均為1.6-2.4μg/ml。

17、lxh-zz1雜質(zhì)貯備液的制備方法是稱取lxh-zz1對(duì)照品，用溶劑溶解并稀釋，制成lxh-zz1雜質(zhì)貯備液；lxh-zz1雜質(zhì)貯備液中l(wèi)xh-zz1的濃度為80-120μg/ml；

18、lxh-zz2雜質(zhì)貯備液的制備方法是稱取lxh-zz2對(duì)照品，用溶劑溶解并稀釋，制成lxh-zz2雜質(zhì)貯備液；lxh-zz2雜質(zhì)貯備液中l(wèi)xh-zz2的濃度均為40-60μg/ml；

19、lxh-zz3雜質(zhì)貯備液的制備方法是稱取lxh-zz3對(duì)照品，用溶劑溶解并稀釋，制成lxh-zz3雜質(zhì)貯備液；lxh-zz3雜質(zhì)貯備液中l(wèi)xh-zz3的濃度均為40-60μg/ml；

20、lxh-zz4雜質(zhì)貯備液的制備方法是稱取lxh-zz4對(duì)照品，用溶劑溶解并稀釋，制成lxh-zz4雜質(zhì)貯備液；lxh-zz4雜質(zhì)貯備液中l(wèi)xh-zz4的濃度均為40-60μg/ml；

21、lxh-zz5雜質(zhì)貯備液的制備方法是稱取lxh-zz5對(duì)照品，用溶劑溶解并稀釋，制成lxh-zz5雜質(zhì)貯備液；lxh-zz5雜質(zhì)貯備液中l(wèi)xh-zz5的濃度均為40-60μg/ml。

22、對(duì)照溶液的配制方法是精密量取供試品溶液，用溶劑稀釋，制成對(duì)照溶液；對(duì)照溶液中l(wèi)xh-2103的濃度為1.6-2.4μg/ml。

23、溶劑為醋酸鹽緩沖液與甲醇的混合溶液，醋酸鹽緩沖液與甲醇的體積比為65-75:25-35，醋酸鹽緩沖液是由醋酸鈉、冰醋酸和水配制得到。

24、空白溶液為醋酸鹽緩沖液與甲醇的混合溶液，醋酸鹽緩沖液與甲醇的體積比為65-75:25-35，醋酸鹽緩沖液是由醋酸鈉、冰醋酸和水配制得到。

25、hplc方法中的色譜條件包括色譜柱、檢測(cè)器、檢測(cè)波長和流動(dòng)相；色譜柱為c18柱，色譜柱的規(guī)格：柱長為150-250mm，柱內(nèi)徑為4.0-4.6mm，填料粒徑為3.5-5μm，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，色譜柱的柱溫為28-32℃；檢測(cè)器為pda檢測(cè)器或紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長為269-273nm；流動(dòng)相是以醋酸鹽緩沖液為流動(dòng)相a，甲醇為流動(dòng)相b；流動(dòng)相a和流動(dòng)相b的總流速為0.95-1.05ml/min。

26、色譜條件還包括梯度洗脫程序，梯度洗脫程序如下：0-11分鐘，流動(dòng)相a占流動(dòng)相總體積的65-75%，流動(dòng)相b占流動(dòng)相總體積的25-35%；11-16分鐘，流動(dòng)相a占流動(dòng)相總體積的45-55%，流動(dòng)相b占流動(dòng)相總體積的45-55%；16-36分鐘，流動(dòng)相a占流動(dòng)相總體積的45-55%，流動(dòng)相b占流動(dòng)相總體積的45-55%；36-36.1分鐘，流動(dòng)相a占流動(dòng)相總體積的65-75%，流動(dòng)相b占流動(dòng)相總體積的25-35%；36.1-45分鐘，流動(dòng)相a占流動(dòng)相總體積的65-75%，流動(dòng)相b占流動(dòng)相總體積的25-35%。

27、lxh-2103的五種工藝雜質(zhì)見表1。

28、

29、本發(fā)明的有益效果如下：

30、（1）本發(fā)明采用的固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠，能夠同時(shí)檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的含量，達(dá)到一法兩用的目的。

31、（2）本發(fā)明對(duì)于lxh-2103及其雜質(zhì)的分離度高，準(zhǔn)確性及精密度高，穩(wěn)定性及重現(xiàn)性好。

32、（3）本發(fā)明簡單易行，便于工藝及生產(chǎn)過程中對(duì)產(chǎn)品lxh-2103的質(zhì)量進(jìn)行有效控制。

技術(shù)特征：

1.一種同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法，其特征在于配制供試品溶液、雜質(zhì)對(duì)照品溶液和對(duì)照溶液，將空白溶液、供試品溶液、雜質(zhì)對(duì)照品溶液和對(duì)照溶液分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按峰面積歸一化法計(jì)算得到供試品溶液中l(wèi)xh-2103的含量，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算得到供試品溶液中雜質(zhì)的含量；其中，雜質(zhì)為lxh-zz1、lxh-zz2、lxh-zz3、lxh-zz4或lxh-zz5中的一種或幾種；

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法，其特征在于供試品溶液的配制方法是稱取lxh-2103樣品，用溶劑溶解并稀釋，制成供試品溶液；供試品溶液中l(wèi)xh-2103的濃度為1.6-2.4mg/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法，其特征在于雜質(zhì)對(duì)照品溶液的配制方法是lxh-zz1雜質(zhì)貯備液、lxh-zz2雜質(zhì)貯備液、lxh-zz3雜質(zhì)貯備液、lxh-zz4雜質(zhì)貯備液和lxh-zz5雜質(zhì)貯備液混合后用溶劑稀釋，制成雜質(zhì)對(duì)照品溶液；雜質(zhì)對(duì)照品溶液中l(wèi)xh-zz1的濃度為3.2-4.8μg/ml，lxh-zz2、lxh-zz3、lxh-zz4與lxh-zz5的濃度均為1.6-2.4μg/ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法，其特征在于lxh-zz1雜質(zhì)貯備液的制備方法是稱取lxh-zz1對(duì)照品，用溶劑溶解并稀釋，制成lxh-zz1雜質(zhì)貯備液；lxh-zz1雜質(zhì)貯備液中l(wèi)xh-zz1的濃度為80-120μg/ml；

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法，其特征在于對(duì)照溶液的配制方法是精密量取供試品溶液，用溶劑稀釋，制成對(duì)照溶液；對(duì)照溶液中l(wèi)xh-2103的濃度為1.6-2.4μg/ml。

6.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一所述的同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法，其特征在于溶劑為醋酸鹽緩沖液與甲醇的混合溶液，醋酸鹽緩沖液與甲醇的體積比為65-75:25-35。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法，其特征在于醋酸鹽緩沖液是由醋酸鈉、冰醋酸和水配制得到。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法，其特征在于空白溶液為醋酸鹽緩沖液與甲醇的混合溶液，醋酸鹽緩沖液與甲醇的體積比為65-75:25-35，醋酸鹽緩沖液是由醋酸鈉、冰醋酸和水配制得到。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法，其特征在于hplc方法中的色譜條件包括色譜柱、檢測(cè)器、檢測(cè)波長和流動(dòng)相；色譜柱為c18柱，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，色譜柱的柱溫為28-32℃；檢測(cè)器為pda檢測(cè)器或紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長為269-273nm；流動(dòng)相是以醋酸鹽緩沖液為流動(dòng)相a，甲醇為流動(dòng)相b；流動(dòng)相a和流動(dòng)相b的總流速為0.95-1.05ml/min。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的同時(shí)定性和定量檢測(cè)lxh-2103及其雜質(zhì)的hplc方法，其特征在于色譜條件還包括梯度洗脫程序，梯度洗脫程序如下：0-11分鐘，流動(dòng)相a占流動(dòng)相總體積的65-75%，流動(dòng)相b占流動(dòng)相總體積的25-35%；11-16分鐘，流動(dòng)相a占流動(dòng)相總體積的45-55%，流動(dòng)相b占流動(dòng)相總體積的45-55%；16-36分鐘，流動(dòng)相a占流動(dòng)相總體積的45-55%，流動(dòng)相b占流動(dòng)相總體積的45-55%；36-36.1分鐘，流動(dòng)相a占流動(dòng)相總體積的65-75%，流動(dòng)相b占流動(dòng)相總體積的25-35%；36.1-45分鐘，流動(dòng)相a占流動(dòng)相總體積的65-75%，流動(dòng)相b占流動(dòng)相總體積的25-35%。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于藥物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種同時(shí)定性和定量檢測(cè)LXH?2103及其雜質(zhì)的HPLC方法。配制供試品溶液、雜質(zhì)對(duì)照品溶液和對(duì)照溶液，將空白溶液、供試品溶液、雜質(zhì)對(duì)照品溶液和對(duì)照溶液分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按峰面積歸一化法計(jì)算得到供試品溶液中LXH?2103的含量，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算得到供試品溶液中雜質(zhì)的含量；其中，雜質(zhì)為LXH?ZZ1、LXH?ZZ2、LXH?ZZ3、LXH?ZZ4或LXH?ZZ5中的一種或幾種。本發(fā)明主峰與各雜質(zhì)峰間的分離度好，精密度高，穩(wěn)定性好，重現(xiàn)性好，為LXH?2103質(zhì)量控制提供分析手段。

技術(shù)研發(fā)人員：王付榮,鄭忠輝,吳輝,王宜運(yùn),關(guān)清靖,王超學(xué),尹曉強(qiáng),劉娜
受保護(hù)的技術(shù)使用者：山東新華制藥股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/23